产品包括 | 容量(计数) | ||||
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PTMScan(R) Phospho-Ser/Thr Motif [pS/T] IAP Beads | 10 x 80 µl | ||||
PTMScan® IAP Buffer (10X) 9993 | 10 x 600 µl |
产品信息
细胞在含尿素的缓冲液中进行裂解,细胞蛋白被蛋白酶消化,所产生的肽通过反相固相提取进行纯化。肽段随后使用接合 protein A agarose beads 的 PTMScan® Motif Antibody 进行免疫亲和纯化。通过洗涤去除未结合的肽,捕获的包含 PTM 的肽用稀酸洗脱。在浓缩富集肽进行 LC-MS/MS 分析前,先在微探针尖端进行反相纯化使肽脱盐,并将肽与抗体分离。CST 建议用试剂盒中包含的 PTMScan® IAP Buffer #9993。该试剂盒还包含详细的实验步骤以及允许使用获专利的 PTMScan® 方法的有限使用许可。
作为细胞分子组功能不可或缺的一部分,蛋白受各种翻译后修饰的调控。其中一个最流行和最受广泛研究的 PTM 是丝氨酸/苏氨酸磷酸化。靶向少量底物共同基序的一些主要激酶是 13,000 多种人蛋白上存在成千上万个已知和预测位点的原因 (1-3)。Cell Signaling Technology 已开发出用于分析激酶底物的蛋白质组特征的磷酸化 Ser/Thr 基序抗体。这其中包括 Akt、AMPK、MAPK、CDK、PKA、PKC 和 CKII 的底物。
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