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68355
Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit #68355

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Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 1

使用 MX1 (D3W7I) Rabbit mAb 在 Leica® Bond™ Rx 上对石蜡包埋的人乳腺导管癌细胞进行免疫组织化学分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 2

使用 OAS1 (D1W3A) Rabbit mAb (上图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457 (下图),对未经处理 (-) 或已经 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927 (10 ng/ml,16 小时;+)处理的 HeLa、NCI-H460 和 HT-29 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 3

使用 RNase L (D4B4J) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 4

使用 IFITM3 (D8E8G) XP® Rabbit mAb(上)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下),对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 5

使用 IFITM3 (D8E8G) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人结肠癌进行免疫组织化学分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 6

使用 BST2 (D5V5Z) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 7

使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 (泳道 2) 或 TRIM5α (D6Z8L) Rabbit mAb (泳道 3) 对 RL-7 细胞提取物中的 TRIM5α 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 TRIM5α (D6Z8L) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 8

使用 Phopsho-eIF2α (Ser51) (D9G8) XP® Rabbit mAb 对未经处理的(左)或经 λ 磷酸酶处理(右)的石蜡包埋人结肠癌组织进行免疫组织化学分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 9

使用 Phospho-SAMHD1 (Thr592) (D7O2M) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线),对未经处理(绿色)或已经 TPA(80 nM,16 小时;红色)处理的 THP-1 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 10

使用 IFITM1 Antibody 对 K-562 细胞、CD4+ T 细胞和 CD8 + T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 11

一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 12

使用 MX1 (D3W7I) Rabbit mAb,对石蜡包埋的 T84 细胞沉淀物(左,阳性)和 HCT116 细胞沉淀物(右,阴性)进行免疫组织化学分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 13

使用 OAS1 (D1W3A) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或转染表达人 OAS1 同工型 p41 (hOAS1 p41; +) 表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 14

使用 RNase L (D4B4J) Rabbit mAb 对未转染 (-) 或转染带有 Myc/DDK 标签的全长人 RNase L (hRNase L-Myc/DDK; +) 表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 15

使用 IFITM3 (D8E8G) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的正常人淋巴节点进行免疫组织化学分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 16

使用 TRIM5α (D6Z8L) Rabbit mAb 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 17

使用 Phospho-eIF2α (Ser51) (D9G8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肺癌组织进行免疫组织化学分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 18

使用 Phospho-SAMHD1 (Thr592) (D7O2M) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线),对 Jurkat 细胞(蓝色)和 THP-1 细胞(绿色)进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 19

使用 IFITM1 Antibody 对转染空载 (-) 或转染全长人 IFITM1 表达载体(hIFITM1; +) 的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 20

使用 MX1 (D3W7I) Rabbit mAb,对石蜡包埋的 HeLa 细胞沉淀物(未处理(左)或用 Human Interferon-alpha1 (hIFN-alpha1) #8927 处理(右))进行免疫组织化学分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 21

使用 IFITM3 (D8E8G) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的 HeLa(左)和 RPMI 8226(右)细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 22

使用 TRIM5α (D6Z8L) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或转染带有 Myc/DDK 标签的全长人 TRIM5α (hTRIM5α-Myc/DDK) 表达载体的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 23

使用 Phospho-eIF2α (Ser51) (D9G8) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人淋巴瘤组织进行免疫组织化学分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 24

对 THP-1 细胞提取物磷酸-SAMHD1 (Thr592) 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 Phospho-SAMDHD1 (Thr592) (D7O2M) Rabbit mAb。使用 Phospho-SAMDHD1 (Thr592) (D7O2M) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 25

使用 IFITM1 Antibody(上)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下),对未经处理(-) 或经 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927 处理(10 ng/ml,16 小时;+)的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 26

使用 MX1 (D3W7I) Rabbit mAb,对石蜡包埋的人非小细胞肺癌进行免疫组织化学分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 27

使用 IFITM3 (D8E8G) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的正常人脾脏进行免疫组织化学分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 28

使用 Phospho-eIF2α (Ser51) (D9G8) XP® Rabbit mAb (上)或 eIF2α Antibody #9722(下)对未经处理的或经 Thapsigargin 处理的 C2C12 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 29

