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SignalSilence® CDK8 siRNA I
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SignalSilence® CDK8 siRNA I #6438

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SignalSilence® CDK8 siRNA I: Image 1
使用 CDK8 (G398) Antibody #4101 和 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125 ,对转染 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-) 或 SignalSilence® CDK8 siRNA I (+) 的 293 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。CDK8 (G398) Antibody 确认 CDK8 表达沉默,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用作上样对照。

支持性数据

反应性 H

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • GP-豚鼠
  • Rab-Rabbit
  • All-预期所有物种

产品使用信息

CST 建议转染 100 nM SignalSilence® CDK8 siRNA I 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程,请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题,请随时联系 CST。

每个小瓶含有相当于 100 次转染的用量,对应于每次转染时 24 孔板中的最终 siRNA 浓度(100 nM),每个孔的总量为 300 μl。

保存

SignalSilence® siRNA 保存在无 RNA 酶的水中。分装并保存在 -20ºC 下。

产品说明

Cell Signaling Technology (CST) 的 SignalSilence® CDK8 siRNA I 能让研究人员使用 RNA 干扰特异性地抑制 CDK8 表达,这种方法通过将双链 RNA 分子递送到细胞内使基因表达选择性沉默。CST 的所有 SignalSilence® siRNA 产品均已经过严格的内部测试,并且蛋白质印迹分析表明可降低靶蛋白表达。

质量控制

通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成,以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA,从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比,以最大程度确保批间一致性。

背景

哺乳动物的介质复合体是一种多亚基蛋白复合体,可使特异转录调节分子偶联到 RNA 聚合酶 II (Pol II) 和基础转录分子组。不同介质亚基与转录因子之间的相互作用可对基因进行特异性调节(1 中已论述)。
介质复合体的相互作用控制多种生物过程,包括胰岛素信号转导 (2)、NF-κB 依赖性信号转导 (3)、干细胞多能性和自我更新 (4,5) 以及结肠癌细胞增殖 (6,7)。
CDK8/周期素 C 与 Med12 和 Med13 共同构成介质复合体中的子复体,研究认为,子复体可作为抑制 Pol II 募集和转录起始的分子开关 (8,9)。结肠癌细胞中 CDK8 表达可解除 β-连环蛋白活性的 E2F-1 依赖性抑制 (9)。结肠癌细胞中的 CDK8 高水平与 β-连环蛋白依赖性高效转录一致,抑制 CDK8 表达可抑制结肠癌细胞增殖 (8)。
CDK8 可磷酸化 STAT1 上的 Ser727,减弱自然杀伤細胞 (NK)的细胞毒性 (10,11)。因此,人们不断研制可增强 NK 细胞活性从而治疗多种类型癌的强效抑制剂药物 (12,13)。
  1. Malik, S. and Roeder, R.G. (2005) Trends Biochem Sci 30, 256-63.
  2. Wang, W. et al. (2009) Dev Cell 16, 764-71.
  3. van Essen, D. et al. (2009) PLoS Biol 7, e73.
  4. Tutter, A.V. et al. (2009) J Biol Chem 284, 3709-18.
  5. Varelas, X. et al. (2008) Nat Cell Biol 10, 837-48.
  6. Firestein, R. et al. (2008) Nature 455, 547-51.
  7. Morris, E.J. et al. (2008) Nature 455, 552-6.
  8. Knuesel, M.T. et al. (2009) Mol Cell Biol 29, 650-61.
  9. Knuesel, M.T. et al. (2009) Genes Dev 23, 439-51.
  10. Bancerek, J. et al. (2013) Immunity 38, 250-62.
  11. Putz, E.M. et al. (2013) Cell Rep 4, 437-44.
  12. Dale, T. et al. (2015) Nat Chem Biol 11, 973-80.
  13. Rzymski, T. et al. (2017) Oncotarget , .

通路与蛋白质

探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。

限制使用

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SignalSilence 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
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