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36064
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合
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MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit #36064

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MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 1
对 HDLM-2 细胞提取物 TAP2 蛋白进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 TAP2 (E8G5I) Rabbit mAb。使用 TAP2 (E8G5I) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹法分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 2
使用 IFNGR1 (E444) Antibody（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对不同细胞系的提取物进行蛋白印迹分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 3
使用 Calreticulin (D3E6) XP® Rabbit mAb 对 SH-SY5Y 和 KNRK 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 4
使用 β2-microglobulin (D8P1H) Rabbit mAb（上）和 β-Actin (DA8) Rabbit mAb #8457（下），对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹法分析。由于 β2-microglobulin 基因座上的基因缺失，DLD-1 和 Daudi 细胞系对 β2-microglobulin 呈阴性。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 5
使用 PSMB8/LMP7 (D1K7X) Rabbit mAb（上图）和 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174（下图），对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。（T2 细胞系包括一个纯合性缺失的 PSMB8/LMP7 (13)）。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 6
使用 TAP2 (E8G5I) Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对未经处理 (-) 或经 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #80385（100 ng/ml，48 小时；+）处理的 HeLa 细胞与 SW620 细胞的提取物进行蛋白质印迹法分析。如预期那样，TAP2 蛋白表达受 IFN-γ 处理诱导。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 7
使用 Calnexin (C5C9) Rabbit mAb 对 PANC1、HepG2 和 A204 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 8
使用泛素 (E4I2J) 兔单克隆抗体（上图）和 β-肌动蛋白 (D6A8) 兔单克隆抗体 #8457（下图）对未经 (-) 或已经 MG-132 #2194（10μM，90 分钟；+）处理的 HeLa、NIH/3T3 和 H-4-II-E 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 9
使用 TAP1 (E4T4F) Rabbit mAb（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对未经处理 (-) 或经过 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #80385 处理（100 ng/ml，48 小时；+）的 HeLa 和 SW620 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 10
一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 11
使用 HLA-G (E8N9C) XP® Rabbit mAb（上图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对 JEG-3 和 LNCaP 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 12
使用 IFNGR1 (E444) Antibody（上图）、Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278（中间）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对转染空载 (-) 或转染带 Myc/DDK 标签的人全长 IFNGR1 蛋白 (hIFNGR1-Myc/DDK; +) 表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 13
使用 Calreticulin (D3E6) XP® Rabbit mAb（绿色）和 β-Actin (13E5) Rabbit mAb (Alexa Fluor®555 Conjugate) #8046（红色）对 NIH/3T3 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 14
使用 β2-microglobulin (D8P1H) Rabbit mAb，对石蜡包埋的 HeLa（左）或 DLD-1（右）细胞颗粒进行免疫组织化学分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 15
使用 PSMB8/LMP7 (D1K7X) Rabbit mAb（上图）和 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174（下图），对未经处理 (-) 或已经 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #8901（100 ng/ml，72 小时；+）处理的 HeLa 和 SW620 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 16
使用 TAP2 (E8G5I) Rabbit mAb（上图）、DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb #14793（中图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对转染空载 (-) 或转染带 Myc/DDK 标签的全长人 TAP1 (hTAP1-Myc/DDK; +) 和带 Myc/DDK 标签的全长人 TAP2 (hTAP2-Myc/DDK; +) 表达载体的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹法分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 17
