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76696
Non-Homologous End Joining (NHEJ) DNA Repair Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Non-Homologous End Joining (NHEJ) DNA Repair Antibody Sampler Kit #76696

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Non-Homologous End Joining (NHEJ) DNA Repair Antibody Sampler Kit: Image 1

使用 DNA-PKcs (E6U3A) 兔单克隆抗体(实线)或浓度匹配的兔 (DA1E) 单克隆抗体 IgG XP® 同型对照 #3900(虚线)对 M059J 细胞(蓝色)和 M059K 细胞(绿色)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

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使用 Phospho-DNA-PKcs (Ser2056) (E9J4G) 兔单克隆抗体(上图)、全 DNA-PKcs (E6U3A) Rabbit mAb #38168(中间)或 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487(下图)对未经 (-) 或已经新制癌菌素(0.5 µg/ml,1 小时;+)处理以诱导 DNA 双链断裂的 M059K(DNA-PKcs 阳性)和 M059J(DNA-PKcs 阴性)细胞的提取物进行蛋白印迹分析。

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使用 Ku70 (D10A7) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

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使用 Ku80 (C48E7) Rabbit mAb(绿色)对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝用 Alexa Fluor® 555 phalloidin(红色)标记。

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使用 DNA Ligase IV (D5N5N) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

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使用 XLF Antibody 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

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使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (泳道 2)或 Artemis (D7O8V) Rabbit mAb (泳道 3),对 HT-29 细胞提取物中的 Artemis 进行免疫沉淀法分析。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Artemis (D7O8V) Rabbit mAb,进行蛋白质印迹分析。

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一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。

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使用 DNA-PKcs (E6U3A) 兔单克隆抗体(绿色)对 M059K 细胞(左图,阳性)和 M059J 细胞(右图,阴性)进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白微丝由 DyLight554™13054 Phalloidin #(红色)进行标记。

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使用 Ku80 (C48E7) Rabbit mAb 对冷冻的 SKOV-3 异种移植物进行免疫组织化学分析。

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使用 Artemis (D7O8V) Rabbit mAb,对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

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使用 DNA-PKcs (E6U3A) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人乳腺导管癌进行免疫组织化学分析。

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使用 Ku80 (C48E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人胶质母细胞瘤进行免疫组织化学分析。

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使用 DNA-PKcs (E6U3A) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的正常人结肠进行免疫组织化学分析。

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使用 Ku80 (C48E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人类结肠癌进行免疫组织化学分析。

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使用 DNA-PKcs (E6U3A) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人肾细胞癌进行免疫组织化学分析。

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使用 Ku80 (C48E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人黑色素瘤进行免疫组织化学分析。

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使用 DNA-PKcs (E6U3A) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人肺鳞状细胞癌进行免疫组织化学分析。

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使用 Ku80 (C48E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人 GIST 进行免疫组织化学分析。

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使用 DNA-PKcs (E6U3A) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的人子宫内膜癌进行免疫组织化学分析。

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使用 Ku80 (C48E7) Rabbit mAb 对 HeLa 、A549 和 COS 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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使用 DNA-PKcs (E6U3A) 兔单克隆抗体对石蜡包埋的 M059K 细胞沉淀物(左图,阳性)或 M059J 细胞沉淀物(右图,阴性)进行免疫组织化学分析。

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使用 DNA-PKcs (E6U3A) 兔单克隆抗体(上图)或 α-辅肌动蛋白 (D6F6) XP® 兔单克隆抗体 #6487(下图)对 DNA-PKcs 表达水平正常的 M059K 细胞以及缺乏 DNA-PKcs 的 M059J 细胞提取物进行蛋白印迹分析。

购买 # 76696T
产品货号 规格 价格 库存
76696T
1 个试剂盒(7 x 20 µl)

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
DNA-PKcs (E6U3A) Rabbit mAb 38168 20 µl
  • WB
  • IHC
  • IF
  • F
H 450 兔 IgG
Phospho-DNA-PKcs (Ser2056) (E9J4G) Rabbit mAb 68716 20 µl
  • WB
H 450 兔 IgG
Ku70 (D10A7) Rabbit mAb 4588 20 µl
  • WB
H M R Mk 70 兔 IgG
Ku80 (C48E7) Rabbit mAb 2180 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
  • IF
H Mk 86 兔 IgG
DNA Ligase IV (D5N5N) Rabbit mAb 14649 20 µl
  • WB
H 100 兔 IgG
XLF Antibody 2854 20 µl
  • WB
  • IP
H 39 兔 
Artemis (D7O8V) Rabbit mAb 13381 20 µl
  • WB
  • IP
H Mk 90 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
山羊 

产品说明

Non-Homologous End Joining (NHEJ) DNA Repair Antibody Sampler Kit 提供一种经济实惠的方法来检测参与 NHEJ DNA 修复的蛋白。该试剂盒包含的抗体足以使用每种一抗进行两次蛋白印迹实验。

特异性/敏感性

Non-Homologous End Joining (NHEJ) DNA Repair Antibody Sampler Kit 中的每种抗体都能检测其靶蛋白的内源水平。Phospho-DNA-PKcs (Ser2056) (E9J4G) Rabbit mAb 可检测仅在 Ser2056 被磷酸化的 DNA-PKcs 蛋白的内源水平。

来源/纯化

使用与人 DNA-PKcs 蛋白中 Pro608、小鼠 Ku70 蛋白中 Val294、人 Ku80 蛋白中羧基末端、人 DNA 连接酶 IV 蛋白中 Leu771 以及人 artemis 蛋白中 Pro367 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 DNA-PKcs 蛋白中 Ser2056 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生磷酸化特异性单克隆抗体。使用与人 XLF 蛋白中羧基末端周围的氨基酸相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。多克隆抗体经肽亲和层析进行纯化。

背景

DNA 双链断裂 (DSBs) 是潜在的危险损伤,可由电离辐射 (IR)、拟辐射化合物或 DNA 复制抑制剂诱发。细胞通过两种不同但部分重叠的信号转导通路(非同源末端连接 [NHEJ] 和同源重组 [HR])来识别并修复双链断裂 (DSB)。通过 HR 通路实现 DNA 修复,这局限于细胞周期的 S 期和 G2 期,而 NHEJ 可以发生在任何时期。NHEJ 分子组也用于 V(D)J 重组,这是一个会产生免疫球蛋白和 T 细胞受体基因多样性的过程。两条通路的缺损与包括癌症在内的人类疾病有关(1)。

通过 NHEJ 通路进行的 DNA 修复涉及一组核心蛋白,其中包括 Ku 异二聚体 (Ku70/Ku80)、DNA-PKcs、DNA 连接酶 IV、XRCC4 和 XLF。XLF 与 XRCC4 相互作用,并通过 DNA 连接酶 IV 和连接酶辅因子 XRCC4 促进连接 DNA 链。游离 DNA 末端的 ATP 依赖性连接是 NHEJ 修复通路中的最后一步 (2)。DNA 连接酶 IV 和核酸内切酶 artemis 会抑制同源重组并促进 NHEJ (3)。

  1. Hartlerode, A.J. and Scully, R. (2009) Biochem J 423, 157-68.
  2. Tsai, C.J. et al. (2007) Proc Natl Acad Sci U S A 104, 7851-6.
  3. Kurosawa, A. et al. (2013) PLoS One 8, e72253.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

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