反应性 | H M R |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 49 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
保存在 10mM sodium HEPES(pH 为 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA 和 50% 甘油中。存储温度为 -20℃。不要分装抗体。
要进行蛋白质印迹法分析,在 4°C 下,将膜与稀释的一抗放在 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中一起孵育,轻晃孵育一整夜。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
从样品制备至检测,蛋白质印迹法需要用到的试剂在一个套装试剂盒中提供:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#13953,5 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
C9orf72 Antibody 可检测 C9orf72 总蛋白的内源水平。
人, 小鼠, 大鼠
使用与人 C9orf72 蛋白中 Ala202 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白质 A 和肽亲和色谱对抗体进行纯化。
C9orf72 基因中六核苷酸 GGGGCC 重复序列的扩增会导致与染色体 9p 有关的神经退行性疾病肌萎缩性脊髓侧索硬化症 (ALS) 和额颞叶痴呆 (FTD) (1,2)。这些重复序列引发疾病病因的具体机制目前是一个活跃的研究领域 (3)。已提出多种获得功能的机制。这些机制包括含有六核苷酸重复序列的 C9orf72 RNA 的毒性 (4),以及与重复序列相关的非 ATG 翻译产生的二肽重复序列蛋白所引起的毒性 (5)。除了获得功能的机制外,基因六核苷酸重复序列扩增可能导致 C9orf72 蛋白的功能丧失。C9orf72 包含一个预测的 DENN(在正常和肿瘤细胞中表达不同)结构域,其通常作为 Rab GTP 酶的鸟嘌呤交换因子,Rab GTP 酶是在膜转运中起关键调节作用的蛋白 (6)。与在膜转运中正常作用的 C9orf72 一致,生化和基因研究揭示,C9orf72 会与 Sim-Magenis 染色体区域 8 (SMCR8) 和含有 WD 重复序列的蛋白 41 (WDR41) 构成一种蛋白复合体,从而调节自噬-溶酶体通路 (7),表明自噬-溶酶体通路中依赖于 C9orf72 的改变可能导致 ALS/FTD 自噬。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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