反应性 |
产品信息
CST 建议转染 100 nM Bmi1 siRNA I 48 至 72 小时后再进行细胞裂解。对于转染流程,请遵照转染试剂制造商提供的实验步骤。如有任何使用问题,请随时联系 CST。
每个小瓶含有相当于 100 次转染的用量,对应于每次转染时 24 孔板中的最终 siRNA 浓度(100 nM),每个孔的总量为 300 μl。
通过三苯甲基分析来逐个碱基地监视寡核苷酸合成,以确保合适的偶联效率。随后通过亲和固相萃取来纯化寡核苷酸。使用质谱分析法进一步分析退火的双链 RNA,从而验证双链的确切组分。使用质谱分析法将每个批次与上一批次进行对比,以最大程度确保批间一致性。
多梳家族 (PcG) 蛋白有助于细胞身份的维持、干细胞自我更新、细胞周期调节和肿瘤发生,这些功能通过维持一些促进细胞系特异性、细胞死亡和细胞周期停滞的基因的沉默实现 (1-4)。PcG 蛋白存在于两个复合体中,这两个复合体通过表观遗传染色质修饰配合,以维持长期的基因沉默。第一个复合体 EED-EZH2 通过 DNA 结合转录因子被募集到基因上,并在 Lys27 位点甲基化组蛋白 H3。这种组蛋白甲基转移酶活性需要该复合体的 Ezh2、Eed 和 Suz12 亚基 (5)。组蛋白 H3 在 Lys27 位点的甲基化能促进第二个复合体 PRC1 的募集,从而能使组蛋白 H2A 在 Lys119 位点被泛素化 (6)。Bmi1 是 PRC1 复合体的一个组分,能与 Ring1 一起大幅度增强 Ring2 催化亚基的 E3 泛素连接酶活性 (7)。Bmi1 通过抑制 p16 INK4A 和 p19 ARF 基因在调节细胞增殖和衰老中发挥重要作用,并且是维持成体造血和神经干细胞所必需的 (3,4,8-10)。
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