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8359
ULK1 Antibody Sampler Kit
一抗
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ULK1 Antibody Sampler Kit #8359

引用 (8)
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 1
对来自 MCF7 细胞提取物的 ULK1 进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input，泳道 2 用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 进行沉淀，泳道 3 为 ULK1 (D8H5) Rabbit mAb #8054。使用 ULK1 (D8H5) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 2
使用 ULK1 (D8H5) Rabbit mAb #8054 对 RD 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像（左图）显示一抗稀释比例为 1:50 和 1:250 时的单一靶标条带（如图所示）。对应的电泳图（右图）为一抗稀释比例在 1:50（蓝线）和 1:250（绿线）时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下，使用 12-230 kDa 分离模块在 ProteinSimple（BioTechne 品牌）的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 3
使用 Phospho-Raptor (Ser792) Antibody（左上和下）或 Raptor Antibody #2280（右上和下）对未经处理或经 AICAR（0.5 mM，30 分钟）或 oligomycin（0.5 μM，30 分钟）处理的 C2C12 或 293 细胞进行蛋白质印迹分析。

200 kDa 的交叉反应条带*。

ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 4
使用 Raptor (24C12) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 5
使用 Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb（上）或 AMPKα Antibody #2532（下），对未经处理或经寡霉素处理 (0.5 µM) 的 C2C12 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 6
使用 AMPKα (D63G4) Rabbit mAb 对 HeLa、K-562、C6 和 Neuro-2a 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 7
使用 Phospho-ULK1 (Ser555) (D1H4) Rabbit mAb（上图）、ULK1 (D8H5) Rabbit mAb #8054（中图）或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174（下图）对未经处理 (-) 或已经过 AMPK 激活剂 991（50μM，1 小时；＋）处理的对照 U-2 OS 细胞或 CRISPR/Cas9 ULK1 敲除型 (KO) U-2 OS 细胞的提取物进行蛋白质印迹法分析。ULK1 KO 细胞中没有信号证实了抗体对 ULK1 的特异性。ULK1 敲除型细胞由加利福尼亚州拉霍亚索尔克生物研究所的 Reuben Shaw 博士惠赠。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 8
使用 Phospho-ULK1 (Ser757) Antibody（上图）或总 ULK1 (D8H5) Rabbit mAb #8054（下图）对未经处理的 (-)、已经 Torin 1 处理（+；250 nM；5 小时）、或已经 INK128 处理（+；250 nM；5 小时）的 A172 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 9
一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 10
使用 ULK1 (D8H5) Rabbit mAb（上图）、Phospho-ULK1 (Ser555) (D1H4) Rabbit mAb #5869 （中图）或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174（下图）对未经处理 (-) 或已经过 AMPK 激活剂 991（50μM，1 小时；＋）处理的对照 U-2 OS 细胞或 CRISPR/Cas9 ULK1 敲除型 (KO) U-2 OS 细胞的提取物进行蛋白质印迹法分析。ULK1 KO 细胞中没有信号，这证实了抗体对 ULK1.ULK1 敲除型细胞的特异性，该细胞由加州拉霍亚 Salk 生物研究所的 Reuben Shaw 博士惠赠。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 11
使用 Phospho-Raptor (Ser792) Antibody（上）或 Raptor Antibody #4978（下）对未经处理或经 AICAR（2 mM，1 小时）处理的野生型 (WT) 以及 AMPKα1 和 α2 敲除 (KO) 小鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 进行蛋白质印迹分析。（图像由 Salk 生物研究所的 Reuben Shaw 博士提供）。

60、70 和 240 kDa 的交叉反应条带*。

ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 12
使用 Phospho-ULK1 (Ser555) (D1H4) Rabbit mAb 对未处理的或经 oligomycin #9996（0.5 μM，持续30 分钟）处理的 MCF7 细胞提取物，以及未处理的或经过氧化氢（10 mM，持续5分钟）处理的 C2C12 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 13
使用 Phospho-ULK1 (Ser757) Antibody（上图）或 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125（下图）对未经处理或已经 Human Epidermal Growth Factor (hEGF) #8916（100 ng/ml，30 分钟）处理的 A-431 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 14
使用 ULK1 (D8H5) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 15
使用 Phospho-AMPKα (T172) (40H9) Rabbit mAb，对对照（左）或经苯乙双胍处理（右）的石蜡包埋的 NCI-H228 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 16
使用 Phospho-ULK1 (Ser555) (D1H4) Rabbit mAb（左图）对未处理的或经 oligomycin #9996（0.5 µM，持续30 分钟）处理的 MCF7 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。使用磷酸化（中间图）或在 ULK1 的 Ser555 周围区域的非磷酸化肽（右图）来预孵育抗体，从而证实磷酸化的特异性。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 17
使用 ULK1 (D8H5) Rabbit mAb（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对野生型 MEF 和 ULK1 (-/-) MEF 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。MEF 细胞由 Reuben Shaw 博士 (Salk Institute, La Jolla, CA) 惠赠。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 18
使用 Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 19
使用 Phospho-ULK1 (Ser555) (D1H4) Rabbit mAb（上图）或 ULK1 (D8H5) Rabbit mAb #8054（下图）对未处理的 (-) 或经羰基氰化物3-氯苯腙(CCCP)（100 μM，持续2 小时； +）处理的 MCF7 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 20
使用 Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
ULK1 Antibody Sampler Kit: Image 21
使用 Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人卵巢癌细胞进行免疫组织化学分析。
图像库
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To Purchase # 8359T
目录# 规格 价格 库存
8359T		 1 个试剂盒（7 x 20 微升）

