PTMScan^® Wild Type Alpha-Lytic Protease (WaLP) #33036

产品使用信息

在初始蛋白消化步骤中，可将 PTMScan® Wild Type Alpha-Lytic Protease (WaLP) 与 Cell Signaling Technology 获专利的 PTMScan® 实验步骤搭配使用。在添加 WaLP 之前，需将尿素裂解缓冲液中的样品稀释，直至尿素含量为 2M 或更少。按 1:100 的比例稀释 0.4 mg/ml 原液，以进行最终消化，并在 37°C 下孵育过夜。分装并保存在 -20ºC 下。请参阅具体的 PTMScan® 试剂盒和实验步骤，了解有关在任何蛋白样品消化前要添加的相应蛋白酶的更多详情。

保存

保存在 -20°C 时，本产品可保持稳定 12 个月。分装，避免反复冻融。

产品说明

野生型 α-裂解型蛋白酶 (WaLP) 是一种丝氨酸肽链内切酶，这种酶会裂解丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸和缬氨酸氨基酸残基的羧基末端。

特异性/灵敏度

基于 100% 序列同源性预测发生反应的物种：

预期的所有物种

来源/纯化

WaLP 在大肠杆菌中以重组方式产生，纯化后以 10 mM 乙酸钠 (pH 5.0) 的形式提供。

背景

野生型 α-裂解型蛋白酶 (WaLP) 首先从黏细菌产酶溶杆菌中被分离出来 (1)。它是一种在 A、S、T 和 V 残基后裂解的蛋白酶，这使其成为蛋白质组学使用的一种有用的替代性蛋白酶。该酶的前体形式表达为一种 397 氨基酸蛋白，可裂解成一种 198 氨基酸成熟蛋白。现已发表大量关于成熟形式、激活位点和催化机制的研究 (2, 3, 4)。根据晶体结构研究，似乎与其他胰腺丝氨酸蛋白酶有很大的关系 (5)。WaLP 的选择性裂解特异性尤其适用于研究 SUMO 修饰的蛋白质组学，因为它裂解 SUMO 蛋白后留下二甘氨酸基序，使用专属 SUMO 分支基序残留 (K-ε-GG) 抗体便可检测到这种基序 (6）。

1. Whitaker, DR. The alpha-Lytic Protease. Methods in Enzymology, 19, 599-613
2. Sohl, JL, et al., , IntramolecularChaperones and Protein Folding, Landes Company, Austin TX (1995) ISBN 978-1570592928 pp. 61-83
3. Bauer, C.A. et al. (1981) Eur J Biochem 120, 289-94.
4. Bachovchin, W.W. et al. (1981) Proc Natl Acad Sci U S A 78, 7323-6.
5. Olson, M.O. et al. (1970) Nature 228, 438-42.
6. Meyer, J.G. et al. (2014) Mol Cell Proteomics 13, 823-35.

通路与蛋白质

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选择您的通路/蛋白质 蛋白质：P00778

数据库链接

UniProt ID： P00778

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