产品包括 | 容量(计数) | ||||
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PTMScan® Phospho-AMPK Substrate Motif (LXRXXS*/T*) Immunoaffinity Beads | 10 x 80 µl | ||||
PTMScan® IAP Buffer (10X) 9993 | 10 x 600 µl |
产品信息
细胞在含尿素的缓冲液中进行裂解,细胞蛋白被蛋白酶消化,所产生的肽通过反相固相提取进行纯化。肽段随后使用接合 protein A agarose beads 的 PTMScan® Motif antibody 进行免疫亲和纯化。通过洗涤去除未结合的肽,捕获的包含 PTM 的肽用稀酸洗脱。在浓缩富集肽进行 LC-MS/MS 分析前,先在微探针尖端进行反相纯化使肽脱盐,并将肽与抗体分离。CST 建议用试剂盒中包含的 PTMScan® IAP Buffer #9993。该试剂盒还包含详细的实验步骤以及允许使用获专利的 PTMScan® 方法的有限使用许可。
AMP 激活的蛋白激酶 (AMPK) 在酵母、植物和动物中都高度保守,并在调节能量平衡方面起关键作用 (2)。在细胞和环境应激(如热休克、缺氧和缺血)下,AMP/ATP 比值升高会激活激酶 (2)。已确定了一些 AMPKγ 亚基的突变,其中大部分位于假定的 AMP/ ATP 结合位点(CBS 或Bateman域)。这些位点的突变导致 AMPK 活性降低,引起心脏或骨骼肌糖原积累 (2,3)。越来越多的证据表明,AMPK 不仅能调节脂肪酸和糖原的代谢,还能通过 EF2 和 TSC2/mTOR 通路调节蛋白质合成和细胞生长,同时还通过 eNOS/nNOS 调节血流 (2)。AMPK 底物基序 (LXRXXS
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