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9653
Double Strand Breaks (DSB) Repair Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合
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Double Strand Breaks (DSB) Repair Antibody Sampler Kit #9653

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使用 Phospho-ATM (Ser1981) (D6H9) Rabbit mAb（上）或 ATM (D2E2) Rabbit mAb #2873（下）对未经处理的或经紫外线处理（100 mJ，4 小时恢复）的 293 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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使用 ATM (D2E2) Rabbit mAb 对 HeLa 、NCCIT 和 PYS2 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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使用 Phospho-BRCA1 (Ser1524) Antibody（上）和 BRCA1 Antibody #9010（下）对未经处理的或经紫外线处理（50 mJ/cm2，30 分钟）的 HeLa 细胞和 HT-1376 细胞进行蛋白质印迹分析。

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使用 DNA-PK Antibody 对 M059K（DNA-PK 野生型）和 M059J（DNA-PK 缺损）细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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使用 Ku80 (C48E7) Rabbit mAb（绿色）对 HeLa 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白丝用 Alexa Fluor® 555 phalloidin（红色）标记。

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使用 Mre11 (31H4) Rabbit mAb 对冷冻的 SKOV-3 异种移植物进行免疫组织化学分析。

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使用 Phospho-p95/NBS1 (Ser343) Antibody 对经 UV 或经羟基脲 (HU) 处理所示时间的 Mv1Lu 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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使用 RAD50 抗体对 Jurkat 细胞和 K562 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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使用 XLF Antibody 对不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。

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一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。

Double Strand Breaks (DSB) Repair Antibody Sampler Kit: Image 11

使用 Ku80 (C48E7) Rabbit mAb 对冷冻的 SKOV-3 异种移植物进行免疫组织化学分析。

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在对照肽（左）或 Mre11 Blocking Peptide #1035（右）存在的情况下，使用 Mre11 (31H4) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人类乳腺癌进行免疫组织化学分析。

Double Strand Breaks (DSB) Repair Antibody Sampler Kit: Image 13

使用 Ku80 (C48E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人胶质母细胞瘤进行免疫组织化学分析。

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使用 Mre11 (31H4) Rabbit mAb 对石蜡包埋的肺癌进行免疫组织化学分析。

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使用 Ku80 (C48E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人类结肠癌进行免疫组织化学分析。

Double Strand Breaks (DSB) Repair Antibody Sampler Kit: Image 16

使用 Mre11 Rabbit (31H4) mAb 对 HeLa 和 K562 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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使用 Ku80 (C48E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人黑色素瘤进行免疫组织化学分析。

Double Strand Breaks (DSB) Repair Antibody Sampler Kit: Image 18

使用 Ku80 (C48E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人 GIST 进行免疫组织化学分析。

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使用 Ku80 (C48E7) Rabbit mAb 对 HeLa 、A549 和 COS 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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产品说明

Double Strand Breaks (DSB) Repair Antibody Sampler Kit 提供了高性价比的方式来研究细胞内双链 DNA 断裂修复。该试剂盒含有一抗和二抗，每种抗体可进行两次蛋白质印迹实验。

特异性/敏感性

Double Strand Breaks (DSB) Repair Antibody Sampler Kit 中的每种抗体检测其相应蛋白质的内源水平并且不与其他家族成员交叉反应。激活状态抗体仅在所示位点处修饰时检测其靶蛋白。

来源/纯化

使用与人 Mre11A 的 Lys496 周围的残基和人类 Ku80 的羧基末端相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人 ATM 的 Ser1981 的残基相对应的合成磷酸肽对动物进行免疫接种来产生激活状单克隆抗体。使用重组人 ATM 对动物进行免疫接种来产生 ATM (D2E2) Rabbit mAb 。使用与人 DNA-PKc 的羧基末端、人 Rad50 的氨基末端和人 XLF 的羧基末端相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用与人 BRCA1 的 Ser1524 和人p95/NBS1 的 Ser343 周围的残基相对应的合成磷酸肽对动物进行免疫接种来产生激活状态多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。

背景

可以通过相关的非同源末端连接 (NHEJ) 和同源重组 (HR) 机制，修复哺乳动物细胞中的双链 DNA 断口 (DSB)。由 DNA 结合亚基 Ku70 和 Ku86 和 DNA-PKc 催化性亚基组成的 DNA 依赖性蛋白激酶介导 NHEJ 修复。Ku 异二聚体结合游离的 DNA 末端并募集 DNA-PKc 至断口 (1)。DNA-PKc 发送 DNA 损伤区域的信号，并且募集额外的蛋白质，如加工受损序列并使其做好准备的 Artemis 核酸外切和内切酶 (2,3)。在替换 DNA 合成后，由 DNA 连接酶 IV 和 XRCC4 组成的连接酶复合体接合修复的末端。XRCC4 样因子 (XLF) 是必需的连接酶相关修复因子，其在 NHEJ 期间促进缺口填补 (4)。同源重组利用对齐的同源序列作为修复模板。由 Mre11、Rad50 和 nibrin (p95/NBS1) 组成的 MRN 复合体在感知、加工和修复断口中发挥至关重要作用 (5)。MRN 与 BRCA1 和 CtIP 相互作用以促进 5’ 切除 DSB DNA，以产生修复需要的3’ ssDNA 末端 (6)。DNA 结合蛋白 Mre11 显示核酸外切酶和核酸内切酶活性并且主要负责 ssDNA 末端加工 (7)。MRN 复合体和 ATM 激酶之间的相互作用促进激酶与其底物之间的结合并且可能导致 ATM 激活 (8)。通过磷酸化包括 c-Abl、BRCA1 和 p95/NSB1 在内的多种靶标，ATM 充当细胞周期检查点的中央控制者。激活的 c-Abl 磷酸化 Rad52，这促进 Rad51 与 ssDNA 结合和后续 ssDNA 的复性 (7)。

  1. Gottlieb, T.M. and Jackson, S.P. (1993) Cell 72, 131-42.
  2. Franco, S. et al. (2008) J Exp Med 205, 557-64.
  3. Collis, S.J. et al. (2005) Oncogene 24, 949-961.
  4. Akopiants, K. et al. (2009) Nucleic Acids Res 37, 4055-62.
  5. Williams, R.S. et al. (2007) Biochem Cell Biol 85, 509-20.
  6. Chen, L. et al. (2008) J Biol Chem 283, 7713-20.
  7. Czornak, K. et al. (2008) J Appl Genet 49, 383-96.
  8. Lee, J.H. and Paull, T.T. (2007) Oncogene 26, 7741-8.

通路和蛋白

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