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12651
PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit #12651

引用 (3)
PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 1

使用 Phospho-PDGF Receptor-β (Tyr751) (C63G6) Rabbit mAb (上图)或 PDGF Receptor-β (2B3) Mouse mAb #3175(下图)对未经处理或已经 Platelet-Derived Growth Factor (PDGF) #9909 刺激的 NIH/3T3 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 2

使用 PDGF Receptor β (28E1) Rabbit mAb (绿色)对血清饥饿(左图)或已经 PDGF 处理(右图)的 NIH/3T3 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 3

使用 Phospho-SHP-2 (Tyr542) Antibody (上图)或对照的 SHP-2 Antibody #3752(下图)对饥饿 18 小时后,未经处理或已经 PDGF 处理(50ng/ml,20 分钟)的 C6 和 NIH/3T3 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 4

使用 SHP-2 (D50F2) Rabbit mAb(左图)或 SHP-2 Antibody(右图)对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。这两种抗体可检测人 SHP-2 上的独立、独特表位。使用两种抗体获得的相似染色模式有助于确认染色特异性。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 5

使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对未经(绿色)或已经 LY294002 #9901、Wortmannin #9951 和 U0126 #9903(50 μM、1 μM 和 10 μM,2 小时;蓝色)处理的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 6

使用与非特异性阴性对照抗体(红色)相对比的 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb(蓝色)对 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 7

使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® 兔单克隆抗体(实线)或浓度匹配的兔 (DA1E) 单克隆抗体 IgG XP® 同型对照 #3900(虚线)对经 U0126(10 µM,2 小时;绿色)处理或经 TPA #4174 (200 nM,30 分钟;蓝色)处理的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 8

使用与非特异性阴性对照抗体(红色)相对比的 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb 对经 U0126(蓝色)或 PMA(绿色)处理的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 9

一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 10

使用 PDGF Receptor β (28E1) Rabbit mAb 对冰冻的 U-87MG 异种移植物进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 11

使用 SHP-2 (D50F2) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 12

使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb(绿色),对经 LY294002 处理(左)或经胰岛素处理(右)的 C2C12 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor® 555 phalloidin #8953(红色)进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5®#4084(DNA 荧光染料)。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 13

使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb(绿色)对 C2C12 细胞(LY294002 处理(左)或胰岛素处理(右))进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝用 Alexa Fluor® 555 phalloidin(红色)标记。蓝色伪彩 = DRAQ5™(DNA 荧光染料)。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 14

使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb #4370(绿色)和 S6 Ribosomal Protein (54D2) Mouse mAb #2317(红色),对未经处理(上)或经 λ 磷酸酶处理(下)的果蝇卵泡进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 15

使用 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb(绿色)对经 U0126 (MEK1/2 Inhibitor) #9903(左)或 PDGF(右)处理的 NIH/3T3 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 DY-554 Phalloidin 进行标记(红色)。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 16

使用 PDGF Receptor β (28E1) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 17

使用 SHP-2 (D50F2) Rabbit mAb 对石蜡包埋的 K-562 细胞沉淀物(左图,高表达)或 Saos-2 细胞沉淀物(右图,低表达)进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 18

使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb(左)或 PTEN (138G6) Rabbit mAb #9559(右),对石蜡包埋的 MDA-MB-468 异种移植物进行免疫组织化学分析。注意:PTEN 缺失型 MDA-MB-468 细胞存在 P-Akt 染色。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 19

使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人黑色素瘤进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 20

使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb #4370(绿色)和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700(红色),对饥饿过夜,然后用 U0126 #9903(10 uM,2 小时;左)或 PDBu (Phorbol 12,13-Dibutyrate) #12808(100 nM,15 分钟;右)处理的 HT1080 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 21

使用 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析,显示其定位于细胞质和细胞核。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 22

使用 PDGF Receptor β (28E1) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人成胶质细胞瘤细胞进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 23

使用 SHP-2 (D50F2) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 24

使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb #4060,对经 SignalStain® Antibody Diluent #8112(左)和 TBST/5% Normal Goat Serum(右)对比处理的石蜡包埋人乳腺癌进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 25

在对照肽(左)或 Akt (pan) Blocking Peptide #1085(右)存在下,使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 26

使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb,对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 27

使用 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌细胞进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 28

