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73211
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合
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Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit #73211

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Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: Image 1
使用 Cas9 (S. pyogenes) (D8Y4K) Rabbit mAb（绿色）对呈结构性 Cas9（酿脓链球菌）表达的小鼠（左图，阳性）或野生型小鼠（右图，阴性）的固定冷冻的大脑进行共聚焦免疫荧光分析。样本用 ProLong® Gold Antifade Reagent with DAPI #8961（蓝色）封片。
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: Image 2
使用 AsCpf1/Cas12a (Strain BV3L6) (E1U7C) Rabbit mAb（上图）和 Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278（下图），对空载转染 (-) 或经表达 AsCpf1/Cas12a（菌株 BV3L6)、FnCpf1/Cas12a（菌株 U112）、Cas9（化脓性链球菌）或 Cas9（金黄色葡萄球菌）(+) 的构建体转染的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: Image 3
使用 Cas9 (S. aureus) (E4G3U) 兔单克隆抗体（上图）和 Myc-Tag (71D10) 兔单克隆抗体 #2278（下图）对转染空载 (-) 或转染表达 Cas9（金黄色葡萄球菌）、Cas9（酿脓链球菌）、AsCpf1（菌株 BV3L6）或 FnCpf1（菌株 U112）(+) 的表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: Image 4
使用 Cas9 (S. pyogenes) Rabbit mAb mAb（上图）、Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278（中图）和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457（下图）对转染空载 (-) 或经构建表达 Cas9 (S. pyogenes) 转染 (+) 的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: Image 5
一抗与靶标蛋白结合之后，与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®，在酶催化分解期间发光。
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: Image 6
使用 FnCpf1/Cas12a (Strain U112) (E7I2B) Rabbit mAb（上图）和 Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278（下图），对空载转染 (-) 或经表达 FnCpf1/Cas12a（菌株 U112）、AsCpf1/Cas12a（菌株 BV3L6）、Cas9（化脓性链球菌）或 Cas9（金黄色葡萄球菌）(+) 的构建体转染的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: Image 7
使用 AsCpf1/Cas12a（菌株 BV3L6）(E1U7C) Rabbit mAb（绿色）和 Myc-Tag (9B11) Mouse mAb #2276（红色），对经 Myc 标记的 AsCpf1/Cas12a（菌株 BV3L6）的构建体转染的 293T 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。重叠信号显示为黄色。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: Image 8
使用 Cas9 (S. aureus) (E4G3U) Rabbit mAb（绿色）和 Myc-Tag (9B11) Mouse mAb #2276（红色）对转染表达带有 myc 标签的 Cas9（金黄色葡萄球菌）的表达载体的 293T 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。重叠信号显示为黄色。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: Image 9
使用 Cas9 (S. pyogenes) (D8Y4K) Rabbit mAb（绿色）和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700（红色），对 Cas9 表达 293T 细胞 （左图）和未修饰的 293T 细胞（右图）进行共聚焦免疫荧光分析。
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: Image 10
使用 FnCpf1/Cas12a（菌株 U112）(E7I2B) Rabbit mAb（绿色）和 Myc-Tag (9B11) Mouse mAb #2276（红色），对经 Myc 标记的 FnCpf1/Cas12a（菌株 U112）的构建体转染的 293T 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。重叠信号显示为黄色。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: Image 11
使用 AsCpf1/Cas12a （菌株 BV3L6）(E1U7C) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线），对未转染（蓝色）或经 myc 标记的 AsCpf1/Cas12a（菌株 BV3L6）（绿色）转染的 293 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: Image 12
以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照，使用 Cas9 (S. aureus) Rabbit mAb（实线）对未转染（蓝色）或转染表达带有 myc 标签的 Cas9（金黄色葡萄球菌）（绿色）的表达载体的 293T 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: Image 13
使用 Cas9 (酿脓链球菌) (D8Y4K) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线），对未处理的（蓝色）或转染 酿脓链球菌质粒（绿色）的 293T 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: Image 14
使用 FnCpf1/Cas12a （菌株 U112） (E7I2B) Rabbit mAb（实线）或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线），对未转染（蓝色）或经表达 myc 标记的 FnCpf1/Cas12a（菌株U112）的构建体转染（绿色）的 293 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
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To Purchase # 73211T
目录# 规格 价格 库存
73211T		 1 个试剂盒（4 x 20 微升）

定制制剂

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Cas9 (S. pyogenes) (D8Y4K) Rabbit mAb 65832 20 µl
  • WB
  • IF
  • F
 All 150 兔 IgG
Cas9 (S. aureus) (E4G3U) Rabbit mAb 51610 20 µl
  • WB
  • IF
  • F
 All 124 兔 IgG
AsCpf1/Cas12a (Strain BV3L6) (E1U7C) Rabbit mAb 19984 20 µl
  • WB
  • IF
  • F
 All 151 兔 IgG
FnCpf1/Cas12a (Strain U112) (E7I2B) Rabbit mAb 90111 20 µl
  • WB
  • IF
  • F
 All 152 兔 IgG
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
 Rab 山羊 

产品说明

Cas9 和相关蛋白小包装抗体提供一种经济合算的方法来检测 Cas9 和 Cas9 相关家族成员。该试剂盒含有足量的一抗，每种一抗可进行 2 次蛋白质印迹实验。

特异性/灵敏度

Cas9 和相关蛋白小包装抗体中的每种抗体均能检测各自靶蛋白的转染水平。抗体对指定的核酸内切酶靶标有特异性，但未观察到与其他核酸内切酶有交叉反应性。

来源/纯化

使用与 Cas9（酿脓链球菌）的 Val16、Cas9（金黄色葡萄球菌）的 Val905、氨基酸球菌属的 Leu822 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。Cpf1（菌株 BV3L6）与土拉弗朗西斯菌亚种新杀手菌（菌株 U112）中 Cpf1 的 Ile841。

背景

CRISPR-Cas（成簇的规律间隔短回文重复序列和 CRISPR 相关蛋白）是 RNA 导向的核酸酶效应子，可用来对哺乳动物系统进行精确基因组编辑 (1)。2 类 CRISPR 系统依赖于单一组分的效应蛋白来介导 DNA 干扰 (2)。来源于特异性菌种的多种 2 类 CRISPR 效应蛋白可用来进行基因组编辑。源于酿脓链球菌和金黄色葡萄球菌的 Cas9 蛋白家族是一些特征最为明显且广泛使用的编辑效应子酶家族。第 2 类 CRISPR 系统的其他成员包括 Cpf1/Cas12a（来自普氏菌属和弗朗西斯氏菌属的 CRISPR）核酸内切酶 (3)。相比 Cas9 系统，Cpf1/Cas12a 核酸内切酶有多种独一无二的功能来增加 CRISPR 基因组编辑技术的使用：1) Cpf1/Cas12a 介导的剪切依赖于单一较短的 CRISPR RNA (crRNA)，无需反式激活的 crRNA (tracrRNA)；2) Cpf1/Cas12a 利用富含 T 的前间区序列邻近基序 (PAM) 序列，而非富含 G 的 PAM；以及 3) Cpf1/Cas12a 会产生交错的 DNA 双链断裂，而非平末端 DNA 双链断裂 (3)。这些功能可扩大 CRISPR-Cas 系统用于特定基因调控和治疗应用的使用。已经对数个 Cpf1/Cas12a 细菌性同源基因（如新杀手弗朗西斯菌 U112 和氨基酸球菌属物种 BV3L6）表征 CRISPR 介导的哺乳动物细胞基因组编辑 (3,4 )。

限制使用

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