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74220
Exosomal Marker Antibody Sampler Kit
一抗
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Exosomal Marker Antibody Sampler Kit #74220

引用 (1)
Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 1

使用 Alix (3A9) Mouse mAb 对不同细胞类型的细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 2

使用 Annexin V Antibody 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 3

在对照肽（左图）或抗原特异性肽（右图）存在的情况下，使用 CD54/ICAM-1 Antibody 对石蜡包埋的人淋巴结进行免疫组织化学分析。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 4

使用 CD9 (D8O1A) Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 5

使用 GM130 (D6B1) XP® Rabbit mAb（绿色）对未经处理（左图）或经 Brefeldin A #9972（200 μM、30 分钟；右图）处理的 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 6

使用 EpCAM (D1B3) Rabbit mAb（上图）或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对 MCF7（EpCAM 阳性）、HT-29（EpCAM 阳性）和 HeLa（EpCAM 阴性）细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 7

使用 HSP70 (D69) Antibody 对 HeLa、NIH/3T3 和 C6 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 8

使用 Flotillin-1 (D2V7J) XP® Rabbit mAb（绿色）对 BT-20 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 9

一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 10

使用 CD54/ICAM-1 Antibody 对石蜡包埋的 Raji 细胞进行免疫组织化学分析。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 11

使用 CD9 (D8O1A) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或转染带 Myc/DDK 标签的全长人 CD9 蛋白 (hCD9-Myc/DDK; +) 表达载体的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 12

使用 GM130 (D6B1) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 13

在对照肽（左图）或抗原特异性肽（右图）存在的情况下，使用 Flotillin-1 (D2V7J) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人肝细胞性肝癌进行免疫组织化学分析。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 14

使用 CD54/ICAM-1 Antibody 对未经处理 (-) 或经 TNF-α 处理 (+) 的 Ramos、A549 和 Raji 细胞进行蛋白质印迹分析。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 15

使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 2）或 GM130 (D6B1) XP® Rabbit mAb（泳道 3）对 ZR-75-1 细胞提取物的 GM130 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 GM130 (D6B1) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 16

对 BT-20 细胞提取物的 flotillin-1 蛋白进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% input，泳道 2为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900，而泳道 3 为 Flotillin-1 (D2V7J) XP® Rabbit mAb。使用 Flotillin-1 (D2V7J) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit: Image 17

使用 Flotillin-1 (D2V7J) XP® Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

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74220T		 1 个试剂盒(8 x 20 µl)

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产品说明

Exosomal Marker Antibody Sampler Kit 为您提供一张高性价比的手段来评估外来体标记物的存在情况。该试剂盒包含足量的一抗，可对每个靶标进行两次蛋白质印迹实验。

特异性/敏感性

试剂盒中提供的所有抗体均可检测各自靶标蛋白的内源水平。此外，预测 Annexin V Antibody 不会与其他膜联蛋白家族成员发生交叉反应，而 CD54/ICAM-1 Antibody 不会与其他 IgSF 黏附分子发生交叉反应。GM130 antibody 可能与 30 kDa 的未知蛋白发生交叉反应。

来源/纯化

使用全长重组人 Alix 蛋白（一种与人 CD9 蛋白的 Val178 周围残基、人 GM130 蛋白的 Thr195 周围残基、人 EpCAM 蛋白的氨基末端附近残基、以及人 flotillin-1 蛋白的 Ile368 周围残基相对应的合成肽）对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人膜联蛋白 V 的氨基末端附近残基、人 CD54 (ICAM-1) 蛋白的残基、以及人 HSP70 的 Asp69 周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。

背景

外来体为小膜结合囊泡，近年来已经成为细胞间通讯的重要分子。外来体在正常和病理生理条件下均可产生，而癌细胞已被证明可分泌比正常细胞更多的外来体（在 1 中有综述）。该试剂盒中包含的外来标准品为 Alix、Annexin V、ICAM-1、CD9、GM130、EpCAM、flotillin 和 HSP70。

Alix 是一种胞质支架蛋白，可通过与 ESCRT（转运所需的内体分选复合体）蛋白、endophilins 和 CIN85（85 kDa 的 Cbl 相互作用蛋白）相互作用来调节内吞膜转运、细胞黏附等多个细胞过程 (2, 3)。

膜联蛋白 V 是一种以钙依赖的方式结合磷脂的 ~30 kDa 蛋白 (4)。推测所有膜联蛋白均含有一个 PKC 结合位点，但只有膜联蛋白 V 被确认为是该通路的抑制剂 (5)。

