内源性和外源性细胞凋亡通路会涉及 Caspase 的级联放大反应。人类蛋白质组中包含数千个已知或假定的 Caspase 剪切位点。大多数 Caspase 底物是在天冬氨酸残基上进行剪切的,这会生成带 DEXD 基序的含天冬氨酸羧基端的众多片段,其中会一些不同。
针对 Caspase 剪切蛋白质组学的 PTMScan® 技术使用靶向 DEXD 基序的专有抗体,可在进行 LC-MS/MS 之前对胰蛋白酶消化样品中已剪切的 Caspase 底物肽进行富集。
Caspase 剪切底物蛋白质组学:该基序标识是在 PTMScan® LC-MS/MS 实验中生成的,期间使用来自 Hela 细胞(经 Staurosporine #9953 处理以诱导细胞凋亡 [1 μM,3 小时])的含天冬氨酸羧基端的 1044 条非冗余性胰蛋白酶肽。这些肽使用了 PTMScan® Cleaved Caspase Substrate Motif [DE(T/S/A)D] Kit #12810 进行富集。该标识表示各位置上氨基酸引导至天冬氨酸羧基端的相对频率。
Cleaved Caspase Substrate Motif [DE(T/S/A)D] MultiMab® Rabbit mAb mix #8698:未经 (-) 或经 Staurosporine #9953 处理(1 μM,3 小时;+)的 NIH/3T3 与 Hela 细胞的蛋白质印迹法分析将 Cleaved Caspase Substrate Motif [DE(T/S/A)D] MultiMab® Rabbit mAb mix(上图)或 GAPHD (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174 作为上样对照(下图)。
靶标描述 | 基序 | 参考数据 |
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靶标描述 | 基序 | 参考数据 |
已剪切的 Caspase 底物 | DEXD |