使用 Phospho-SAMHD1 (Thr592) (D7O2M)(上图)或 SAMHD1 Antibody #12361(下图),对未经处理 (-) 或已经牛小肠磷酸酶 (CIP) 和 λ 磷酸酶 (+) 处理的 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 30

在对照肽(左)或抗原特异性肽(右)存在下,使用 MX1 (D3W7I) Rabbit mAb,对石蜡包埋的人子宫内膜样腺癌进行免疫组织化学分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 31

使用 Phospho-SAMHD1 (Thr592) (D7O2M) Rabbit mAb(上图)、SAMHD1 Antibody #12361(中间)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图),对未经处理 (-) 或已经 TPA (12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯) #4174(80 nM,16 小时;+)处理的 Jurkat 和 THP-1 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 32

使用 MX1 (D3W7I) Rabbit mAb,对石蜡包埋的人正常脾进行免疫组织化学分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 33

使用 IFITM3 (D8E8G) XP® Rabbit mAb,对未转染 (-) 或转染带有 Myc 标签的全长人 IFITM3 表达载体 (hIFITM3-Myc; +) 的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 34

对使用 Human Interferon-α1 #8927 (10 ng/ml, 16 hr) 处理的 HeLAN 细胞提取物 MX1 进行免疫沉淀法分析。泳道 1 为 10% 输入,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,而泳道 3 为 MX1 (D3W7I) Rabbit mAb。使用 MX1 (D3W7I) Rabbit mAb 执行蛋白质印迹分析。

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit: 图像 35

使用 MX1 (D3W7I) Rabbit mAb(上)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下)对未经 (-) 或经 Human Interferon-α1 (hIFN-α1) #8927 (10 ng/ml, 16 hr; +) 处理的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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68355T
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产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
MX1 (D3W7I) Rabbit mAb 37849 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
H 76 兔 IgG
OAS1 (D1W3A) Rabbit mAb 14498 20 µl
  • WB
  • IP
H 40, 44 兔 IgG
RNase L (D4B4J) Rabbit mAb 27281 20 µl
  • WB
H M 80 兔 IgG
IFITM3 (D8E8G) XP® Rabbit mAb 59212 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
H 15 兔 IgG
BST2 (D5V5Z) Rabbit mAb 19277 20 µl
  • WB
H 28-40 兔 IgG
TRIM5α (D6Z8L) Rabbit mAb 14326 20 µl
  • WB
  • IP
H Mk 56 兔 IgG
Phospho-eIF2α (Ser51) (D9G8) XP® Rabbit mAb 3398 20 µl
  • WB
  • IP
  • IHC
H M R Mk Dm 38 兔 IgG
Phospho-SAMHD1 (Thr592) (D7O2M) Rabbit mAb 89930 20 µl
  • WB
  • IP
  • F
H M R 72 兔 IgG
IFITM1 Antibody 13126 20 µl
  • WB
H 14 兔 
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
山羊 

产品说明

Host Cell 病毒限制因子 Antibody Sampler Kit 提供了一种经济的方法,可以使用磷酸化特异性和总蛋白抗体检测各种宿主细胞病毒限制因子的表达。该试剂盒包含的抗体足以使用每种一抗进行两次蛋白印迹实验。

特异性/敏感性

Host Cell Viral Restriction Factor Antibody Sampler Kit 中的每种抗体均可检测其靶标蛋白的内源水平。MX1 (D3W7I) Rabbit mAb 可检测 MX1 总蛋白的内源水平。OAS1 (D1W3A) Rabbit mAb 可识别内源水平的 OAS1 总蛋白。该抗体会与某些细胞系中 100 kDa 的未知蛋白发生交叉反应。RNase L (D4B4J) Rabbit mAb 可识别内源水平的 RNase L 总蛋白。IFITM3 (D8E8G) XP® Rabbit mAb 可识别 IFITM3 总蛋白的内源水平。该抗体不与 IFITM1 或 IFITM2 蛋白发生交叉反应。BST2 (D5V5Z) Rabbit mAb 可识别 BST2 总蛋白的内源水平。TRIM5α (D6Z8L) Rabbit mAb 可识别内源水平的 TRIM5α 总蛋白。该抗体不会与人 TRIM5β 交叉反应,而且预计不会与其他人 TRIM5 同工型交叉反应。Phospho-eIF2α (Ser51) (D9G8) XP® Rabbit mAb 仅在 Ser51 位点被磷酸化时检测 eIF2α 内源性水平。仅在 SAMHD1 蛋白在 Thr592 位点被磷酸化时,Phospho-SAMHD1 (Thr592) (D7O2M) Rabbit mAb 才能识别出内源水平的 SAMHD1 蛋白。IFITM1 Antibody 可识别 IFITM1 总蛋白的内源水平。该抗体不与 IFITM2 或 IFITM3 蛋白发生交叉反应。

