产品货号 | 规格 | 价格 | 库存 |
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4563T | 20 µl | ||
4563S | 100 µl |
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感谢您的耐心等待。
反应性 | H M R Hm Mk Dg |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 140 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
保存在 10mM sodium HEPES(pH 为 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA 和 50% 甘油中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
要进行蛋白质印迹法分析,在 4°C 下,将膜与稀释的一抗放在 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中一起孵育,轻晃孵育一整夜。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
从样品制备至检测,蛋白质印迹法需要用到的试剂在一个套装试剂盒中提供:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
Phospho-MYPT1 (Thr853) Antibody 仅在 Thr853 磷酸化后可检测内源水平的 MYPT1。该抗体也可与40 kDa 未知蛋白发生交叉反应。
人, 小鼠, 大鼠, 仓鼠 , 猴, 犬
使用与人 MYPT1 的 Thr853 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对抗体进行纯化。
蛋白磷酸酶 1 (PP1) 是一种普遍存在的真核蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸酶,可参与不同细胞功能的调节。通过一个调节亚基结合 PP1 催化亚基 (PP1c) 对底物特异性进行检测。估计存在约五十多种不同的调节亚基 (1)。
肌球蛋白磷酸酶全酶由三个亚基组成:PP1c、一个靶向/调节亚基(肌球蛋白磷酸酶 MYPT/肌球蛋白结合亚基)和一个功能未知的 20 kDa 亚基 (M20)。MYPT 结合 PP1cδ 会改变催化裂缝的构象并增强酶活性和特异性 (2)。已描述了61% 相同的两种 MYPT 同工型。MYPT1 蛋白广泛表达,而 MYPT2 蛋白表达似乎仅限于心脏和脑 (3)。相关的家族成员包括 MBS85、MYPT3 和 TIMAP (4)。
在通过小 GTP 酶 Rho 信号转导的刺激下,肌球蛋白磷酸酶可调节肌动蛋白和肌球蛋白之间的相互作用。Rho 活性通过 Rho 相关激酶 (ROCK) 抑制肌球蛋白磷酸酶。MYPT1 在 Thr696 和 Thr853 位点的磷酸化会导致磷酸酶抑制和细胞骨架重组 (5,6)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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