反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 135 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人
小鼠
使用与人 c-Abl 的 Tyr735 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。通过蛋白质 A 和肽亲和色谱纯化抗体。
c-Abl 原癌基因编码在后生动物进化中广泛表达且高度保守的非受体蛋白酪氨酸激酶。c-Abl 蛋白分布在细胞核和细胞浆中。它在调控细胞增殖、分化、凋亡、细胞黏附以及应激反应过程中起作用 (1-3)。c-Abl 激酶活性通过多样化生理刺激在体内提高,包括整合素激活、PDGF 刺激以及与 c-Jun、Nck 和 RFX1 的结合 (2,4)。c-Abl 激酶活性的体内调控机制尚未完全清晰。Tyr245 位于 SH2 和催化结构域之间的连接区域。这种定位在 Abl 家族成员中较保守。Tyr245 磷酸化作用在激活 c-Abl 激酶时起作用 (5)。此外,Tyr412 磷酸化作用位于 c-Abl 的激酶激活环中,为激酶活性所必需 (6)。
Thr735 位于保守14-3-3蛋白结合基序区域,可以根据应激刺激或 TPA 处理发生磷酸化。Thr735 的磷酸化可能在调节 c-Abl 定位及其功能方面发挥重要作用。
探索与本品相关的通路。
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