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14990
PTMScan® Phospho-MAPK Substrate Motif [PXpTP] Kit
蛋白质组分析产品
PTMScan

PTMScan® Phospho-MAPK Substrate Motif [PXpTP] Kit #14990

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PTMScan® Phospho-MAPK Substrate Motif [PXpTP] Kit: Image 1

该图表显示了PhosphoScan® LC-MS/MS 实验中磷酸肽基序的基本分布,这种肽基序使用有丝分裂 HeLa 细胞的 754 条非重复胰蛋白酶肽产生 。HeLa 细胞用胸苷(2 mM,18 小时)处理后再用 诺考达唑 #2190(60 nM,24 分钟)处理,随后使用 PTMScan® Phospho-MAPK Substrate Motif [PXpTP] Immunoaffinity Beads 进行免疫沉淀。

PTMScan® Phospho-MAPK Substrate Motif [PXpTP] Kit: Image 2

使用754 条非重复胰蛋白酶肽进行 PhosphoScan® LC-MS/MS 实验可产生基序标识,这种酶肽来源于用胸苷(2 mM,18 小时)处理后再用 诺考达唑 #2190(60 nM,24 小时)处理,随后经 PTMScan® Phospho-MAPK Substrate Motif [PXpTP] Immunoaffinity Beads 免疫沉淀的有丝分裂 HeLa 细胞。该基序标识表明氨基酸在数据组中指定位置的相对丰度。

产品包括 容量(计数)
PTMScan®Phospho-MAPK Substrate Motif [PXpTP] Immunoaffinity Beads 10 x 80 µl
PTMScan® IAP Buffer (10X) 9993 10 x 600 µl
PTMScan® Limited Use License 1 x 1 次

产品使用信息

细胞在含尿素的缓冲液中进行裂解,细胞蛋白被蛋白酶消化,所产生的肽通过反相固相提取进行纯化。肽段随后使用接合 protein A agarose beads 的 PTMScan® Motif Antibody 进行免疫亲和纯化。通过洗涤去除未结合的肽,捕获的包含 PTM 的肽用稀酸洗脱。在浓缩富集肽进行 LC-MS/MS 分析前,先在微探针尖端进行反相纯化使肽脱盐,并将肽与抗体分离。CST 建议用试剂盒中包含的 PTMScan® IAP Buffer #9993。该试剂盒还包含详细的实验步骤以及允许使用获专利的 PTMScan® 方法的有限使用许可。

保存

抗体微珠以含 50% 甘油的 IAP 缓冲液提供。储存于 -20°C 的温度下。请不要分装抗体。

产品说明

PTMScan® 技术采用 Cell Signaling Technology (CST) 的专有方法通过免疫沉淀实现肽富集,这种方法使用一种特殊微珠接合抗体以及液相色谱法 (LC)-质谱法 (MS/MS) 对细胞蛋白中的翻译后修饰 (PTM) 位点进行定量分析。这包括磷酸化 (PhosphoScan®)、泛素化 (UbiScan®)、乙酰化 (AcetylScan®) 和甲基化 (MethylScan®) 等等。PTMScan® 技术能让研究人员分离、鉴定以及定量大量翻译后修饰的细胞肽,具有高特异性和灵敏度,从而可以全面了解细胞和组织样品中的 PTM,不会对这些修饰位点发生于何处产生任何先入为主的偏见。如需了解更多有关 PTMScan® 蛋白质组服务的信息,请访问 www.cellsignal.com/common/content/content.jsp?id=ptmscan-services

背景

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的 MAPK 和 CDK 家族在增殖和细胞周期控制方面起着重要作用。这些激酶磷酸化脯氨酸残基前的苏氨酸或丝氨酸 (1-3) 。MAPK 通过共有序列 PX (S/T) P 使底物磷酸化,CDK 使含有共有序列 (S/T) PXR/K 的底物磷酸化。Cell Signaling Technology 已开发出与磷酸苏氨酸结合的抗体,以及随后开发出用于 MAPK 和 CDK 底物的探索发现 (4,5) 的脯氨酸、PXS*/T*P 基序和/或 S*PXR/K 基序。

  1. Cross, T.G. et al. (2000) Exp Cell Res 256, 34-41.
  2. Reynolds, C.H. et al. (2000) J Neurochem 74, 1587-95.
  3. Seger, R. and Krebs, E.G. (1995) FASEB J 9, 726-35.
  4. Holmes, J.K. and Solomon, M.J. (1996) J Biol Chem 271, 25240-6.
  5. Songyang, Z. et al. (1996) Mol Cell Biol 16, 6486-93.

限制使用

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。
AcetylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
MethylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PhosphoScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PTMScan 是 Cell Signaling Technology,Inc. 的商标
UbiScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
在某些方法中,使用 Cell Signaling Technology (CST) 基序抗体(例如,美国专利号 7,198,896 和 7,300,753)可能要求获得 CST 的许可证。关于学术许可条款信息,请您的技术转移办公室按照 CST_ip@cellsignal.com 联系 CST 法律部门。关于商业许可条款信息,请按照 ptmscan@cellsignal.com 联系 CST Pharma 服务部门。
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