试剂盒使用信息
实验步骤
-
2938: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(磁珠)
-
3063: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(磁珠)
-
4060: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(琼脂糖), 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法, 流式细胞术
-
4691: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(琼脂糖), 免疫组织化学(石蜡), 免疫荧光法, 流式细胞术
-
7074: 蛋白印迹实验
-
8599: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(磁珠)
-
9018: 蛋白印迹实验, 免疫沉淀法(磁珠), 免疫荧光法, 流式细胞术
产品说明
Phospho-Akt Isoform Antibody Sampler Kit 为您提供了一种经济的手段以磷酸化特异的及对照抗体检测 Akt 家族成员的激活。该试剂盒含有足量的一抗,每种抗体至少可进行两次蛋白质印迹实验。
特异性/灵敏度
试剂盒中每个抗体可识别其内标水平的总特异性靶标蛋白。Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 不会与其他相关蛋白发生交叉反应。Akt1 (C73H10) Rabbit mAb 不与 Akt2 或 Akt3 交叉反应。Akt2 (D6G4) Rabbit mA 不与 Akt1 或 Akt3 交叉反应。Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP®Rabbit mAb 检测仅在 Ser473 磷酸化后的内源水平的 Akt。Phospho-Akt1 (Ser473) (D7F10) XP®Rabbit mAb (Akt1 Specific) 仅在 Ser473 位点磷酸化后可识别内源水平的 Akt1 蛋白。不能检测 Ser474 位点磷酸化的 Akt2 蛋白。Phospho-Akt2 (Ser474) (D3H2) Rabbit mAb (Akt2 Specific) 仅在 Ser474 磷酸化后可识别内源水平的 Akt2 蛋白。该抗体不与 Ser473 磷酸化的 Akt1 蛋白或 Ser472 磷酸化的 Akt3 蛋白发生交叉反应。
来源/纯化
使用与人 Akt 中 Ser473 周围残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb。使用与小鼠 Akt 羧基末端序列残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb。使用与人 Akt1 蛋白 Ser473 周围残基相对应的合成磷酸肽对动物进行免疫接种来产生 Phospho-Akt1 (Ser473) (D7F10) XP® Rabbit mAb (Akt1 Specific)。通过采用人 Akt1 的 Leu110 周围的合成肽对动物进行免疫接种来产生 Akt1 (C73H10) Rabbit mAb 单克隆抗体。使用与人 Akt2 蛋白 Ser474 周围残基相对应的合成磷酸肽对动物进行免疫接种来产生 Phospho-Akt2 (Ser474) (D3H2) Rabbit mAb (Akt2 Specific)。通过采用与人 Akt2 的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生 Akt2 (D6G4) Rabbit mAb。
背景
Akt 也称作 PKB 或 Rac,在控制存活和凋亡中发挥至关重要作用 (1-3)。这种蛋白激酶由胰岛素和多种生长和存活因子激活,并在涉及 PI3 激酶的 wortmannin 敏感通路中发挥作用 (2,3)。通过磷脂结合过程并由 PDK1 在 Thr308 位点磷酸化激活环 (4) ,以及通过羧基末端内部 Ser473 处的磷酸化激活 Akt。曾经功能难以捉摸的 PDK2 可在 Ser473 处磷酸化 Akt ,它被鉴定为在含 rictor 和 Sin1 的雷帕霉素中的非敏感复合体中哺乳动物雷帕霉素靶标 (mTOR) (5,6)。Akt 通过磷酸化和失活几种靶标(包括 Bad (7)、叉头转录因子 (8)、c-Raf (9) 和 caspase-9)而抑制凋亡,进而促进细胞存活。PTEN 磷酸酶是 PI3K/Akt 信号转导通路的主要负向调节分子 (10)。LY294002 是特异性 PI3 激酶抑制剂 (11)。Akt 的另一个主要功能是通过磷酸化和失活 GSK-3α 和 β 调节糖原合成 (12,13)。Akt 还可以在胰岛素刺激转运葡萄糖中发挥作用 (12)。除其在存活和糖原合成中的作用外,Akt 还通过防止 GSK-3β 介导的磷酸化和周期蛋白 D1 降解 (14) 并通过负向调节周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白 p27 Kip1 (15) 和 p21 Waf1/Cip1 (16) 来参与细胞周期调节。Akt 还通过直接磷酸化含有 raptor 的雷帕霉素敏感性复合体中的 mTOR,在细胞生长中发挥至关重要作用 (17)。更重要的是,Akt 磷酸化并失活结节蛋白 (TSC2)(在 mTOR-raptor 复合体中 mTOR 的抑制分子)(18,19)。
在哺乳动物中,有 3 种 Akt 同工型(Akt1、Akt2 和 Akt3)(20)。Akt 激活需要 mTORC2 磷酸化 Akt1 Ser473、Akt2 Ser474 和 Akt3 Ser472 (20)。
-
Franke, T.F. et al. (1997) Cell 88, 435-7.
