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SignalSilence® Cbl-b siRNA I
siRNA
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SignalSilence® Cbl-b siRNA I #12130

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SignalSilence® Cbl-b siRNA I: 图像 1

使用 Cbl-b (D3C12) Rabbit mAb #9498(上图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图),对转染 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® Cbl-b siRNA I (+) 或 SignalSilence® Cbl-b siRNA II #12122 (+) 的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。Cbl-b (D3C12) Rabbit mAb 确认 Cbl-b 表达沉默,而 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb 则用作上样对照。

支持数据

反应性 H

应用缩写:

  • W-Western
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性缩写:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴子
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-狗
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品使用信息

CST 建议转染 100 nM SignalSilence® Cbl-b siRNA I 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程,请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题,请随时联系 CST。

每个小瓶含有相当于 100 次转染的用量,对应于每次转染时 24 孔板中的最终 siRNA 浓度(100 nM),每个孔的总量为 300 μl。

保存

SignalSilence® siRNA 保存在无 RNA 酶的水中。分装并保存在 -20ºC 下。

产品说明

Cell Signaling Technology (CST) 的 SignalSilence® Cbl-b siRNA I 能让研究人员使用 RNA 干扰特异性地抑制 Cbl-b 表达,这种方法通过将双链 RNA 分子递送到细胞内使基因表达选择性沉默。CST 的所有 SignalSilence® siRNA 产品均已经过严格的内部测试,并且蛋白质印迹分析表明可降低靶蛋白表达。

质量控制

通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成,以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA,从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比,以最大程度确保批间一致性。

背景

Casitas B 谱系淋巴瘤(Cbl)蛋白(在哺乳动物中有 c-Cbl、Cbl-b 和 Cbl-c)是一个单亚基 RING 指蛋白泛素 E3 连接酶家族,包含多个蛋白相互作用基序 (1)。所有 Cbl 蛋白均具有高度保守的 N-末端酪氨酸激酶结合 (TKB) 结构域,该结构域可以介导 Cbl 蛋白与 Cbl 底物上的磷酸化酪氨酸残基之间的相互作用。C-末端至 RING 指,Cbl 蛋白具有富含脯氨酸的结构域,可介导与含有 SH3 结构域蛋白的相互作用。磷酸化的酪氨酸残基可介导与含有 SH2 结构域的蛋白(例如 PI3K 的 p85 亚基)的相互作用。这些蛋白之间的相互作用基序使 Cbl 家族蛋白可作为衔接蛋白 (2)。该衔接因子功能通过靶向特异性底物泛素化和降解来促进 Cbl 蛋白的 E3 依赖性活性。该衔接因子功能还可促成非 E3 依赖性活性,例如聚集参与受体酪氨酸激酶内化的蛋白,将 Cbl 蛋白定位至特定的亚细胞区室以及激活离散信号转导通路 (1)。

Cbl-b 是一种 E3 泛素连接酶,其结构域组织与 c-Cbl 的几乎相同。Cbl-b 在造血细胞生理学中的作用有据可查。Cbl-b 表达对抗原识别期间 TCR 表达的下调非常重要 (2)。Cbl-b 还可以通过其泛素化 PI3K 的 p85 调节亚基的能力充当 Vav 和 Rac1 的 CD28 信号级联放大的有效负调节分子 (3,4)。作为 T 淋巴细胞克隆无反应的关键调节分子,Cbl-b mRNA 和蛋白在钙动员和钙调神经磷酸酶激活后在 T 细胞中上调 (5)。Cbl-b 缺乏的 T 细胞对无反应诱导具有抗性 (5)。约束该表型的分子事件被认为与 PLCγ1 和 PKCθ 泛素化的缺陷有关,这是因为在再刺激野生型无能 T 细胞后发生的这些信号转导分子的降解不能在 Cbl-b 缺陷型 T 细胞中发生 (5)。

  1. Schmidt, M.H. and Dikic, I. (2005) Nat Rev Mol Cell Biol 6, 907-18.
  2. Naramura, M. et al. (2002) Nat Immunol 3, 1192-9.
  3. Naramura, M. et al. (2002) Nat Immunol 3, 1192-9.
  4. Chiang, Y.J. et al. (2000) Nature 403, 216-20.
  5. Fang, D. and Liu, Y.C. (2001) Nat Immunol 2, 870-5.
  6. Heissmeyer, V. et al. (2004) Nat Immunol 5, 255-65.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

限制使用

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
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