反应性 | H M R Mk |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 220 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人, 小鼠, 大鼠, 猴
使用与人 Brg1 的 Pro680 周围的氨基酸相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。通过蛋白 A 和肽亲和色谱来纯化抗体。
调节染色质结构是调控转录激活和抑制的必要部分。可以通过至少两个进化上保守的策略,即通过 ATP-依赖性染色质重塑蛋白破坏组蛋白-DNA 接触或通过组蛋白尾修饰(包括甲基化和乙酰化),来进行修饰。四类 ATP-依赖性组蛋白重塑蛋白之一为 SWI/SNF 复合体,其核心催化亚基是 Brg1 或高度相关的蛋白质 hBRM (1)。这种 SWI/SNF 复合体含有不同的亚基,但其与 Brg1 或 hBRM 的结合是恒定的 (1)。据已表明,SWI/SNF 复合体可调控基因激活、细胞生长、细胞周期和分化 (1)。据已表明,Brg1/hBRM 可通过增强糖皮质激素受体的转录激活来调控转录 (2)。尽管 Brg1/hBRM 通常与转录激活相关,但同时也在与转录抑制相关的复合体中发现其存在,包括 HDACs、Rb 和 Tif1β (3-5)。Brg1/hBRM 在哺乳动物早期胚胎发生期间对调控基因转录起着至关重要的作用。此外,Brg1/hBRM 还作为抑癌基因起到作用,并且 Brg1 会在多种肿瘤细胞系中发生突变 (6-8)。
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