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73211
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit #73211

引用 (0)
Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: 图像 1

使用 Cas9 (酿脓链球菌) (D8Y4K) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线),对未处理的(蓝色)或转染 酿脓链球菌质粒(绿色)的 293T 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: 图像 2

以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)作为对照,使用 Cas9 (S. aureus) Rabbit mAb(实线)对未转染(蓝色)或转染表达带有 myc 标签的 Cas9(金黄色葡萄球菌)(绿色)的表达载体的 293T 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L), F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 用作二抗。

Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: 图像 3

使用 AsCpf1 (Strain BV3L6) (E1U7C) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对未转染(蓝色)或转染带 myc 标签的 AsCpf1(菌株 BV3L6)(绿色)的 293 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: 图像 4

使用 FnCpf1 (Strain U112) (E7I2B) Rabbit mAb(实线)或浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(虚线)对未转染(蓝色)或转染表达带 myc 标签的 FnCpf1(菌株U112)(绿色)的表达载体的 293细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。

Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: 图像 5

一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。

Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: 图像 6

使用 Cas9 (S. pyogenes) (D8Y4K) Rabbit mAb(绿色)和 β-Actin (8H10D10) Mouse mAb #3700(红色),对 Cas9 表达 293T 细胞 (左图)和未修饰的 293T 细胞(右图)进行共聚焦免疫荧光分析。

Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: 图像 7

使用 Cas9 (S. aureus) (E4G3U) Rabbit mAb(绿色)和 Myc-Tag (9B11) Mouse mAb #2276(红色)对转染表达带有 myc 标签的 Cas9(金黄色葡萄球菌)的表达载体的 293T 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。重叠信号显示为黄色。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: 图像 8

使用 AsCpf1 (Strain BV3L6) (E1U7C) Rabbit mAb(绿色)和 Myc-Tag (9B11) Mouse mAb #2276(红色)对转染表达带 myc 标签的 AsCpf1(菌株 BV3L6)的表达载体的 293T 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。

重叠信号显示为黄色。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: 图像 9

使用 FnCpf1 (Strain U112) (E7I2B) Rabbit mAb(绿色)和 Myc-Tag (9B11) Mouse mAb #2276(红色)对转染表达带 myc 标签的 FnCpf1(菌株 U112)的表达载体的 293T 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。重叠信号显示为黄色。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: 图像 10

使用 Cas9 (S. pyogenes) Rabbit mAb mAb(上图)、Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278(中图)和 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下图)对转染空载 (-) 或经构建表达 Cas9 (S. pyogenes) 转染 (+) 的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: 图像 11

使用 Cas9 (S. aureus) (E4G3U) 兔单克隆抗体(上图)和 Myc-Tag (71D10) 兔单克隆抗体 #2278(下图)对转染空载 (-) 或转染表达 Cas9(金黄色葡萄球菌)、Cas9(酿脓链球菌)、AsCpf1(菌株 BV3L6)或 FnCpf1(菌株 U112)(+) 的表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白印迹分析。

Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: 图像 12

使用 AsCpf1 (Strain BV3L6) (E1U7C) Rabbit mAb(上图)和 Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278(下图)对转染空载 (-) 或转染表达 AsCpf1(菌株 BV3L6)、FnCpf1(菌株 U112)、Cas9(酿脓链球菌)或 Cas9(金黄色葡萄球菌)(+) 的表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

Cas9 and Associated Proteins Antibody Sampler Kit: 图像 13

使用 FnCpf1 (Strain U112) (E7I2B) Rabbit mAb(上图)和 Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb #2278(下图)对转染空载 (-) 或转染表达 FnCpf1(菌株 U112)、AsCpf1(菌株 BV3L6)、Cas9(酿脓链球菌)或 Cas9(金黄色葡萄球菌)(+) 的表达载体的 293T 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。

购买 # 73211T
产品货号 规格 价格 库存
73211T
1 个试剂盒(4 x 20 µl)

产品说明

Cas9 和相关蛋白小包装抗体提供一种经济合算的方法来检测 Cas9 和 Cas9 相关家族成员。该试剂盒含有足量的一抗,每种一抗可进行 2 次蛋白质印迹实验。

特异性/敏感性

Cas9 和相关蛋白小包装抗体中的每种抗体均能检测各自靶蛋白的转染水平。抗体对指定的核酸内切酶靶标有特异性,但未观察到与其他核酸内切酶有交叉反应性。

来源/纯化

使用与 Cas9(酿脓链球菌)的 Val16、Cas9(金黄色葡萄球菌)的 Val905、氨基酸球菌属的 Leu822 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。Cpf1(菌株 BV3L6)与土拉弗朗西斯菌亚种新杀手菌(菌株 U112)中 Cpf1 的 Ile841。

背景

CRISPR-Cas(成簇的规律间隔短回文重复序列和 CRISPR 相关蛋白)是 RNA 导向的核酸酶效应子,可用来对哺乳动物系统进行精确基因组编辑 (1)。2 类 CRISPR 系统依赖于单一组分的效应蛋白来介导 DNA 干扰 (2)。来源于特异性菌种的多种 2 类 CRISPR 效应蛋白可用来进行基因组编辑。源于酿脓链球菌金黄色葡萄球菌的 Cas9 蛋白家族是一些特征最为明显且广泛使用的编辑效应子酶家族。2 类 CRISPR 系统的其他成员包括 Cpf1(普氏菌属和弗朗西斯氏菌属的 CRISPR)核酸内切酶 (3)。相比 Cas9 系统,Cpf1 核酸内切酶有多种独一无二的功能来提高 CRISPR 基因组编辑技术的使用:1) Cpf1 介导的剪切依赖于单一较短的 CRISPR RNA (crRNA),无需反式激活的 crRNA (tracrRNA);2) Cpf1 可利用富含 T 的前间区序列邻近基序 (PAM) 序列,而非富含 G 的 PAM;以及 3) Cpf1 会产生交错的 DNA 双链断裂,而非平末端 DNA 双链断裂 (3)。这些功能可扩大 CRISPR-Cas 系统用于特定基因调控和治疗应用的使用。多种 Cpf1 细菌同源基因(如新杀手弗朗西斯菌 U112氨基酸球菌属 BV3L6)已检测到可进行 CRISPR 介导的哺乳动物细胞基因组编辑 (3, 4)。

  1. Cong, L. et al. (2013) Science 339, 819-23.
  2. Horvath, P. and Barrangou, R. (2010) Science 327, 167-70.
  3. Zetsche, B. et al. (2015) Cell 163, 759-71.
  4. Zhang, Y. et al. (2017) Sci Adv 3, e1602814.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

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