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6396
SignalSilence® Akt2 siRNA
siRNA
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SignalSilence® Akt2 siRNA #6396

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SignalSilence® Akt2 siRNA: Image 1
转染 24 小时后,使用 SignalSilence® Control siRNA (Fluorescein Conjugate) #6201 对Hela 活细胞进行荧光检测,结果表明具有约 100% 的转染效率。
SignalSilence® Akt2 siRNA: Image 2
对转染非靶向 (-) 或 Akt2 (+) siRNA 的 HeLa 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。Akt2 用 Akt2 Antibody #2962 检测,p42 用 p42 MAPK Antibody #9108 检测。Akt2 Antibody 确认 Akt2 表达沉默,而 p42 MAPK Antibody 则用于 Akt2 siRNA 的上样量和特异性对照。

支持性数据

反应性 H

应用关键词:

  • WB- 蛋白质印迹法
  • IP-免疫沉淀法
  • IHC-免疫组织化学法
  • ChIP-染色质免疫沉淀法
  • C&R - CUT&RUN
  • C&T - CUT&Tag
  • DB - 点印迹
  • eCLIP - eCLIP
  • IF-免疫荧光法
  • F-流式细胞术

物种交叉反应性关键词:

  • H-人
  • M-小鼠
  • R-大鼠
  • Hm- 仓鼠
  • Mk-猴
  • Vir- 病毒
  • Mi-水貂
  • C-鸡
  • Dm-黑腹果蝇
  • X-爪蟾
  • Z-斑马鱼
  • B-牛
  • DG-犬
  • PG-猪
  • Sc-酿酒酵母
  • Ce-秀丽隐杆线虫
  • Hr-马
  • GP-豚鼠
  • Rab-Rabbit
  • All-预期所有物种

产品使用信息

CST 建议转染 100 nM SignalSilence® Akt2 siRNA 48-72 小时后再进行细胞裂解。

保存

SignalSilence® siRNA 保存在无 RNA 酶的水中。分装并保存在 -20ºC 下。

产品说明

Cell Signaling Technology 的 SignalSilence® Akt2 siRNA 能让研究人员使用 RNA 干扰特异性地抑制 Akt2 表达,这种方法通过将双链 RNA 分子递送到细胞内使基因表达选择性沉默。所有 SignalSilence® siRNA 产品经严格的内部测试,并且表明可降低特定细胞系中的蛋白表达。
活性 同工型特异性:SignalSilence® Akt2 siRNA 会抑制 Akt2 表达,但不会抑制 Akt1 或 Akt3 表达。

背景

Akt 也称作 PKB 或 Rac,在控制存活和凋亡中发挥至关重要作用 (1-3)。这种蛋白激酶由胰岛素和多种生长和存活因子激活,并在涉及 PI3 激酶的 wortmannin 敏感通路中发挥作用 (2,3)。通过磷脂结合过程并由 PDK1 在 Thr308 位点磷酸化激活环 (4) ,以及通过羧基末端内部 Ser473 处的磷酸化激活 Akt。曾经功能难以捉摸的 PDK2 可在 Ser473 处磷酸化 Akt ,它被鉴定为在含 rictor 和 Sin1 的雷帕霉素中的非敏感复合体中哺乳动物雷帕霉素靶标 (mTOR) (5,6)。Akt 通过磷酸化和失活几种靶标(包括 Bad (7)、叉头转录因子 (8)、c-Raf (9) 和 caspase-9)而抑制凋亡,进而促进细胞存活。PTEN 磷酸酶是 PI3K/Akt 信号转导通路的主要负向调节分子 (10)。LY294002 是特异性 PI3 激酶抑制剂 (11)。Akt 的另一个主要功能是通过磷酸化和失活 GSK-3α 和 β 调节糖原合成 (12,13)。Akt 还可以在胰岛素刺激转运葡萄糖中发挥作用 (12)。除其在存活和糖原合成中的作用外,Akt 还通过防止 GSK-3β 介导的磷酸化和周期蛋白 D1 降解 (14) 并通过负向调节周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白 p27 Kip1 (15) 和 p21 Waf1/Cip1 (16) 来参与细胞周期调节。Akt 还通过直接磷酸化含有 raptor 的雷帕霉素敏感性复合体中的 mTOR,在细胞生长中发挥至关重要作用 (17)。更重要地,Akt 使结节蛋白 (TSC2)( mTOR-raptor 复合体中 mTOR 的抑制物)磷酸化并失活(18,19)。

小干扰 RNA (siRNA) 用于使 CHO 细胞和 3T3-L1 脂肪细胞的 Akt 特异性沉默 (18)。
  1. Franke, T.F. et al. (1997) Cell 88, 435-7.
  2. Burgering, B.M. and Coffer, P.J. (1995) Nature 376, 599-602.
  3. Franke, T.F. et al. (1995) Cell 81, 727-36.
  4. Alessi, D.R. et al. (1996) EMBO J 15, 6541-51.
  5. Sarbassov, D.D. et al. (2005) Science 307, 1098-101.
  6. Jacinto, E. et al. (2006) Cell 127, 125-37.
  7. Cardone, M.H. et al. (1998) Science 282, 1318-21.
  8. Brunet, A. et al. (1999) Cell 96, 857-68.
  9. Zimmermann, S. and Moelling, K. (1999) Science 286, 1741-4.
  10. Cantley, L.C. and Neel, B.G. (1999) Proc Natl Acad Sci USA 96, 4240-5.
  11. Vlahos, C.J. et al. (1994) J Biol Chem 269, 5241-8.
  12. Hajduch, E. et al. (2001) FEBS Lett 492, 199-203.
  13. Cross, D.A. et al. (1995) Nature 378, 785-9.
  14. Diehl, J.A. et al. (1998) Genes Dev 12, 3499-511.
  15. Gesbert, F. et al. (2000) J Biol Chem 275, 39223-30.
  16. Zhou, B.P. et al. (2001) Nat Cell Biol 3, 245-52.
  17. Navé, B.T. et al. (1999) Biochem J 344 Pt 2, 427-31.
  18. Inoki, K. et al. (2002) Nat Cell Biol 4, 648-57.
  19. Manning, B.D. et al. (2002) Mol Cell 10, 151-62.
  20. Katome , T. et al. (2003) J. Biol. Chem. 278(30) , 28312-28323.

通路

探索与本品相关的通路。

限制使用

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
SignalSilence 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的注册商标。
限制使用标签许可,RNA 干扰:本产品获得欧洲专利 1144623 和德国库尔姆巴赫 Ribopharma AG 国外同等机构的许可,仅供非商业研究使用,尤其不得用于 (a) 由或代表某个商业实体进行药物发现或开发,包括靶标识别或验证;(b) 合同研究或商业筛选服务;(c) 生产或制造出售用的 siRNA 相关产品,或 (d) 生成商业数据库出售给第三方。有关这些及其他商业用途的许可信息可从 Ribopharma AG, Fritz-Hornschuch-Str. 9, D-95326 Kulmbach, Germany 处获得。
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300 µl (50-100 次转染)

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