产品使用信息
CST 建议转染 100 nM SignalSilence® Cbl-b siRNA I 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程，请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题，请随时联系 CST。
每个小瓶含有相当于 100 次转染的用量，对应于每次转染时 24 孔板中的最终 siRNA 浓度（100 nM），每个孔的总量为 300 μl。
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SignalSilence® siRNA 保存在无 RNA 酶的水中。分装并保存在 -20ºC 下。
产品说明
Cell Signaling Technology (CST) 的 SignalSilence
® Cbl-b siRNA I 能让研究人员使用 RNA 干扰特异性地抑制 Cbl-b 表达，这种方法通过将双链 RNA 分子递送到细胞内使基因表达选择性沉默。CST 的所有 SignalSilence
® siRNA 产品均已经过严格的内部测试，并且蛋白质印迹分析表明可降低靶蛋白表达。
质量控制
通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成，以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA，从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比，以最大程度确保批间一致性。
背景
Casitas B 谱系淋巴瘤（Cbl）蛋白（在哺乳动物中有 c-Cbl、Cbl-b 和 Cbl-c）是一个单亚基 RING 指蛋白泛素 E3 连接酶家族，包含多个蛋白相互作用基序 (1)。所有 Cbl 蛋白均具有高度保守的 N-末端酪氨酸激酶结合 (TKB) 结构域，该结构域可以介导 Cbl 蛋白与 Cbl 底物上的磷酸化酪氨酸残基之间的相互作用。C-末端至 RING 指，Cbl 蛋白具有富含脯氨酸的结构域，可介导与含有 SH3 结构域蛋白的相互作用。磷酸化的酪氨酸残基可介导与含有 SH2 结构域的蛋白（例如 PI3K 的 p85 亚基）的相互作用。这些蛋白之间的相互作用基序使 Cbl 家族蛋白可作为衔接蛋白 (2)。该衔接因子功能通过靶向特异性底物泛素化和降解来促进 Cbl 蛋白的 E3 依赖性活性。该衔接因子功能还可促成非 E3 依赖性活性，例如聚集参与受体酪氨酸激酶内化的蛋白，将 Cbl 蛋白定位至特定的亚细胞区室以及激活离散信号转导通路 (1)。
Cbl-b 是一种 E3 泛素连接酶，其结构域组织与 c-Cbl 的几乎相同。Cbl-b 在造血细胞生理学中的作用有据可查。Cbl-b 表达对抗原识别期间 TCR 表达的下调非常重要 (2)。Cbl-b 还可以通过其泛素化 PI3K 的 p85 调节亚基的能力充当 Vav 和 Rac1 的 CD28 信号级联放大的有效负调节分子 (3,4)。作为 T 淋巴细胞克隆无反应的关键调节分子，Cbl-b mRNA 和蛋白在钙动员和钙调神经磷酸酶激活后在 T 细胞中上调 (5)。Cbl-b 缺乏的 T 细胞对无反应诱导具有抗性 (5)。约束该表型的分子事件被认为与 PLCγ1 和 PKCθ 泛素化的缺陷有关，这是因为在再刺激野生型无能 T 细胞后发生的这些信号转导分子的降解不能在 Cbl-b 缺陷型 T 细胞中发生 (5)。
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Schmidt, M.H. and Dikic, I. (2005) Nat Rev Mol Cell Biol 6, 907-18.
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Naramura, M. et al. (2002) Nat Immunol 3, 1192-9.
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Chiang, Y.J. et al. (2000) Nature 403, 216-20.
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Fang, D. and Liu, Y.C. (2001) Nat Immunol 2, 870-5.
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Heissmeyer, V. et al. (2004) Nat Immunol 5, 255-65.
通路与蛋白质
探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。
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