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98863
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit #98863

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TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 1
使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对未处理 (-) 或用 Torin 1 处理(250 nM 处理 4 小时;+)的 RD 细胞进行蛋白质印迹分析。
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对使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb #12741(左图,绿色)标记以及使用 GFAP (GA5) Mouse mAb #3670(右图,红色)和 DAPI #4083(右图,蓝色)共同标记的固定冷冻的小鼠海马体进行共聚焦免疫荧光分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 3
对使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb #12741(左图,绿色)标记以及使用 GFAP (GA5) Mouse mAb #3670(右图,红色)和 DAPI #4083(右图,蓝色)共同标记的固定冷冻的小鼠海马体进行共聚焦免疫荧光分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 4
使用 Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb(上)或 AMPKα Antibody #2532(下),对未经处理或经寡霉素处理 (0.5 µM) 的 C2C12 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
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使用 mTOR (7C10) Rabbit mAb 对 293、A431、COS、C6 和 C2C12 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
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对 MCF-7 细胞提取物的 mTOR 蛋白进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 mTOR (7C10) Rabbit mAb。使用 mTOR (7C10) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
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使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb(上)或 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb #4691(下),对未经处理或经 LY294002/Wortmannin 处理的 PC-3 细胞、经血清饥饿或 PDGF 处理的 NIH/3T3 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
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使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 对重组 Akt1 蛋白、Akt2 蛋白和 Akt3 蛋白及来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
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使用 Phospho-mTOR (Ser2448 位点) (D9C2) XP® Rabbit mAb(上)或 mTOR (7C10) Rabbit mAb #2983 对未经处理或经胰岛素单独处理(150 nM,5 分钟)或经胰岛素结合 λ 磷酸酶处理的血清饥饿 NIH/3T3 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
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使用 AMPKα (D5A2) Rabbit mAb 对 HeLa、K-562、C6 和 Neuro-2a 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
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一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
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使用 TREM2 (E7P8J) 兔单克隆抗体 (羧基末端抗原,特定小鼠)(上图)和 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体 #8457(下图)对未经 (-) 或已经肽-N-糖苷酶 F(PNGase F;+)处理的小鼠骨髓源性巨噬细胞 (BMDM) 和 Neuro-2a 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 13
使用 TREM2 (D8I4C) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或转染带有 Myc 标签的人全长 TREM2 蛋白 (hTREM2-Myc; +) 表达载体的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
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使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对未处理 (-) 或用氯喹处理(50 μM,过夜;+)的 HeLa 、NIH/3T3 和 KNRK 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 15
使用 mTOR (7C10) Rabbit mAb #2983 和 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125 ,对转染 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Fluorescein Conjugate) #6201 (-) 或 SignalSilence® mTOR siRNA II (+) 的 HeLa 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。mTOR (7C10) Rabbit mAb 确认 mTOR 表达沉默,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用于 mTOR siRNA 的上样量和特异性对照。
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对经 Calyculin A #9902(100nM,30 分钟)处理的 Jurkat 提取物中的磷酸化 Akt (Ser473) 进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb,泳道 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP3® Isotype Control #3900。使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
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使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人黑色素瘤进行免疫组织化学分析。
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使用 Phospho-mTOR (Ser2448) (D9C2) XP® Rabbit mAb (绿色)对使用雷帕霉素处理(#9904,10 nM,2 小时,左图)、胰岛素处理(150 nM,6 分钟,中图)或胰岛素和 λ 磷酸酶处理(右图)的 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。用 DY-554 phalloidin 对肌动蛋白丝进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 19
使用 TREM2 (D8I4C) Rabbit mAb (上图) 和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (下图),对 THP-1、HL-60 和 Jurkat 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
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使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠前列腺组织进行免疫组织化学分析。