-
Burgering, B.M. and Coffer, P.J. (1995) Nature 376, 599-602.
-
Franke, T.F. et al. (1995) Cell 81, 727-36.
-
Alessi, D.R. et al. (1996) EMBO J 15, 6541-51.
-
Sarbassov, D.D. et al. (2005) Science 307, 1098-101.
-
Jacinto, E. et al. (2006) Cell 127, 125-37.
-
Cardone, M.H. et al. (1998) Science 282, 1318-21.
-
Brunet, A. et al. (1999) Cell 96, 857-68.
-
Zimmermann, S. and Moelling, K. (1999) Science 286, 1741-4.
-
Cantley, L.C. and Neel, B.G. (1999) Proc Natl Acad Sci USA 96, 4240-5.
-
Vlahos, C.J. et al. (1994) J Biol Chem 269, 5241-8.
-
Hajduch, E. et al. (2001) FEBS Lett 492, 199-203.
-
Cross, D.A. et al. (1995) Nature 378, 785-9.
-
Diehl, J.A. et al. (1998) Genes Dev 12, 3499-511.
-
Gesbert, F. et al. (2000) J Biol Chem 275, 39223-30.
-
Zhou, B.P. et al. (2001) Nat Cell Biol 3, 245-52.
-
Navé, B.T. et al. (1999) Biochem J 344 Pt 2, 427-31.
-
Inoki, K. et al. (2002) Nat Cell Biol 4, 648-57.
-
Manning, B.D. et al. (2002) Mol Cell 10, 151-62.
-
Manning, B.D. and Toker, A. (2017) Cell 169, 381-405.
通路
探索与本品相关的通路。
限制使用
除非 CST 的合法授书代表以书面形式书行明确同意,否书以下条款适用于 CST、其关书方或分书商提供的书品。
任何书充本条款或与本条款不同的客书条款和条件,除非书 CST 的合法授书代表以书面形式书独接受,
否书均被拒书,并且无效。
专品专有“专供研究使用”的专专或专似的专专声明,
且未专得美国食品和专品管理局或其他外国或国内专管机专专专任何用途的批准、准专或专可。客专不得将任何专品用于任何专断或治专目的,
或以任何不符合专专声明的方式使用专品。CST 专售或专可的专品提供专作专最专用专的客专,且专用于研专用途。将专品用于专断、专防或治专目的,
或专专售(专独或作专专成)或其他商专目的而专专专品,均需要 CST 的专独专可。客专:(a) 不得专独或与其他材料专合向任何第三方出售、专可、
出借、捐专或以其他方式专专或提供任何专品,或使用专品制造任何商专专品,(b) 不得复制、修改、逆向工程、反专专、
反专专专品或以其他方式专专专专专品的基专专专或技专,或使用专品开专任何与 CST 的专品或服专专争的专品或服专,
(c) 不得更改或专除专品上的任何商专、商品名称、徽专、专利或版专声明或专专,(d) 只能根据
CST 的专品专售条款和任何适用文档使用专品,
(e) 专遵守客专与专品一起使用的任何第三方专品或服专的任何专可、服专条款或专似专专
仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
第 7,429,487 号美国专利,外国对应物,以及由此而来的儿童专利。
所有其他商标均属各自所有者专有。访问我们的
商标信息页面。