PTMScan^® Control Peptides Mono-Methyl Arginine #40061

产品使用信息

配合免疫亲和纯化 (IAP) 步骤使用 Cell Signaling Technology 的 PTMScan^® 试剂盒实验步骤。由于针对每个用户实验的 PTMScan^® 对照肽单甲基精氨酸的最佳量取决于多个独特因素如质谱仪灵敏度，因此用户可以根据需要稀释这些对照肽。

1. 分装 PTMScan^® 对照肽单甲基精氨酸，以便作为一次性使用单位保存在 -20°C ，或继续立即使用。
2. 将样品肽重悬于适当的缓冲液和体积中，例如 1.4 mL PTMScan^® IAP 缓冲液 (1X)。
3. 通过离心使样品肽澄清。
4. 将澄清的样品肽转移到含有 IAP 珠的试管中。
5. 将 10 µL PTMScan^® 对照肽单甲基精氨酸添加到 IAP 珠子和样品肽中并充分混合。
6. 在 2 小时孵育步骤中继续使用 PTMScan^® 或 PTMScan^® HS 工作流程。
7. 检测 LCMS 数据文件中的 PTMScan^® 对照肽单甲基精氨酸。

保存

保存在 -20°C 时，本产品可保持稳定 12 个月。分装，以避免多次冻融循环。

产品说明

PTMScan^® 对照肽单甲基精氨酸使得利用 PTMScan^® 或 PTMScan^® HS 工作流程对免疫亲和富集性能进行质量控制成为可能。这些合成肽包含可通过相关的 PTMScan^® 或 PTMScan^® HS 免疫亲和纯化 (IAP) 珠子富集的专用翻译后修饰 (PTM)，以及可通过质谱仪与内源性肽区分的稳定重同位素。

背景

精氨酸甲基化是常见的翻译后修饰，在胞核和细胞浆蛋白中均有发现。精氨酸甲基化蛋白参与许多不同的细胞过程，包括转录调节、信号转导、RNA 代谢和 DNA 损伤修复 (1-3)。精氨酸甲基化由精氨酸 N 甲基转移酶 (PRMT) 的酶家族催化。该酶家族可催化甲基群组从 S-腺苷甲硫氨酸 (AdoMet) 转移到精氨酸胍氮上 (4)。精氨酸甲基化有三种不同类型：不对称二甲基精氨酸（aDMA, Ω-NG,NG-二甲基精氨酸），其中两个甲基群体在精氨酸胍基氮原子的一端；对称二甲基精氨酸（sDMA, omega-NG, N'G-二甲基精氨酸），其中每个甲基群体在精氨酸胍基氮原子的一端，以及一甲基精氨酸（MMA, Ω-NG-二甲基精氨酸），其中只有一个甲基群体在精氨酸胍基氮原子上。每种修饰都有其潜在的不同功能。尽管所有 PRMT 蛋白都催化 MMA 的形成，但 I 型 PRMT（PRMT1、3、4、6 和 8）加入一个额外的甲基以产生 aDMA，而 II 型 PRMT（PRMT5 和 7）产生 sDMA。甲基化精氨酸残基经常在富含甘氨酸-精氨酸 (GAR) 蛋白结构域中出现，如 RGG、RG、RXR 重复序列 (5)。但是，PRMT4/CARM1 和 PRMT5 可以甲基化富含脯氨酸-甘氨酸-蛋氨酸 (PGM) 的基序内的精氨酸残基 (6)。

1. Bedford, M.T. and Richard, S. (2005) Mol Cell 18, 263-72.
2. Pahlich, S. et al. (2006) Biochim Biophys Acta 1764, 1890-903.
3. Bedford, M.T. and Clarke, S.G. (2009) Mol Cell 33, 1-13.
4. McBride, A.E. and Silver, P.A. (2001) Cell 106, 5-8.
5. Gary, J.D. and Clarke, S. (1998) Prog Nucleic Acid Res Mol Biol 61, 65-131.
6. Cheng, D. et al. (2007) Mol Cell 25, 71-83.