来源/纯化

使用与人 MX1 蛋白 Leu292、人 OAS1 蛋白 Asp90、人 Rnase L 蛋白 Pro717、人 IFITM3 蛋白 Val5、人 BST2 蛋白 Val134、人 TRIM5α 蛋白 Pro395、人 eIF2α 蛋白 Ser51 以及人 SAMHD1 蛋白 Thr592 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 IFITM1 蛋白 Pro20 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。

背景

病毒限制因子是宿主细胞产生的蛋白质,在某种程度上其功能是对病毒生命周期的各个阶段产生负面影响,以防止繁殖。MX1(黏液病毒耐受蛋白 1/MxA)是一种干扰素诱导抗病毒蛋白,可通过阻滞病毒基因组转录从而抵抗 RNA 病毒 (1,2)。

2’-5’-寡腺苷酸合成酶 1 (OAS1) 是一种 1 型干扰素诱导的抗病毒蛋白,它在细胞先天性免疫应答中起到关键作用 (3)。OAS1 酶产生第二个信使,即 2'-5'-连接的寡腺苷酸,它与 RNase L 结合,然后降解病毒和细胞 RNA (4)。研究表明,OAS1 系统可抑制蛋白质合成并诱导病毒感染细胞凋亡,从而限制病毒感染 (5)。

干扰素诱导的跨膜蛋白 (IFITM) 家庭成员 IFITM1 和 IFITM3 似乎通过阻止病毒膜和宿主膜融合而起病毒限制因子的作用 (6,7)。

BST2 (CD317, Tetherin, HM1.24) 是一种 II 型跨膜糖蛋白,可作为先天免疫通过细胞表面系链病毒体防御传播包膜病毒的主要介体,阻止病毒释放 (8)。

通过与进入的病毒衣壳相互作用并促进病毒成熟前解聚,TRIM5α 可阻断病毒感染 (9)。

PKR 诱导的真核起始因子 2 (eIF2) Ser51 位点的 α 亚基磷酸化是一种充分证明的机制,可以降低病毒感染时的蛋白质合成 (10)。

含 SAM 结构域和 HD 结构域的蛋白 1 (SAMHD1) 通过水解胞内脱氧核苷三磷酸 (dNTP) 来防止自身免疫和 HIV 感染,从而限制自身核酸引起的不正常免疫激活以及抑制 HIV 基因组的反转录 (11)。周期素 A2/CDK1 对 SAMHD1 在 Thr592 处的磷酸化被发现是控制 SAMHD1 活性的一种调节机制。SAMHD1 在增殖细胞中被磷酸化,这会抑制其阻断 HIV 感染的能力 (12)。

  1. Staeheli, P. et al. (1986) Cell 44, 147-58.
  2. Kochs, G. and Haller, O. (1999) Proc Natl Acad Sci U S A 96, 2082-6.
  3. Schoggins, J.W. et al. (2011) Nature 472, 481-5.
  4. Dong, B. and Silverman, R.H. (1997) J Biol Chem 272, 22236-42.
  5. Castelli, J.C. et al. (1998) Cell Death Differ 5, 313-20.
  6. Brass, A.L. et al. (2009) Cell 139, 1243-54.
  7. Feeley, E.M. et al. (2011) PLoS Pathog 7, e1002337.
  8. Le Tortorec, A. et al. (2011) Viruses 3, 520-40.
  9. Stremlau, M. et al. (2006) Proc Natl Acad Sci U S A 103, 5514-9.
  10. Zamanian-Daryoush, M. et al. (2000) Mol Cell Biol 20, 1278-90.
  11. Powell, R.D. et al. (2011) J Biol Chem 286, 43596-600.
  12. Cribier, A. et al. (2013) Cell Rep 3, 1036-43.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

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