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20258
LAPosome Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

LAPosome Antibody Sampler Kit #20258

引用 (0)
LAPosome Antibody Sampler Kit: Image 1
使用 UVRAG (D2Q1Z) Rabbit mAb(上图)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。HCT 116细胞被证实含有可导致 UVRAG 内源性表达水平显著降低的单等位基因移码突变 (11)。
LAPosome Antibody Sampler Kit: Image 2
使用 PIK3R4 Antibody 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
LAPosome Antibody Sampler Kit: Image 3
使用 Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
LAPosome Antibody Sampler Kit: Image 4
使用 PI3 Kinase Class III (D9A5) Rabbit mAb 对小鼠脑和 C6 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
LAPosome Antibody Sampler Kit: Image 5
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
LAPosome Antibody Sampler Kit: Image 6
使用 Rubicon (D9F7) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
LAPosome Antibody Sampler Kit: Image 7
使用 UVRAG (D2Q1Z) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或经构建表达的人 UVRAG (hUVRAG; +) 转染的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
LAPosome Antibody Sampler Kit: Image 8
使用 Beclin-1 (D40C5) XP® Rabbit mAb #3495(上)或 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125(下)对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® Beclin-1 siRNA I #6222 (+) 或 SignalSilence® Beclin-1 siRNA II (+) 转染的 Hela 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。Beclin-1 (D40C5) XP® Rabbit mAb 可确认 Beclin-1 的表达沉默,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用作观察上样量和 Beclin-1 siRNA 的特异性。
LAPosome Antibody Sampler Kit: Image 9
使用 Rubicon (D9F7) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或经 人 Rubicon (hRubicon, +) 转染的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。Rubicon 构建体由 University of California, Berkeley, CA 的 Qing Zhong 博士惠赠。
LAPosome Antibody Sampler Kit: Image 10
使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 UVRAG (D2Q1Z) Rabbit mAb(泳道 3)对 PANC-1 细胞提取物中的 UVRAG 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 UVRAG (D2Q1Z) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
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20258T
1 个试剂盒(6 x 20 微升)

产品说明

LAPosome Antibody Sampler Kit 提供一种经济合算的方法来分析 LAPosome 复合体中的蛋白。该试剂盒包含的抗体足以使用每种一抗进行两次蛋白印迹实验。

特异性/敏感性

LAPosome Antibody Sampler Kit 中的每种抗体均可检测其靶蛋白的内源水平。Rubicon (D9F7) Rabbit mAb 可检测在 55 kDa 处的来源不明的条带。

来源/纯化

使用与人 Beclin-1 中 Thr72、人 Rubicon 中 Leu210、III 类 PI3 激酶中 Lys630 以及人 UVRAG 中 Gly502 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 PIK3R4 蛋白中 Gly825 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白质 A 和肽亲和色谱对抗体进行纯化。

背景

LC3 相关吞噬作用 (LAP) 是自噬作用与吞噬作用之间的交叉过程,其中吞噬泡对细胞外颗粒的摄取利用自噬机制的组分并且靶向溶酶体进行降解(1-3 中已论述)。感染因子通过病原体受体(如 Toll 样受体 (TLR))的参与激活 LAP,这在免疫调节和宿主防御中非常重要。虽然自噬体和 LAP 吞噬泡都表达脂质化 LC3,但自噬体是双膜囊泡,而 LAP 中的吞噬泡是单膜囊泡。虽然 LAP 具有典型自噬的一些组分,但还是存在一些明显的差异。自噬和 LAP 都需要 III 类 PI3 激酶(PI3KC3;也称为 VPS34)以及调节蛋白 PIK3R4(也称为 VPS15)和 Beclin-1。然而,典型自噬需要的是该复合体中的 Atg14 和 Ambra-1,而 LAP 需要的是 Rubicon 和 UVRAG。该复合体称为 LAPosome,可激活 PI3KC3 并触发烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 (NADPH) 氧化酶 2 (NOX2),从而生成活性氧类 (ROS) 以使吞噬泡成熟。Rubicon 在该复合体中的表达已成为 LAP 的一个决定性特征。
  1. Heckmann, B.L. and Green, D.R. (2019) J Cell Sci 132, jcs222984. doi: 10.1242/jcs.222984.
  2. Martinez, J. (2018) Curr Opin Immunol 55, 54-61.
  3. Upadhyay, S. and Philips, J.A. (2019) Curr Opin Immunol 60, 81-90.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

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