产品货号 | 规格 | 价格 | 库存 |
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11933S | 100 µl |
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感谢您的耐心等待。
反应性 | H M R |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 240 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
保存在 10mM sodium HEPES(pH 为 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA 和 50% 甘油中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
要进行蛋白质印迹法分析,在 4°C 下,将膜与稀释的一抗放在 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中一起孵育,轻晃孵育一整夜。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
从样品制备至检测,蛋白质印迹法需要用到的试剂在一个套装试剂盒中提供:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#13953,5 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
CAD Antibody 可检测 CAD 总蛋白的内源水平。该抗体可与某些细胞系中未知来源的大约 45 kDa 的蛋白发生交叉反应。
人, 小鼠, 大鼠
使用与人 CAD 蛋白羧基末端周围的残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白质 A 和肽亲和色谱对抗体进行纯化。
CAD 为重新合成嘧啶核苷酸所必需,并且拥有以下酶活性:谷氨酰胺转移酶、氨甲酰磷酸合成酶、天冬氨酸转氨甲酰酶和二氢乳清酸酶。因此,酶可将谷氨酰胺转化为单磷酸尿苷(所有嘧啶碱基的一种共同前体),这也是核酸合成所必需的 (1)。在静息细胞中,CAD 主要位于细胞浆中,其中细胞可进行合成嘧啶。当增殖细胞进入 S 期时,MAP 激酶 (Erk1/2) 在 Thr456 位点可磷酸化 CAD,进而可导致 CAD 转位到细胞核。细胞退出 S 期时,CAD 的 Thr456 位点去磷酸化,而 Ser1406 位点被 PKA 磷酸化,从而使通路返回基础活性 (2)。各项研究表明,CAD 在多种癌细胞类型中表达升高,这促进了药理学抑制蛋白(如 PALA)的发展。根据进一步研究,已将 CAD 鉴定为前列腺癌复发的一个潜在早期预测标志物 (3)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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