使用 PDGF Receptor β (28E1) Rabbit mAb 对石蜡包埋的且显示膜定位的 U-87MG 细胞进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 29

使用 SHP-2 (D50F2) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人黑色素瘤进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 30

使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 31

在 SignalSlide (TM) Phospho-Akt (Ser473) IHC Controls #8101 (石蜡包埋的 LNCaP 细胞(未处理(左)或 LY294002 处理(右)))上使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 32

使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb,对未经处理(左)或经 λ 磷酸酶处理(右)的石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 33

在对照肽(左)或 #1240 p44/42 MAPK (Erk1/2) Blocking Peptide (#4695 Specific)(右)存在的情况下,使用 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌细胞进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 34

使用 PDGF Receptor β (28E1) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 35

使用 SHP-2 (D50F2) Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠卵巢进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 36

使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 对 SignalSlide® Phospho-Akt (Ser473) IHC Controls #8101(未经处理(左)或经 LY294002 处理(右)的石蜡包埋的 LNCaP 细胞)进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 37

使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 对重组 Akt1 蛋白、Akt2 蛋白和 Akt3 蛋白及来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 38

使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb on SignalSlide™ Phospho-p44/42 MAPK (Thr202/Tyr204) IHC Controls #8103,(对 U0126 #9903(左)或 TPA # 4174(右)处理的石蜡包埋的 NIH/3T3 细胞)进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 39

使用 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb 对 HeLa、NIH/3T3 和 C6 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 40

使用 SHP-2 (D50F2) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人子宫内膜样腺癌进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 41

使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 42

使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb #4370 和 p44/42 MAPK (Erk1/2) (3A7) Mouse mAb #9107,对未经处理或经 U0126 #9903(10 µM,1 小时)或 TPA #4174(200 nM,10 分钟)处理的 COS 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 43

使用 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb #4695 和 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125 对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Fluorescein Conjugate) #6201 (-) 或 SignalSilence® p44/42 MAPK (Erk1/2) siRNA (+) 转染的 Hek 293 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb 可确认 p44/42 的表达沉默,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用作 p44/42 MAPK (Erk1/2) siRNA 上样和特异性的对照。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 44

使用 SHP-2 (D50F2) Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对对照型 293T 细胞(泳道 1)或 SHP-2 敲除型 293T 细胞(泳道 2)的提取物进行蛋白质印迹法分析。SHP-2 敲除型 293T 细胞中没有信号,这证实了该抗体对 SHP-2 的特异性。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 45

使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 PTEN 杂合突变小鼠子宫内膜进行免疫组织化学分析。(组织切片由 Brigham and Women's Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA 的 Sabina Signoretti 博士惠赠)

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 46

使用 Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb(上)或 p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb #4695(下),对经 λ 磷酸酶或 TPA #4174 处理(如图)的 293 NIH/3T3 和 C6 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 47

使用 SHP-2 (D50F2) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 48

使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 对未经处理(左)或经 λ 磷酸酶处理(右)的石蜡包埋的 U-87MG 异种移植物进行免疫组织化学分析。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 49

对经 Calyculin A #9902(100nM,30 分钟)处理的 Jurkat 提取物中的磷酸化 Akt (Ser473) 进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb,泳道 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP3® Isotype Control #3900。使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit: 图像 50

使用 Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb(上)或 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb #4691(下),对未经处理或经 LY294002/Wortmannin 处理的 PC-3 细胞、经血清饥饿或 PDGF 处理的 NIH/3T3 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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产品说明

PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit 提供一种高性价比的方式来评估 SHP-2、Akt 和 p44/42 MAPK (Erk1/2) 等许多 PDGF 受体通路成员的激活状态。试剂盒包含足量的抗体,每种一抗可以进行 2 次蛋白质印迹实验。

特异性/敏感性

除非另有说明,否则 PDGF Receptor Activation Antibody Sampler Kit 中的每种抗体均可识别内源水平的特定靶标。激活状态的抗体可检测仅在指定位点磷酸化的特定靶标。Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (D13.14.4E) XP® Rabbit mAb 可识别内源水平的在 Erk1 的 Thr202 和 Tyr204 位点(Erk2 的 Thr185/Tyr187 位点)被双重磷酸化以及在 Thr202 位点被单磷酸化的 p44 和 p42 MAP 激酶。Phospho-PDGF Receptor β (Tyr751) (C63G6) Rabbit mAb 会与激活的 PDGF 受体 α 和其他高度过表达的蛋白酪氨酸激酶发生交叉反应。PDGF Receptor β (28E1) Rabbit mAb 会与高度过表达的 PDGF 受体 α 发生交叉反应。Phospho-SHP-2 (Tyr542) Antibody 会与激活的受体酪氨酸激酶发生交叉反应。

