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SignalSilence® Bub1b siRNA I
siRNA
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SignalSilence® Bub1b siRNA I #6623

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SignalSilence® Bub1b siRNA I: Image 1
使用 Bub1b (D32E8) Rabbit mAb #5421(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对转染 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® Bub1b siRNA I (+) 或 SignalSilence® Bub1b siRNA II #12150 (+) 的 HeLa 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。Bub1b (D32E8) Rabbit mAb 确认 Bub1b 表达沉默,而 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb 则用作上样对照。

支持性数据

反应性 H

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • GP-豚鼠
  • Rab-Rabbit
  • All-预期所有物种

产品使用信息

CST 建议转染 100 nM SignalSilence® Bub1b siRNA I 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程,请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题,请随时联系 CST。

每个小瓶含有相当于 100 次转染的用量,对应于每次转染时 24 孔板中的最终 siRNA 浓度(100 nM),每个孔的总量为 300 μl。

保存

SignalSilence® siRNA 保存在无 RNA 酶的水中。分装并保存在 -20ºC 下。

产品说明

Cell Signaling Technology (CST) 的 SignalSilence® Bub1b siRNA I 能让研究人员使用 RNA 干扰特异性地抑制 Bub1b 表达,这种方法通过将双链 RNA 分子递送到细胞内使基因表达选择性沉默。CST 的所有 SignalSilence® siRNA 产品均已经过严格的内部测试,并且蛋白质印迹分析表明可降低靶蛋白表达。

质量控制

通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成,以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA,从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比,以最大程度确保批间一致性。

背景

包含 Bub1、Bub1b、Bub3、Mad2 和 Cdc20 在内的有丝分裂检查点复合体 (MCC) 可控制染色体分离以及监控丝粒与微管的相互作用 (1)。在有丝分裂期间,MCC 复合体会抑制 Anaphase Promoting Complex/Cyclosome (APC/C) 的泛素连接酶活性,从而防止带有不对齐的染色体的细胞过早地进入细胞分裂后期 (2)。研究表明,Bub1b 和 Bub1 激酶可在不同人种恶性肿瘤中发生突变,包括造血癌、结直肠癌、肺癌和乳腺癌 (3)。在斑花叶非整倍体综合症和过早染色单体分离综合征中均发现 Bub1b 中的双等位基因突变 (4)。Bub1b 小鼠种系敲除是杂合动物的胚胎致死,且其带有显示遗传不稳定性、过早衰老表型和逐渐增加的肿瘤易感性 (5)。Bub3 与 Bub1 和 Bub1b 两者相结合,促进它们向着丝粒募集 (6),并且在微管和着丝粒功能性相互作用中也需要Bub3 (7)。
  1. Fukagawa, T. (2008) Front Biosci 13, 2705-13.
  2. Chen, R.H. (2007) J Biomed Sci 14, 475-9.
  3. Dai, W. et al. (2004) Cancer Res 64, 440-5.
  4. Kops, G.J. et al. (2005) Nat Rev Cancer 5, 773-85.
  5. Baker, D.J. et al. (2004) Nat Genet 36, 744-9.
  6. Taylor, S.S. et al. (1998) J Cell Biol 142, 1-11.
  7. Logarinho, E. et al. (2008) Mol Biol Cell 19, 1798-813.

限制使用

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
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