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48585
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit #48585

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Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 1
对 Jurkat 细胞提取物 GLTSCR1L 蛋白进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 GLTSCR1L (E9K6F) Rabbit mAb。使用 GLTSCR1L (E9K6F) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 2
使用 GLTSCR1L (E9K6F) Rabbit mAb 对各种细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 3
使用 GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb(上图)或 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487(下图)对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。对 GLTSCR1/GLTSCR1L 双敲除 (KO) 细胞裂解物进行分离,该裂解物由 Kadoch 实验室提供。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 4
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 检测。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina Systems (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示 TCF21 基因内的结合。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 5
使用 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 6
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。‚使用 DNA Library Prep Kit for Illumina®(ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在 TNN 基因内结合。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 7
使用 BRD9 (E9R2I) Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。不出所料,OVCAR-4 细胞的 BRD9 表达较低,并且在 293T 敲除型(KO)细胞中未检测到 BRD9。由 Kadoch 实验室提供并分离 BRD9 KO 细胞裂解物。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 8
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 9
使用 GLTSCR1L (E9K6F) Rabbit mAb(上图)或 α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb #6487(下图)对野生型 (WT) 或 GLTSCR1/GLTSCR1L 双敲除型 (KO) Jurkat 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。对 GLTSCR1/GLTSCR1L 双敲除 (KO) 细胞裂解物进行分离,该裂解物由 Kadoch 实验室提供。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 10
对 Jurkat 细胞提取物 GLTSCR1 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb。使用 GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb 进行蛋白印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 11
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 检测。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina Systems (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。这些图显示 TCF21 基因(上图)和 GATA6 基因(下图)内的结合。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 12
使用 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb(上)或 BRM (D9E8B) XP® Rabbit mAb(下)对来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 13
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 进行 CUT&RUN 分析。‚使用 DNA Library Prep Kit for Illumina® (ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。该图显示在染色体 1(上图)内的结合,包括 TNN 基因(下图)。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 14
对 HDLM-2 细胞提取物 BRD9 蛋白进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 BRD9 (E9R2I) Rabbit mAb。使用 BRD9 (E9R2I) Rabbit mAb 进行蛋白 印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 15
使用 SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9005 对未经处理的 NCCIT 细胞的交联染色质与 GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human Oct-4 Promoter Primers #4641、SimpleChIP® Human Sox2 Promoter Primers #4649 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 16
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN 检测。使用人 FOXP2 启动子引物、人 YARS2 启动子引物和人 PXDNL 启动子引物,通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量分析。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 17
对来自 NCCIT 细胞提取物的 Brg1 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% input,泳道 2 是 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,而泳道 3 是 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb。使用 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 18
使用 CUT&RUN Assay Kit #86652 对 NCCIT 细胞和 Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 或 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (CUT&RUN) #66362 进行 CUT&RUN。使用 SimpleChIP® Human HoxA1 Intron 1 Primers #7707、SimpleChIP® Human HoxA2 Promoter Primers #5517 和 human ITM2A upstream primers 进行实时 PCR 来对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 19
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中培养 4 天,然后用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 Brg1 (D1Q7F) XP® Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina®(ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。本图显示整个 ENSA 基因范围的结合作用。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 20
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中培养 4 天,然后用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 Brg1 (D1Q7F) XP® Rabbit mAb 后,进行染色质免疫沉淀。使用 DNA Library Prep Kit for Illumina®(ChIP-seq, CUT&RUN) #56795 制备 DNA 库。结果图显示在 ESR1(上图)内的结合,包括 Brg1 的已知靶基因 (参见包含 ChIP-qPCR 数据的其他结果图)和 ENSA 基因。
Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit: Image 21
使用 SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003,对在无酚红培养基和 5% 活性炭剥离的 FBS 中培养 4 天,随后用 β-雌二醇(10 nM,45 分钟)处理的 MCF7 细胞中提取的交联染色质,在加入 Brg1 (D1Q7F) XP® Rabbit mAb 或 Normal Rabbit IgG #2729 后,进行染色质免疫沉淀。使用 SimpleChIP® Human ESR1 Promoter Primers #9673、SimpleChIP® Human pS2 Promoter Primers #9702 和 SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486 并通过实时 PCR 对富集的 DNA 进行定量。将每份样品中免疫沉淀的 DNA 的量表现为相对于所输入染色质总量(等于 1)的信号。
To Purchase # 48585T
目录# 规格 价格 库存
48585T
1 个试剂盒(4 x 20 微升)

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Brg1 (D1Q7F) Rabbit mAb 49360 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
  • C&R
H M R Mk 220 兔 IgG
BRD9 (E9R2I) Rabbit mAb 58906 20 µl
  • WB
  • IP
H Mk 80 兔 IgG
GLTSCR1 (E6I3A) Rabbit mAb 45441 20 µl
  • WB
  • IP
  • ChIP
  • C&R
H Mk 205 兔 IgG
GLTSCR1L (E9K6F) Rabbit mAb 92805 20 µl
  • WB
  • IP
H M R Mk 140 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
Rab 山羊 

产品说明

Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit 提供一种经济合算的方法来使用抗体检测非典型 BAF 复合体成员。该试剂盒包含的抗体足以使用每种一抗进行两次蛋白印迹实验。

特异性/灵敏度

Non-Canonical BAF Complex Antibody Sampler Kit 中的每种抗体都可检测其靶标蛋白的内源水平。

来源/纯化

使用与人 BRD9 蛋白的 Pro576、人 GLTSCR1 蛋白的 Pro1545 周围的残基相对应的合成肽、对人 Brg1 蛋白和人 GLTSCR1L 蛋白的氨基末端具有特异性的重组蛋白,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

ATP 依赖性染色质重构复合体在调控各种胞核的过程中(例如:基因表达、DNA 复制和修复的过程中)起着重要作用 (1,2)。SWI/SNF 染色质重构复合体由 10 个以上的亚基和一个单分子的 ATP 酶催化性亚基 BRM 或 BRG1(仅两者之一)组成。这两种亚基的活性可促进组蛋白-DNA 接触的瓦解,组蛋白-DNA 接触能够导致染色质内部关键调控元件的可接近性发生改变 (2-5)。含有 SWI/SNF 复合体的 BRM/BRG1 被转录因子如核受体、p53、RB 和 BRCA1 召集至靶启动子以调控基因激活、细胞生长、细胞周期和分化过程 (1,6-9)。
GLTSCR1 及其旁系同源物 GLTSCR1L 与 BRD9 一起被确定为非典型 BAF (ncBAF) 或 GBAF 复合体的独特亚基。该复合体包含 GLTSCR1 或 GLTSCR1L,而不是 ARID 亚基,同时也不包含 BAF45、BAF47 和 BAF57 亚基。GBAF 对应于不同于 PBAF 和典型 BAF 复合体的区域,并且被证实是 BAF 诱导癌症(如滑膜肉瘤和横纹肌样瘤)的一个合成致命靶标 (10-12)。

有限使用

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