在对照肽（左）或抗原特异性肽（右）存在的情况下，使用 Calnexin (C5C9) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌组织进行免疫组织化学分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 18
使用泛素 (E4I2J) 兔单克隆抗体 对各种重组连接特异性聚泛素链、重组游离单泛素（单泛素）和重组线性聚泛素（线性泛素）（各 300 ng）进行蛋白质印迹分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 19
使用 TAP1 (E4T4F) Rabbit mAb（上图）、DYKDDDDK Tag Antibody #2368（中图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对转染空载 (-) 或转染带 Myc/DDK 标签的全长人 TAP1 蛋白 (hTAP1-Myc/DDK; +) 和带 Myc/DDK 标签的全长人 TAP2 蛋白 (hTAP2-Myc/DDK; +) 表达载体的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 20
使用 HLA-G (E8N9C) XP® Rabbit mAb（上图）、Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278（中图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对转染空载 (-) 或转染表达带有 MycDDK 标签的人全长 HLA-G 蛋白 (hHLA-G-MycDDK; +) 的表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹法分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 21
对 NCI-H226 细胞提取物 IFNGR1 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10 % input，泳道 2 为 Normal Rabbit IgG #2729，泳道 3 为 IFNGR1 (E444) Antibody。使用 IFNGR1 (E444) Antibody 进行蛋白印迹分析。使用 Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb #3678 检测。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 22
以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照，使用 Calreticulin (D3E6) XP® Rabbit mAb（实线）对 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 23
在对照肽（左）或抗原特异性肽（右）存在的情况下，使用 β2-microglobulin (D8P1H) Rabbit mAb，对石蜡包埋的结肠癌进行免疫组织化学分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 24
使用 PSMB8/LMP7 (D1K7X) Rabbit mAb（上图）和 DYKDDDDK Tag Antibody #2368（下图），对转染空载 (-) 或转染带有 Myc/DDK 标签的全长人 PSMB5 (hPSMB5-Myc/DDK; +) 或带有 Myc/DDK 标签的全长人 PSMB8 (hPSMB8-Myc/DDK; +) 表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 25
使用 Calnexin (C5C9) Rabbit mAb（绿色）对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝已用 DY-554 phalloidin（红色）标记。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 26
对经过 Human Interferon-γ (hIFN-γ) #80385处理（100 ng/ml，48 小时）的 HeLa 细胞提取物 TAP1 蛋白进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input，泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，泳道 3 为 TAP1 (E4T4F) Rabbit mAb。使用 TAP1 (E4T4F) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody #7074 用作二抗。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 27
使用 HLA-G (E8N9C) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 JEG-3 细胞沉淀物（左图，阳性）或 LNCaP 细胞沉淀物（右图，阴性）进行免疫组织化学分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 28
使用 β2-microglobulin (D8P1H) Rabbit mAb，对石蜡包埋的人体皮肤进行免疫组织化学分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 29
以浓度匹配的Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（右图）作为对照，使用 HLA-G (E8N9C) XP® Rabbit mAb（左图）对石蜡包埋的人胎盘进行免疫组织化学分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 30
使用 β2-microglobulin (D8P1H) Rabbit mAb（绿色），对 PANC-1 细胞（阳性，左）和 DLD-1 细胞（阴性，右）进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 31
使用 HLA-G (E8N9C) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺腺癌细胞进行免疫组织化学分析。
MHC Class I Antigen Processing and Presentation Antibody Sampler Kit: Image 32
使用 β2-microglobulin (D8P1H) Rabbit mAb，对 DLD-1 细胞（蓝色）和 HeLa 细胞（绿色）进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #4414 作为二抗。
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To Purchase # 36064T
目录# 规格 价格 库存
36064T		 1 个试剂盒（9 x 20 微升）