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使用 Phospho-AMPKα (T172) (40H9) Rabbit mAb,对对照(左)或经苯乙双胍处理(右)的石蜡包埋的 NCI-H228 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 22
使用 mTOR (7C10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌(可显示细胞质定位)进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 23
使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb(左)或 PTEN (138G6) Rabbit mAb #9559(右),对石蜡包埋的 MDA-MB-468 异种移植物进行免疫组织化学分析。注意:PTEN 缺失型 MDA-MB-468 细胞存在 P-Akt 染色。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 24
在对照肽(左)或 Akt (pan) Blocking Peptide #1085(右)存在下,使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 25
对 THP-1 细胞提取物中的 TREM2 进行免疫沉淀分析。泳道 1 为10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 TREM2 (D8I4C) Rabbit mAb。使用 TREM2 (D8I4C) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 26
使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的对照(左图)或用氯喹处理(右图)的 NIH/3T3 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 27
使用 Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 28
在对照肽(左图)或 mTOR Blocking Peptide #1072(右图)存在的情况下,使用 mTOR (7C10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 29
使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb #4060,对经 SignalStain® Antibody Diluent #8112(左)和 TBST/5% Normal Goat Serum(右)对比处理的石蜡包埋人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 30
在 SignalSlide (TM) Phospho-Akt (Ser473) IHC Controls #8101 (石蜡包埋的 LNCaP 细胞(未处理(左)或 LY294002 处理(右)))上使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 31
使用 TREM2 (D8I4C) Rabbit mAb(绿色)对 THP-1(左图,阳性)和 HL-60(右图,阴性)进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight 554 Phalloidin #13054(红色)标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 32
在存在对照肽(左图)或抗原特异性肽(右图)的情况下,使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人鳞状细胞肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 33
使用 Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 34
使用 mTOR (7C10) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠脑进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 35
使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 36
使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb(绿色)对 C2C12 细胞(LY294002 处理(左)或胰岛素处理(右))进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor®555 phalloidin(红色)进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5 (DNA 荧光染料)。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 37
使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb (绿色)和 β-Actin (13E5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate) #8046(红色)对 HeLa(上)和 C2C12(下)细胞进行共聚焦免疫荧光分析,两种细胞用氯喹处理(50 μM,过夜;左)、用 EBSS(3 小时,中)营养饥饿处理或未处理(右)。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 38
使用 Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人卵巢癌细胞进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 39
使用 mTOR (7C10) Rabbit mAb(绿色)对小鼠胚胎成纤维 (MEF) 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 40
在 SignalSlide® Phospho-Akt (Ser473) IHC Controls #8101(未经处理(左图)或经过 LY294002 处理(右图)的石蜡包埋的 LNCaP 细胞)上使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 进行免疫组织化学分析
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 41
使用与非特异性阴性对照抗体(红色)相对比的 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb(蓝色)对 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 42
使用 LC3A/B (D3U4C) Rabbit mAb 对未处理(蓝色)或用氯喹处理(50 µM 处理 16 小时;绿色)的 HeLa 细胞进行流式细胞术分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #4414 作为二抗。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 43
以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)作为对照,使用 mTOR (7C10) Rabbit mAb(实线)对 A549 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 44
使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 45
使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 PTEN 杂合突变小鼠子宫内膜进行免疫组织化学分析。(组织切片由 Brigham and Women's Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA 的 Sabina Signoretti 博士惠赠)
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 46
使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 对未经处理(左)或经 λ 磷酸酶处理(右)的石蜡包埋的 U-87MG 异种移植物进行免疫组织化学分析。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 47
使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb(绿色),对经 LY294002 处理(左)或经胰岛素处理(右)的 C2C12 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor® 555 phalloidin #8953(红色)进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5®#4084(DNA 荧光染料)。
TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit: Image 48
使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对未经处理(绿色)或已经过 LY294002 #9901、Wortmannin #9951 和 U0126 #9903(50 μM,1 μM 和 10 μM,2 小时;蓝色)处理的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
To Purchase # 98863T
目录# 规格 价格 库存
98863T
1 个试剂盒(9 x 20 微升)

