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4487
RNAi Machinery Antibody Sampler Kit
一抗
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RNAi Machinery Antibody Sampler Kit #4487

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RNAi Machinery Antibody Sampler Kit: Image 1

使用 Drosha (D28B1) Rabbit mAb 对不同细胞类型提取物进行蛋白质印迹分析。

RNAi Machinery Antibody Sampler Kit: Image 2

在 COS-7 细胞提取物中进行 Argonaute 免疫沉淀法分析2。泳道 1 为 10% 敲入，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® ® Isotype Control #3900，以及泳道 3 为 Argonaute 2 (C34C6) 兔单抗。使用 Argonaute2 (C34C6) 兔单抗进行蛋白质印迹分析。

RNAi Machinery Antibody Sampler Kit: Image 3

在对照肽（左）和抗原特异性肽（右）存在的情况下，使用 Argonaute 1 (D84G10) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺进行免疫组织化学分析。

RNAi Machinery Antibody Sampler Kit: Image 4

使用 Mili (D14F5) XP® Rabbit mAb（绿色）和 Pan-Keratin (C11) Mouse mAb #4545（红色）对小鼠睾丸进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。

RNAi Machinery Antibody Sampler Kit: Image 5

对 293 细胞提取物 Dicer 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb XP Isotype Control #3900，泳道 3 为 Dicer (D38E7) Rabbit mAb。使用 Dicer (D38E7) Rabbit mAb 进行蛋白印迹分析。

RNAi Machinery Antibody Sampler Kit: Image 6

一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。

RNAi Machinery Antibody Sampler Kit: Image 7

使用 Argonaute 2 (C34C6) Rabbit mAb 对不同细胞类型的提取物进行蛋白质印迹分析。

RNAi Machinery Antibody Sampler Kit: Image 8

使用 Argonaute 1 (D84G10) XP® Rabbit mAb 对不同细胞类型的提取物进行蛋白质印迹分析。

RNAi Machinery Antibody Sampler Kit: Image 9

使用 Mili (D14F5) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠睾丸进行免疫组织化学分析。

RNAi Machinery Antibody Sampler Kit: Image 10

使用 Dicer (D38E7) Rabbit mAb 对 MCF7 和 293 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

RNAi Machinery Antibody Sampler Kit: Image 11

使用 Mili (D14F5) XP® Rabbit mAb（上）或 β-Actin Antibody #4967（下）对来自小鼠睾丸和小鼠脑的提取物进行蛋白质印迹分析。

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4487T		 1 个试剂盒(5 x 20 µl)

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产品说明

RNAi Machinery Antibody Sampler Kit 是一种经济合算的方式，可用来分析与内源性 RNA 干扰有关的蛋白。试剂盒包括足量的一抗和二抗，可进行 2 次蛋白质印迹实验。

特异性/敏感性

RNAi Machinery Antibody Sampler Kit 中的每种抗体均可识别其内源水平的靶标蛋白，但不会与其他蛋白发生交叉反应。

来源/纯化

使用与人 Dicer 中 Ala1123 周围残基或小鼠 Mili 蛋白中 Leu118 周围残基相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。使用与小鼠 Argonaute 2 序列或人 Drosha 蛋白中 Gly953 周围序列相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

RNA 干扰 (RNAi) 是真核细胞中基因调节的一个整体机制。通过与 Dicer、Drosha、Argonaute 2 (Ago2) 和 Miwi/Mili 蛋白相互作用，微 RNA (miRNA) 在胞核内被加工并用于使基因沉默和基因表达下调。Dicer 是 RNase III 家族的一员，可特异性剪切双链 RNA 来产生微 RNA (miRNA) (1)。较长的初级转录物（初级 miRNA）被胞核 RNase III Drosha 加工成茎环前 miRNA (2)，随后被转运到细胞浆由 Dicer 进一步加工产生成熟的 22 核苷酸 miRNA (3)。成熟 miRNA 成为 RNA 诱导的沉默复合体 (RISC) 的组成部分，并可结合靶标 mRNA (3) 的 3' UTR。Drosh 初级 miRNA 加工干扰会导致初级 miRNA 增加和前 miRNA 减少 (2)。Drosh 与 DGCR8 等其他组分共同构成一种称为微处理器的多蛋白复合体的一部分 (4)。Drosh 和 DGCR8 对 miRNA 生物生成非常必要 (5)。Argonaute 蛋白家族成员参与微 RNA 介导的基因沉默的各个步骤，例如翻译抑制和 mRNA 转换 (6)。果蝇 piwi 基因被发现是生殖细胞系干细胞自我更新所必需的，其同源物在拟南芥、秀丽隐杆线虫和人等不同物种中都很保守 (7)。Miwi 和 Mili 蛋白是小鼠 Piwi 的两种同源物，包含一个结合雄性生殖细胞中 Piwi 互作 RNA (piRNA) 的羧基末端 Piwi 结构域，并且对小鼠精子发生非常重要 (8-11)。

  1. Hutvágner, G. and Zamore, P.D. (2002) Science 297, 2056-60.
  2. Lee, Y. et al. (2003) Nature 425, 415-9.
  3. Diederichs, S. and Haber, D.A. (2007) Cell 131, 1097-108.
  4. Denli, A.M. et al. (2004) Nature 432, 231-5.
  5. Gregory, R.I. et al. (2004) Nature 432, 235-40.
  6. Peters, L. and Meister, G. (2007) Mol Cell 26, 611-23.
  7. Cox, D.N. et al. (1998) Genes Dev 12, 3715-27.
  8. Kuramochi-Miyagawa, S. et al. (2001) Mech Dev 108, 121-33.
  9. Aravin, A. et al. (2006) Nature 442, 203-7.
  10. Grivna, S.T. et al. (2006) Proc Natl Acad Sci USA 103, 13415-20.
  11. Grivna, S.T. et al. (2006) Genes Dev 20, 1709-14.

通路和蛋白

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