反应性 | H M R |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 80 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
保存在 10mM sodium HEPES(pH 为 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA 和 50% 甘油中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
要进行蛋白质印迹法分析,在 4°C 下,将膜与稀释的一抗放在 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中一起孵育,轻晃孵育一整夜。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
从样品制备至检测,蛋白质印迹法需要用到的试剂在一个套装试剂盒中提供:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#13953,5 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
Calpain 2 Large Subunit (M-type) Antibody 可检测钙蛋白酶 2(大亚基)总蛋白的内源水平。该抗体可检测全长钙蛋白酶 2 和在丝氨酸 20 位点自发性蛋白裂解的钙蛋白酶 2。该抗体不能检测重组钙蛋白酶 1。
人, 小鼠, 大鼠
使用与人钙蛋白酶 2(大亚基)序列相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白质 A 和肽亲和色谱对抗体进行纯化。
钙蛋白酶是一种钙依赖性硫醇蛋白酶,它是一种功能激活的异二聚体,由小调节亚基和至少两个大催化亚基(钙蛋白酶 1 或钙蛋白酶 2)中的一个组成。在体外,钙蛋白酶 1 (mu-calpain) 需要微摩尔级别的钙激活,而钙蛋白酶2 (M-calpain) 则需要毫摩尔级的钙激活 (1)。体内钙蛋白酶的调节是目前许多研究的主题,这些研究表明蛋白水解活性由多种机制进行转录后调节,这些机制包括钙需求、异二聚体的亚细胞定位、经由 EGFR-Erk 信号转导级联反应进行的磷酸化、内源抑制剂(钙蛋白酶抑素)和自发性蛋白裂解 (1)。钙蛋白酶抑素负向调节钙蛋白酶 1 在 Gly27 和 Leu28 位点之间的自发性蛋白裂解 (2)。钙蛋白酶通过修饰而非降解其底物影响细胞迁移,这些底物负责细胞黏附和细胞骨架排列。钙蛋白酶活性的控制引发了人们对药物开发的关注,因为限制其活性会减弱肿瘤侵袭或慢性炎症 (1)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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