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48585
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit #48585

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Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 1
对 Jurkat 细胞提取物 GLTSCR1L 蛋白进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 GLTSCR1L (E9K6F) Rabbit mAb。使用 GLTSCR1L (E9K6F) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 2
使用 GLTSCR1L (E9K6F) Rabbit mAb 对各种细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 3
使用 GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb(上图)或 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487(下图)对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。对 GLTSCR1/GLTSCR1L 双敲除 (KO) 细胞裂解物进行分离,该裂解物由 Kadoch 实验室提供。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 4
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 检测。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina Systems (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示 TCF21 基因内的结合。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 5
使用 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 6
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。‚使用 DNA Library Prep Kit for Illumina®(ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在 TNN 基因内结合。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 7
使用 BRD9 (E9R2I) Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。不出所料,OVCAR-4 细胞的 BRD9 表达较低,并且在 293T 敲除型(KO)细胞中未检测到 BRD9。由 Kadoch 实验室提供并分离 BRD9 KO 细胞裂解物。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 8
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 9
使用 GLTSCR1L (E9K6F) Rabbit mAb(上图)或 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487(下图)对野生型 (WT) 或 GLTSCR1/GLTSCR1L 双敲除型 (KO) Jurkat 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。对 GLTSCR1/GLTSCR1L 双敲除 (KO) 细胞裂解物进行分离,该裂解物由 Kadoch 实验室提供。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 10
对 Jurkat 细胞提取物 GLTSCR1 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb。使用 GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb 进行蛋白印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 11
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 检测。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina Systems (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。这些图显示 TCF21 基因(上图)和 GATA6 基因(下图)内的结合。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 12
使用 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb(上)或 BRM (D9E8B) XP® Rabbit mAb(下)对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 13
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。‚使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在染色体 1(上图)内的结合,包括 TNN 基因(下图)。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 14
对 HDLM-2 细胞提取物 BRD9 蛋白进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 BRD9 (E9R2I) Rabbit mAb。使用 BRD9 (E9R2I) Rabbit mAb 进行蛋白 印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 15
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对未经处理的 NCCIT 细胞的交联染色质与 GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human Oct-4 Promoter Primers #4641、SimpleChIP® Human Sox2 Promoter Primers #4649 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 16
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN 检测。使用人 FOXP2 启动子引物、人 YARS2 启动子引物和人 PXDNL 启动子引物,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 17
对来自 NCCIT 细胞提取物的 Brg1 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% input,泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,而泳道 3 是 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb。使用 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 18
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers #7707、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517 和 human ITM2A upstream primers 进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 19
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中培养 4 天,然后用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 Brg1 (D1Q7F) XP® Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina®(ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。本图显示整个 ENSA 基因范围的结合作用。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 20
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中培养 4 天,然后用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 Brg1 (D1Q7F) XP® Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina®(ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 ESR1(上图)内的结合,包括 Brg1 的已知靶基因 (参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)和 ENSA 基因。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 21
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中培养 4 天,随后用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 Brg1 (D1Q7F) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human ESR1 Promoter Primers #9673、SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
To Purchase # 48585T
目录# 规格 价格 库存
48585T
1 个试剂盒(4 x 20 微升)

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 49360 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
  • C&R
H M R Mk 220 兔 IgG
BRD9 (E9R2I) Rabbit mAb 58906 20 µl
  • WB
  • IP
H Mk 80 兔 IgG
GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb 45441 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
  • C&R
H Mk 205 兔 IgG
GLTSCR1L (E9K6F) Rabbit mAb 92805 20 µl
  • WB
  • IP
H M R Mk 140 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
Rab 山羊 

产品说明

The Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit provides an economical means of detecting non-canonical BAF complex members using antibodies. 该试剂盒包含的抗体足以使用每种一抗进行两次蛋白印迹实验。

特异性/灵敏度

Each antibody in the Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit detects endogenous levels of its target protein.

来源/纯化

Monoclonal antibodies are produced by immunizing animals with synthetic peptides corresponding to residues surrounding Pro576 of human BRD9 protein, Pro1545 of human GLTSCR1 protein, recombinant protein specific to the amino terminus of human Brg1 protein and human GLTSCR1L protein.

背景

ATP 依赖性染色质重构复合体在调控各种胞核的过程中(例如:基因表达、DNA 复制和修复的过程中)起着重要作用 (1,2)。SWI/SNF 染色质重构复合体由 10 个以上的亚基和一个单分子的 ATP 酶催化性亚基 BRM 或 BRG1(仅两者之一)组成。这两种亚基的活性可促进组蛋白-DNA 接触的瓦解,组蛋白-DNA 接触能够导致染色质内部关键调控元件的可接近性发生改变 (2-5)。含有 SWI/SNF 复合体的 BRM/BRG1 被转录因子如核受体、p53、RB 和 BRCA1 召集至靶启动子以调控基因激活、细胞生长、细胞周期和分化过程 (1,6-9)。
GLTSCR1 and its paralog GLTSCR1L, along with BRD9, have been identified as unique subunits of the non-canonical BAF (ncBAF) or GBAF complex. 该复合体包含 GLTSCR1 或 GLTSCR1L,而不是 ARID 亚基,同时也不包含 BAF45、BAF47 和 BAF57 亚基。GBAF 对应于不同于 PBAF 和典型 BAF 复合体的区域,并且被证实是 BAF 诱导癌症(如滑膜肉瘤和横纹肌样瘤)的一个合成致命靶标 (10-12)。

限制使用

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