反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 140 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人
小鼠, 大鼠
使用与人 CDCP1 蛋白的 Tyr806 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。通过蛋白质 A 和肽亲和色谱纯化抗体。
推测 CUB 结构域包含蛋白 1 (CDCP1, SIMA135) 是一种干细胞标记物,而研究显示其在某些人癌细胞、典型和非典型(癌症)结肠中高度表达 (1)。CDCP1 的表达可能受到表观遗传调节,因为启动子 CpG 序列甲基化会导致 CDCP1 表达下降 (2)。相应的 CDCP1 基因可编码糖蛋白,此糖蛋白可作为多结构域跨膜抗原的复合体发挥作用。CDCP1 包含三个可能参与细胞黏附或细胞外基质相互作用的胞外 CUB 结构域 (1,3)。Src 家族激酶可在其胞质结构域内的五个酪氨酸残基上磷酸化 CDCP1,为包含 SH2 结构域的蛋白提供潜在结合位点 (3)。推测 CDCP1 是一种造血干细胞标记物 (4,5)。
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