定制制剂

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb 2535 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
 H M R Hm Mk Dm Sc 62 兔 IgG
AMPKα (D63G4) Rabbit mAb 5832 20 µl
  • WB
  • IP
 H M R Mk B 62 兔 
Phospho-Raptor (Ser792) Antibody 2083 20 µl
  • WB
 H M R 150 兔 
Raptor (24C12) Rabbit mAb 2280 20 µl
  • WB
  • IP
 H M R Mk 150 兔 
Phospho-ULK1 (Ser555) (D1H4) Rabbit mAb 5869 20 µl
  • WB
  • IP
 H M 140-150 兔 IgG
Phospho-ULK1 (Ser757) Antibody 6888 20 µl
  • WB
 H M Mk 140-150 兔 
ULK1 (D8H5) Rabbit mAb 8054 20 µl
  • WB
  • IP
 H M R Mk 150 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
 Rab 山羊 

产品说明

ULK1 Antibody Sampler Kit 是研究 ULK1 信号转导的一种高性价比方式。该试剂盒包含足量的一抗，每个一抗可进行两次蛋白质印迹分析。

特异性/灵敏度

ULK1 (D8H5) Rabbit mAb、Raptor (24C12) Rabbit mAb 和 AMPKα (D63G4) Rabbit mAb 可识别任何磷酸化状态下对应内源水平的总靶标蛋白。仅当 ULK1 在特定残基上被磷酸化时，Phospho-ULK1 (Ser555) (D1H4) Rabbit mAb 和 Phospho-ULK1 (Ser757) Antibody 才能识别内源水平的 ULK1 。仅当 Raptor 在 Ser792 被磷酸化时，Phospho-Raptor (Ser792) Antibody 才能识别内源水平的 raptor 。仅当 AMPKα 在 Thr172 被磷酸化时，Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb 才能识别内源水平的 AMPKα 。

来源/纯化

使用与人 ULK1 蛋白的 Ser555 周围的残基或人 AMPKα 蛋白的 Thr172 周围的残基相对应的合成磷酸肽，对动物进行免疫接种来产生激活状态的特异性单克隆抗体。使用与人 raptor 蛋白、人 AMPKα 蛋白的 Lys40 周围的残基或人 ULK1 蛋白的 Arg600 周围的残基相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 ULK1 蛋白的 Ser757 周围的残基或人 raptor 蛋白的 Ser792 周围的残基相对应的合成磷酸肽，对动物进行免疫接种来产生激活状态的特异性多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。

背景

两种有关的丝氨酸/苏氨酸激酶类 UNC-51-激酶 1 和 2 (ULK1, ULK2) 被发现是秀丽隐杆线虫基因 unc-51 的哺乳动物同源物，其中突变体表现出异常的轴突延伸和生长 (1-4)。两种蛋白均广泛表达，并且包含一个后跟一个中央脯氨酸/丝氨酸富集结构域的氨基末端激酶结构域以及一个高度保守的羧基末端结构域。ULK1 和 ULK2 在轴突生长中的作用与有关研究相关，这些研究表明激酶位于神经元生长锥，并且与 NGF 等关键生长因子的内吞有关 (5)。酵母双杂交研究发现，ULK1/2 能结合内吞通路的调节物，如 SynGAP 和 syntenin (6)。 使用酵母自噬蛋白 Atg1/Apg1 还可识别 ULK1/2 的结构相似性 (7)。使用 siRNA 的敲除实验表明，ULK1 对自噬非常重要 (8)，自噬是一种降解大量细胞浆内含物的分解代谢过程 (9,10)。Atg1/ULK1 似乎能够作为控制自噬的多重信号聚焦点 (11)，并且能结合许多自噬相关 (Atg) 蛋白，从而调节磷酸化状态和蛋白转运 (12-16)。

Raptor 介导 mTORC1 与 ULK1 的结合，从而在营养充足的条件下磷酸化和抑制 ULK1。AMPK 还直接结合 ULK1，并在营养不足时随时通过磷酸化 raptor 和抑制自噬来逆转 mTORC1 的抑制效果 (17,18)。
  1. Ogura, K. et al. (1994) Genes Dev 8, 2389-400.
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  7. Matsuura, A. et al. (1997) Gene 192, 245-50.
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  17. Shang, L. et al. (2011) Proc Natl Acad Sci U S A 108, 4788-93.
  18. Lee, J.W. et al. (2010) PLoS One 5, e15394.

通路

探索与本品相关的通路。

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