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
TREM2 (D8I4C) Rabbit mAb 91068 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
H 28 兔 IgG
TREM2 (E7P8J) Rabbit mAb (Carboxy-terminal Antigen, Mouse Specific) 76765 20 µl
  • WB
M 11, 28 兔 IgG
AMPKα (D5A2) Rabbit mAb 5831 20 µl
  • WB
  • IP
H M R Mk B 62 兔 
Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb 2535 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
H M R Hm Mk Dm Sc 62 兔 IgG
mTOR (7C10) Rabbit mAb 2983 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
  • F
H M R Mk 289 兔 IgG
Phospho-mTOR (Ser2448) (D9C2) XP® Rabbit mAb 5536 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
H M R Mk 289 兔 IgG
Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 4691 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
  • F
H M R Mk Dm 60 兔 IgG
Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 4060 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
  • F
H M R Hm Mk Dm Z B 60 兔 IgG
LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 12741 20 µl
  • WB
  • IHC
  • IF
  • F
H M R 14, 16 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
山羊 

产品说明

TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit 提供了一种通过蛋白质印迹检测 TREM2 下游代谢信号转导通路的经济方法。该试剂盒包含的抗体足以针对每种一抗进行至少两次蛋白质印迹实验。

特异性/灵敏度

TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit 中的每个抗体均可检测其靶标蛋白的内源水平。TREM2 (D8I4C) Rabbit mAb and TREM2 (E7P8J) Rabbit mAb (Carboxy-terminal Antigen, Mouse Specific) 可检测蛋白水解处理产生的全长和羧基末端膜片段。TREM2 (E7P8J) Rabbit mAb (Carboxy-terminal Antigen, Mouse Specific) 还检测到一条迁移至 ~80 kDa 的未知来源的非特异性条带。LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 可检测 LC3A 和 LC3B 总蛋白的内源水平。AMPKα (D5A2) Rabbit mAb 可检测催化亚基的 α1 和 α2 同工型。TREM2-dependent mTOR Metabolic Fitness Antibody Sampler Kit 中的每种磷酸化特异性抗体仅在 Ser473 位点磷酸化时可检测 Akt 的内源水平,仅在 Thr172 位点磷酸化时可检测 AMPKα 的内源水平,仅在 Ser2448 位点磷酸化时可检测 mTOR 蛋白的内源水平。Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb 可检测催化亚基的 α1 和 α2 同工型,但不可检测 β 或 γ 调节亚基。

来源/纯化

使用与人 TREM2 蛋白的 Leu221、人 AMPKα 蛋白的 Arg21、人 mTOR 蛋白的 Ser2481、小鼠 TREM2 蛋白的 Gly215、人 LC3B 蛋白的 Leu44(保存在 LC3A )以及小鼠 Akt 蛋白的羧基末端序列相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生针对总蛋白的单克隆抗体。使用与人 AMPKα 蛋白的 Thr172、人 mTOR 蛋白的 Ser2448 和人 Akt 蛋白的 Ser473 周围残基相对应的合成磷酸肽对动物进行免疫接种来产生磷酸化特异性单克隆抗体。

背景

髓样细胞上表达的触发受体 2 (TREM2) 蛋白是一种先天免疫受体,表达于小胶质细胞、巨噬细胞、破骨细胞与非成熟的树突细胞表面 (1)。TREM2 蛋白在先天免疫中起作用,而且 TREM2 的一种罕见功能变异体 (R47H) 与阿尔茨海默病的迟发风险有关 (1,2)。使用 AD 小鼠模型的研究表明,TREM2 的缺乏和单倍体不足可导致 β-淀粉样蛋白 (Aβ) 积累增加,这是小胶质细胞反应功能障碍的结果 (3)。在 AD 小鼠模型中激活 TREM2 可改善多种形式的 AD 病理,可能是通过小胶质细胞特异性机制 (4,5)。这种机制正在深入研究中,但可能涉及 TREM2 依赖性维持小胶质细胞的能量和生物合成代谢 (6)。自噬是维持细胞代谢的一种机制,在没有 TREM2 的情况下,几种 AMPK 依赖性自噬细胞信号通路得到增强。AMP 激活的蛋白激酶 (AMPK) 在酵母、植物和动物中都高度保守,并在调节能量平衡方面起关键作用 (7)。抑癌基因 LKB1 与辅助蛋白 STRAD 和 MO25 一同将位于活化环里 Thr172 位点的 AMPKα 磷酸化,该位点的磷酸化是 AMPK 激酶活性所必需的 (8-10)。AMPK 进一步受调节细胞信号通路中的几种蛋白质的调节。雷帕霉素的哺乳动物靶标(mTOR、FRAP、RAFT)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(11),其作为 ATP 和氨基酸传感器来平衡营养可用性和细胞生长(12)。mTOR 通过 PI3 激酶/Akt 信号通路在 Ser2448 处磷酸化,并在 Ser2481 位点自磷酸化 (13)。Akt,也称为 PKB 或 Rac,受在 Ser473 位点磷酸化的调节 (14,15)。自噬体中自噬标记轻链 3 (LC3) 的存在以及 LC3 向较低迁移形式 LC3-II 的转化已被用作自噬的指标 (16)。
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通路与蛋白质

探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。

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