来源/纯化

使用与人 SHP-2 蛋白中 Tyr542 周围的残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。使用与人 Akt 的 Ser473、人 p44 MAP 激酶的 Thr202/Tyr204 或人 PDGF 受体 β 的 Tyr751 周围的残基相对应的合成磷酸肽,对动物进行免疫接种来产生活化状态的单克隆抗体。使用与小鼠 Akt 的羧基末端序列、大鼠 p44 MAP 激酶的羧基末端、人 SHP-2 中羧基末端周围残基相对应的合成肽或包含人 PDGF 受体 β 蛋白的羧基末端片段的融合蛋白对动物进行免疫接种来产生对照的单克隆抗体。

背景

血小板源性生长因子 (PDGF) 家族蛋白可形成二聚体(PDGF AA、PDGF AB、PDGF BB、PDGF CC 和 PDGF DD),这些二聚体可以特定方式结合受体酪氨酸激酶 PDGF 受体 α (PDGFRα) 和 PDGF 受体 β (PDGFRβ)。PDGFRβ 同型二聚体结合 PDGF BB 和 DD 同型二聚体以及 PDGF AB 异源二聚体。异聚体受体 PDGF α/β 结合 PDGF B、C 和 D 同型二聚体以及 PDGF AB 异源二聚体 (1)。结合配体会诱导 PDGF 受体二聚化和自磷酸化,随后结合和激活包含细胞浆 SH2 结构域的信号转导分子,如 GRB2、Src、GAP、PI3 激酶、PLCγ 和 NCK。激活的 PDGF 受体会启动调控细胞生长、肌动蛋白重组、迁移和分化的信号转导通路 (2)。PDGFRβ 激酶插入区域的残基 Tyr751 形成 PI3 激酶的锚定位点,并且 PDGFRβ 在该位点的磷酸化会抑制 PI3 激酶 p85 亚基的 SH2 结构域与 PDGFRβ 之间的结合 (3,4)。

SHP-2 (PTPN11) 是一种非受体蛋白酪氨酸磷酸酶,它参与可调控细胞生长、分化、迁移和死亡的信号转导通路 (5)。SHP-2 的激活以及与 Gab1 的结合对生长因子受体和细胞因子下游的 Erk 持续激活非常关键 (6)。在生长因子受体激活后,SHP-2 在 Tyr542 和 Tyr580 位点的磷酸化被认为可解除基本抑制,并刺激 SHP-2 酪氨酸磷酸酶活性 (7,8)。

胰岛素和不同的生长/存活因子会激活 Akt,Akt 是一种在涉及 PI3 激酶的 wortmannin 敏感通路中发挥作用的激酶,有助于调控细胞存活和凋亡 (9-11)。通过磷脂结合过程并由 PDK1 在 Thr308 位点磷酸化激活环 (12) ,以及通过羧基末端内部 Ser473 处的磷酸化激活 Akt。

丝裂原、生长因子和细胞因子等胞外刺激因素都会激活 p44/42 MAPK (Erk1/2) 信号转导通路 (13-15)。研究表明,这个通路是癌症诊治的一个重要靶标 (16)。外部刺激会激活激酶级联,从而使 MAP 激酶激活 p44 和 p42。MEK1 和 MEK2 通过分别使活化环残基 Thr202/Tyr204 和 Thr185/Tyr187 磷酸化,从而激活 p44 和 p42。

临床研究发现 PDGF 在成胶质细胞瘤、前列腺癌等许多不同实体瘤的细胞中表达。在这些肿瘤中,PDGF 信号转导的生物学作用从癌细胞生长的自分泌刺激变成与周围基质甚至是血管生成有关的更为轻微的旁分泌相互作用。靶向 PDGF 信号转导可能是肿瘤治疗的一种有效方式 (17)。

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通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

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