试剂盒使用信息
实验步骤
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2434: 蛋白印迹实验
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3233: 蛋白印迹实验
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3777: 蛋白印迹实验, 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法, 流式细胞术
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4060: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(琼脂糖), 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法, 流式细胞术
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4322: 蛋白印迹实验, 免疫荧光法*, 流式细胞术
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4370: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(琼脂糖), 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法*, 流式细胞术
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7074: 蛋白印迹实验
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8869: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(磁珠)
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14008: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(琼脂糖), 流式细胞术
产品说明
Phospho-EGF Receptor Pathway Sampler Kit 是一种高性价比的方式,用于评估 EGF 受体通路的多个成员激活状态,包括磷酸化 EGF 受体、Stat5、c-Cbl、Shc、Gab1、PLCγ1、Akt 和 p44/42 MAPK。该试剂盒包含足量的一抗和二抗,可进行两次蛋白质印迹实验。
特异性/灵敏度
Phospho-EGF Receptor Pathway Sampler Kit 中每种抗体可识别其特定靶标的磷酸化形式。Phospho-EGF Receptor (Tyr1068) (D7A5) XP® Rabbit mAb 可与酪氨酸磷酸化蛋白发生微弱的交叉反应。Phospho-Gab1 (Tyr627) (C32H2) Rabbit mAb 可与磷酸化 Gab2、Gab3 或激活的受体酪氨酸激酶 (RTK) 发生交叉反应。Phospho-Shc (Tyr239/240) Antibody 可与激活的 EGF 受体蛋白交叉反应。
来源/纯化
使用与人 Shc 的 Tyr239/240 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种,以产生激活态的多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。使用与 c-Cbl 的 Tyr700、人 EGF 受体的 Tyr1068、Stat5a 的 Tyr694、人 Gab1 的 Tyr627、人 Akt 的 Ser473、人 p44 MAP 激酶的 Thr202/Tyr204 或人 pLCγ1 蛋白的 Tyr783 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种,以产生兔单克隆抗体。
背景
表皮生长因子 (EGF) 受体是一种 HER/ErbB 蛋白家族的跨膜酪氨酸激酶。配体结合后,会导致受体二聚化、自磷酸化、下游信号转导激活、内化以及溶酶体降解 (1,2)。激酶结构域中 EGF 受体 (EGFR) 在 Tyr845 的磷酸化具有稳定激活环、维持酶激活状态以及为底物蛋白提供结合表面的作用 (3,4)。c-Src 与 EGFR 在 Tyr845 的磷酸化有关 (5)。PLCγ 的 SH2 结构域在磷酸化的 Tyr992 位点结合,从而激活 PLCγ 介导的下游信号转导 (6)。EGFR 在 Tyr1045 的磷酸化为接头蛋白 c-Cbl 提供了一个主要锚定位点,以便让 EGFR 在激活后进行受体泛素化和降解 (7,8) GRB2 接头蛋白在磷酸化-Tyr1068 位点与激活的 EGFR 相结合 (9)。一对磷酸化的 EGFR 残基(Tyr1148 和 Tyr1173)为 Shc 支架蛋白提供了一个锚定位点,两个位点都参与了 MAP 激酶信号转导的激活 (2)。EGFR 在特定丝氨酸和苏氨酸残基上的磷酸化会降低 EGFR激酶活性。EGFR 羧基末端残基 Ser1046 和 Ser1047 被 CaM 激酶 II 磷酸化,其中任何一个丝氨酸突变都会导致 EGFR 酪氨酸自磷酸化上调 (10)。
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通路与蛋白质
探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。
数据库链接
UniProt ID:
P27361
, P31751
, P29353
, Q9Y243
, P42229
, P51692
, P28482
, P19174
, P00533
, P31749
, Q13480
, P22681
Entrez-Gene Id:
5595
, 208
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, 6777
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, 1956
, 207
, 2549
, 867
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