细胞内细胞黏附分子-1（CD54 或 ICAM-1）是一种属于黏附分子免疫球蛋白超家族 (IgSF) 的细胞表面糖蛋白。CD54 在多种细胞类型中低水平表达，且受细胞因子 (TNF-alpha, interleukin-1) 和细菌脂多糖的诱导(6)。内皮细胞顶端定位（或上皮细胞基底外侧定位）是通过内皮（或上皮）屏障进行白细胞运输的前提条件 (6)。

CD9 抗原属于细胞表面糖蛋白的跨膜四蛋白家族。跨膜四蛋白在专门的富含跨膜四蛋白微区 (TEMs) 与多种细胞表面蛋白和细胞内信号转导分子相互作用，在该微区跨膜四蛋白介导黏附、运动、膜组织和信号转导等一系列过程 (7)。其他研究已确认 CD9 为外来体的丰富组分，并可能在这些分泌膜囊泡与受体细胞的融合中发挥作用 (8)。

GM130 对介导高尔基体组合期间条带形成的膜融合事件必不可少 (9)。高尔基体在修改、组织和转运蛋白以及靶向细胞其他部分的膜（例如质膜、溶酶体和内体）中发挥作用。该调节后的转运对蛋白的正确定位、分泌和信号转导非常重要（在 10 中有综述）。

上皮细胞黏附和激活分子 (EpCAM/CD326) 是一种跨膜糖蛋白，可介导大多数上皮细胞基底外侧表面的钙依赖嗜血性黏附 (11)。EpCAM 作为最早被发现的肿瘤相关抗原之一，一直是上皮和肿瘤组织的标记物。研究表明，EpCAM 在癌细胞中高表达，并可用作检测肿瘤衍生接触物的生物标记物（在 1、12、13 中有综述）。

Flotillins 属于脂筏相关的整合膜蛋白家族，该家族广泛表达并定位于细胞质膜的脂筏中，并在该细胞质膜中为信号转导提供支持并调节脂筏运动和定位 (14-17)。Flotillin-1 除了与质膜的脂筏共定位外，也被发现存在于内吞和自噬体通路的隔室（例如再循环/晚期内体、高尔基复合体以及胞核）中 (18, 19)。

HSP70 是一种分子伴侣，可在正常条件下进行组成型表达以维持蛋白稳态并在受到环境应激时被诱发 (20)。HSP70 可以与未折叠蛋白相互作用以防止不可逆聚合，并以 ATP 和共伴侣分子依赖的形式催化它们底物的再折叠 (21)。在从肿瘤外来体排出热休克蛋白时会引发免疫应答（在 1 中有综述）。

  1. Raposo, G. and Stoorvogel, W. (2013) J Cell Biol 200, 373-83.
  2. Katoh, K. et al. (2003) J. Biol. Chem. 278, 39104-39113.
  3. Sadoul, R. (2006) Biol. Cell 98, 69-77.
  4. Huber, R. et al. (1990) EMBO J 9, 3867-74.
  5. Cardó-Vila, M. et al. (2003) Mol Cell 11, 1151-62.
  6. Hopkins, A.M. et al. (2004) Adv Drug Deliv Rev 56, 763-78.
  7. Hemler, M.E. (2005) Nat Rev Mol Cell Biol 6, 801-11.
  8. Théry, C. et al. (1999) J Cell Biol 147, 599-610.
  9. Puthenveedu, M.A. et al. (2006) Nat Cell Biol 8, 238-48.
  10. Barr, F.A. and Short, B. (2003) Curr Opin Cell Biol 15, 405-13.
  11. Went, P.T. et al. (2004) Hum Pathol 35, 122-8.
  12. Baeuerle, P.A. and Gires, O. (2007) Br J Cancer 96, 417-23.
  13. Armstrong, A. and Eck, S.L. (2003) Cancer Biol Ther 2, 320-6.
  14. Langhorst, M.F. et al. (2005) Cell Mol Life Sci 62, 2228-40.
  15. Stuermer, C.A. and Plattner, H. (2005) Biochem Soc Symp , 109-18.
  16. Fernow, I. et al. (2007) Eur J Cell Biol 86, 345-52.
  17. Neumann-Giesen, C. et al. (2007) J Cell Sci 120, 395-406.
  18. Liu, J. et al. (2005) J Biol Chem 280, 16125-34.
  19. Santamaría, A. et al. (2005) Mol Cell Biol 25, 1900-11.
  20. Nollen, E.A. and Morimoto, R.I. (2002) J. Cell Sci. 115, 2809-2816.
  21. Young, J.C. et al. (2003) Trends Biochem. Sci. 28, 541-547.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

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