反应性 | H |
灵敏度 | 转染性 |
MW (kDa) | 155 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人
小鼠
使用与小鼠 ASK1 的 Thr845 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。通过蛋白质 A 和肽亲和色谱纯化抗体。
凋亡信号调控激酶 1 (ASK1),属于丝裂原激活蛋白激酶,在应激诱发凋亡方面发挥着重要作用 (1,2)。ASK1 在应激相关的刺激作用下,可通过不同机制被激活,进而激活 MKK4 和 MKK3,同时激活 JNK 和 p38 (3)。ASK1 过表达可激活 JNK 和 p38,并通过涉及线粒体细胞死亡通路的信号诱发几种细胞类型凋亡。来自 ASK1-/-老鼠的胚胎成纤维细胞或初级神经元细胞,对应激诱导的 JNK 和 p38 激活以及细胞死亡具有耐受性 (4,5)。Ser967 磷酸化对于 ASK1 相关 14-3-3 蛋白非常重要,可抑制细胞死亡 (6)。氧化应激可诱发 ASK1 激活环中 Ser967 去磷酸化和 Thr845 磷酸化,这两种现象均与 ASK1 活性和 ASK1 依赖型凋亡相关 (7,8)。Akt 能使 ASK1 在 Ser83 位点磷酸化,减弱 ASK1 活性,并促进细胞生存(9)。
探索与本品相关的通路。
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