定制制剂

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
 Rab 山羊 
Calreticulin (D3E6) XP® Rabbit mAb 12238 20 µl
  • WB
  • IF
  • F
 H M R 55 兔 IgG
Ubiquitin (E4I2J) Rabbit mAb 43124 20 µl
  • WB
 All 兔 IgG
HLA-G (E8N9C) XP® Rabbit mAb 79769 20 µl
  • WB
  • IHC
 H 30-40 兔 IgG
Calnexin (C5C9) Rabbit mAb 2679 20 µl
  • WB
  • IHC
  • IF
 H Mk 90 兔 IgG
PSMB8/LMP7 (D1K7X) Rabbit mAb 13635 20 µl
  • WB
 H M R 23, 28 兔 IgG
β2-microglobulin (D8P1H) Rabbit mAb 12851 20 µl
  • WB
  • IHC
  • IF
  • F
 H Mk 12 兔 IgG
IFNGR1 (E444) Antibody 10405 20 µl
  • WB
  • IP
 H 45-90 兔 
TAP2 (E8G5I) Rabbit mAb 25657 20 µl
  • WB
  • IP
 H 72 兔 IgG
TAP1 (E4T4F) Rabbit mAb 49671 20 µl
  • WB
  • IP
 H 68 兔 IgG

产品说明

MHC I 类抗原处理和呈递抗体小包装组合提供了一种经济的手段，用于检查与 MHC I 级受限抗原处理和呈递相关的关键蛋白。提供的抗体可检测总蛋白水平。该试剂盒包含的抗体足以使用每种一抗进行两次蛋白印迹实验。

特异性/灵敏度

MHC I 类抗原处理和呈递抗体小包装组合中的每种抗体均可检测其靶标蛋白的内源水平。Calreticulin (D3E6) XP® Rabbit mAb 可识别总钙网蛋白的内源水平。泛素 (E4I2J) 兔单克隆抗体可检测游离泛素和聚泛素化蛋白的内源水平。该抗体能检测游离泛素、线性聚泛素（M1 连接的）和含有 K6、K11、K27、K29、K33、K48 和 K63 连接的同型聚泛素链。HLA-G (E8N9C) XP® Rabbit mAb 可识别 HLA-G 总蛋白的内源水平。Calnexin (C5C9) Rabbit mAb 可检测总钙联蛋白的内源水平。TAP2 (E8G5I) Rabbit mAb 可识别 TAP2 总蛋白的内源水平。该抗体不会与 TAP1 蛋白发生交叉反应。PSMB8/LMP7 (D1K7X) Rabbit mAb 可识别内源水平的 PSMB8/LMP7 总蛋白。该抗体可识别 PSMB8/LMP7 的 28 kDa 前体和 23 kDa 成熟形式，但不会与 PSMB5 蛋白发生交叉反应。该抗体可识别 80-100 kDa 的未知来源蛋白。TAP1 (E4T4F) Rabbit mAb 可识别 TAP1 总蛋白的内源水平。该抗体不会与 TAP2 蛋白发生交叉反应。β2-microglobulin (D8P1H) Rabbit mAb 可识别 β2-microglobulin 总蛋白的内源水平。IFNGR1 (E444) Antibody 可检测 IFNGR1 内源水平的总蛋白。

来源/纯化

使用对人 TAP1 蛋白的羧基末端具有特异性的重组蛋白或与人钙网蛋白的氨基末端、人 PSMB8/LMP7 蛋白的羧基末端、人泛素蛋白的 Gly35、人 HLA-G 蛋白的 Leu102、人 β2-微球蛋白的 Val57、人 TAP2 蛋白的 Val485 或人钙连接蛋白的 Pro52 附近残基相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 IFNGR1 蛋白中 Glu444 周围的残基相对应的合成肽，对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。多克隆抗体通过蛋白 A 和肽亲和力色谱进行纯化。

背景

在大多数有核细胞类型的表面表达的 I 类 MHC /β2-微球蛋白二聚体的主要功能是通过将蛋白水解肽段从胞浆蛋白呈递给细胞毒性 CD8+T 细胞来调节适应性免疫应答。为了使 MHC I 类分子呈递自身和非自身肽，肽片段必须首先衍生自通过泛素-蛋白酶体系统降解的多泛素化蛋白。在炎性过程中，蛋白酶体的酶核心可以通过 IFNγ 信号转导形成，以包含亚基（例如 PSMB8/LMP7），这些亚基可增强抗原呈递细胞对抗原肽的呈递作用（1）。然后将通过泛素依赖性蛋白酶体降解而产生的细胞溶质肽片段通过肽转运蛋白 TAP1 和 TAP2 转运到 ER 内腔中，其中多种伴侣蛋白（如钙粘蛋白和钙网蛋白）的活性有助于将其装载到 I 类 MHC/β2 -微球蛋白二聚体，以便转运至高尔基体，最终转运至细胞表面（2-6）。在实体和液体肿瘤中都观察到了 I 类抗原呈递机制的多种成分表达的缺陷，这是一种逃避肿瘤免疫的机制（7）。

限制使用

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