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12235
PTMScan® Mono-Methyl Arginine Motif [mme-RG] Kit
蛋白质组分析产品
PTMScan

PTMScan® Mono-Methyl Arginine Motif [mme-RG] Kit #12235

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PTMScan® Mono-Methyl Arginine Motif [mme-RG] Kit: 图像 1

饼形图显示了含有单甲基化精氨酸的蛋白的相对类别分布,是通过对来源于HCT细胞的肽段,用Mono-Methyl Arginine (mme-RG) Immunoaffinity Beads® ,经MethylScan® LC-MS/MS 实验后确定的。

PTMScan® Mono-Methyl Arginine Motif [mme-RG] Kit: 图像 2

基序标识是通过对来源于人HCT 116 细胞的 722 个非重复胰蛋白酶解肽,用PTMScan® Mono-Methyl Arginine motif [mme-RG] Immunoaffinity Beads 免疫沉淀,经MethylScan® LC-MS/MS实验后产生。该标识表示氨基酸在中央甲基化精氨酸残基周围的每个位点的相对频率。与人蛋白质组中的整体预计频率相比,甘氨酸残基在单甲基化的精氨酸中较为富集,尤其是在 +1 位点。在总甲基化精氨酸肽中,68% 包含 [mme-RG] 基序。

产品包括 容量(计数)
PTMScan® Mono-Methyl Arginine Motif [mme-RG] Immunoaffinity Beads 10 x 80 µl
PTMScan® IAP Buffer (10X) 9993 10 x 600 µl
PTMScan® Limited Use License 1 x 1 ml

产品使用信息

细胞在含尿素的缓冲液中进行裂解,细胞蛋白被蛋白酶消化,所产生的肽通过反相固相提取进行纯化。肽段随后使用接合 protein A agarose beads 的 PTMScan® Motif Antibody 进行免疫亲和纯化。通过洗涤去除未结合的肽,捕获的包含 PTM 的肽用稀酸洗脱。在浓缩富集肽进行 LC-MS/MS 分析前,先在微探针尖端进行反相纯化使肽脱盐,并将肽与抗体分离。CST 建议用试剂盒中包含的 PTMScan® IAP Buffer #9993。该试剂盒还包含详细的实验步骤以及允许使用获专利的 PTMScan® 方法的有限使用许可。

保存

抗体微珠以含 50% 甘油的 IAP 缓冲液提供。储存于 -20°C 的温度下。请不要分装抗体。

产品说明

PTMScan® 技术采用 Cell Signaling Technology (CST) 的专有方法通过免疫沉淀实现肽富集,这种方法使用一种特殊微珠接合抗体以及液相色谱法 (LC)-质谱法 (MS/MS) 对细胞蛋白中的翻译后修饰 (PTM) 位点进行定量分析。这包括磷酸化 (PhosphoScan®)、泛素化 (UbiScan®)、乙酰化 (AcetylScan®) 和甲基化 (MethylScan®) 等等。PTMScan® 技术能让研究人员分离、鉴定以及定量大量翻译后修饰的细胞肽,具有高特异性和灵敏度,从而可以全面了解细胞和组织样品中的 PTM,对这些修饰位点发生于何处不会具有偏好性 (1)。如需了解更多有关 PTMScan® 蛋白质组服务的信息,请访问 www.cellsignal.com/common/content/content.jsp?id=ptmscan-services

背景

精氨酸甲基化是常见的翻译后修饰,在胞核和细胞浆蛋白中均有发现。精氨酸甲基化蛋白参与许多不同的细胞过程,包括转录调节、信号转导、RNA 代谢和 DNA 损伤修复 (1-3)。精氨酸甲基化由精氨酸 N 甲基转移酶 (PRMT) 的酶家族催化。该酶家族可催化甲基群组从 S-腺苷甲硫氨酸 (AdoMet) 转移到精氨酸胍氮上 (4)。精氨酸甲基化有三种不同形式:非对称二甲基化(aDMA,omega-NG,NG-二甲基精氨酸),其中两个甲基基团在精氨酸胍基氮原子的一端;对称二甲基化(sDMA,omega-NG,NG-二甲基精氨酸),其中每个甲基基团在精氨酸胍基氮原子的一端;单甲基化(MMA,omega-NG-二甲基精氨酸),其中只有一个甲基基团在精氨酸胍基氮原子上。每种修饰都有其潜在的不同功能。尽管所有 PRMT 蛋白都催化 MMA 的形成,但I 型 PRMT (PRMT1, 3, 4, 6) 可新增一个额外的甲基基团,从而产生 aDMA,而 II 型 PRMT (PRMT5 和7)可产生 sDMA。甲基化精氨酸残基经常在富含甘氨酸-精氨酸 (GAR) 蛋白结构域中出现,如 RGG、RG、RXR 重复序列 (5)。但是,PRMT4/CARM1 和 PRMT5 可以甲基化富含脯氨酸-甘氨酸-蛋氨酸 (PGM) 的基序内的精氨酸残基 (6)。

  1. Bedford, M.T. and Richard, S. (2005) Mol Cell 18, 263-72.
  2. Pahlich, S. et al. (2006) Biochim Biophys Acta 1764, 1890-903.
  3. Bedford, M.T. and Clarke, S.G. (2009) Mol Cell 33, 1-13.
  4. McBride, A.E. and Silver, P.A. (2001) Cell 106, 5-8.
  5. Gary, J.D. and Clarke, S. (1998) Prog Nucleic Acid Res Mol Biol 61, 65-131.
  6. Cheng, D. et al. (2007) Mol Cell 25, 71-83.

限制使用

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。
AcetylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
MethylScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PTMScan 是 Cell Signaling Technology,Inc. 的商标
UbiScan 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
美国专利编号9,085,609
在某些方法中,使用 Cell Signaling Technology (CST) 基序抗体(例如,美国专利号 7,198,896 和 7,300,753)可能要求获得 CST 的许可证。关于学术许可条款信息,请您的技术转移办公室按照 CST_ip@cellsignal.com 联系 CST 法律部门。关于商业许可条款信息,请按照 ptmscan@cellsignal.com 联系 CST Pharma 服务部门。
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