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12519
SignalSilence® BRCA1 siRNA I
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SignalSilence® BRCA1 siRNA I #12519

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SignalSilence® BRCA1 siRNA I: Image 1
使用 BRCA1 Antibody #9010（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图），对转染 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® BRCA1 siRNA I (+) 或 SignalSilence® BRCA1 siRNA II #12642 (+) 的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。BRCA1 Antibody 确认 BRCA1 表达沉默，而 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb 则用作上样对照。
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支持性数据

反应性 H

应用关键词：

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术
  • E-P-ELISA 肽

物种交叉反应性关键词：

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • All-预期所有物种

产品使用信息

CST 建议转染 100 nM SignalSilence® BRCA1 siRNA I 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程，请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题，请随时联系 CST。

每个小瓶含有相当于 100 次转染的用量，对应于每次转染时 24 孔板中的最终 siRNA 浓度（100 nM），每个孔的总量为 300 μl。

保存

SignalSilence® siRNA 保存在无 RNA 酶的水中。分装并保存在 -20ºC 下。

产品说明

Cell Signaling Technology (CST) 的 SignalSilence® BRCA1 siRNA I 能让研究人员使用 RNA 干扰特异性地抑制 BRCA1 表达，这种方法通过将双链 RNA 分子递送到细胞内使基因表达选择性沉默。CST 的所有 SignalSilence® siRNA 产品均已经过严格的内部测试，并且蛋白质印迹分析表明可降低靶蛋白表达。

质量控制

通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成，以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA，从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比，以最大程度确保批间一致性。

背景

乳腺癌易感蛋白 BRCA1 和 BRCA2 在遗传性乳腺癌和卵巢癌病人体内经常会发生突变，并且在与 DNA 损伤，修复，细胞周期进程，转录，泛素化和细胞凋亡等相关的多个过程中都能发挥作用 (1-4)。据悉， 在 Rad51 定位到双链损伤 (DSB) 区域时 BRCA2 必不可少，并且细胞缺乏 BRCA1 和 BRCA2 就不能通过 Rad51 依赖的同源重组过程 (HR) 修复 DSB (5)。据观察，已经在 BRCA1 蛋白上发现了多个 DNA 损伤诱导的磷酸化位点，其中包括 Ser988、1189、1387、1423、1457、1524和1542，并且依赖于细胞周期的方式激活的激酶，包括 Aurora A 和 CDK2，可分别磷酸化 BRCA1 的 308 和 1497 位丝氨酸 (6-10)。由 CDKs 催化的细胞周期依赖的 BRCA2 3291 位丝氨酸的磷酸化被认为是 BRCA2 阻止 HR 的机制，因为细胞在前进至 S 期时羧基末端的 Rad51 结合区域被屏蔽 (11)。
  1. Rahman, N. and Stratton, M.R. (1998) Annu Rev Genet 32, 95-121.
  2. Gayther, S.A. et al. (1999) Am J Hum Genet 65, 1021-9.
  3. Kerr, P. and Ashworth, A. (2001) Curr Biol 11, R668-76.
  4. Scully, R. and Livingston, D.M. (2000) Nature 408, 429-32.
  5. Tutt, A. and Ashworth, A. (2002) Trends Mol Med 8, 571-6.
  6. Okada, S. and Ouchi, T. (2003) J Biol Chem 278, 2015-20.
  7. Cortez, D. et al. (1999) Science 286, 1162-6.
  8. Xu, B. et al. (2002) Cancer Res 62, 4588-91.
  9. Ouchi, M. et al. (2004) J Biol Chem 279, 19643-8.
  10. Ruffner, H. et al. (1999) Mol Cell Biol 19, 4843-54.
  11. Esashi, F. et al. (2005) Nature 434, 598-604.

通路与蛋白质

探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。

限制使用

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SignalSilence 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
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