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54831
PhosphoPlus® Beclin-1 (Ser30) Antibody Duet
一抗
抗体对

PhosphoPlus® Beclin-1 (Ser30) Antibody Duet #54831

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使用 Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
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使用 Phospho-Beclin-1 (Ser30) (E1C4X) Rabbit mAb(上图)、Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb #3495(中图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对未经处理 (-) 或经过 Torin 1 #14379 处理(250 nM,2 小时;+)和/或经过 ULK1 抑制剂 SBI-0206965 #29089 处理(50 μM,2 小时;+)的 HCT 116 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
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使用 Beclin-1 (D40C5) XP® Rabbit mAb #3495(上)或 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125(下)对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® Beclin-1 siRNA I #6222 (+) 或 SignalSilence® Beclin-1 siRNA II (+) 转染的 Hela 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。Beclin-1 (D40C5) XP® Rabbit mAb 可确认 Beclin-1 的表达沉默,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用作观察上样量和 Beclin-1 siRNA 的特异性。
PhosphoPlus® Beclin-1 (Ser30) Antibody Duet: Image 4
使用 Phospho-Beclin-1 (Ser30) (E1C4X) Rabbit mAb(上图)、Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb #3495(中图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图)对未经处理 (-) 或经过 Torin 1 #14379 处理(250 nM,2 小时;+)的 C2C12 和 H-4-II-E 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
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使用 Phospho-Beclin-1 (Ser30) (E1C4X) Rabbit mAb(上图)或 GAPDH (D16H11) XP® Rabbit mAb #5174(下图),对转染空载 (-) 或转染带有 Myc/DDK 标签的全长人 Beclin-1 蛋白 (hBeclin-1-Myc/DDK; +) 和/或小鼠 ULK1 蛋白 (mULK1; +) 表达载体的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
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对经 Torin 1 #14379(250 μM,2 小时)处理的 HCT 116 细胞提取物的磷酸化 Beclin-1 (Ser30) 进行免疫沉淀分析。泳道 1 为 10% input,泳道 2 为 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900,泳道 3 为 Phospho-Beclin-1 (Ser30) (E1C4X) Rabbit mAb。使用 Phospho-Beclin-1 (Ser30) (E1C4X) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L29A9) mAb (HRP Conjugate) #5127 用作二抗。
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产品说明

Cell Signaling Technology (CST) 的 PhosphoPlus® Duets 为评估蛋白激活状态提供了一种方法。每个 Duet 都包含针对靶标的激活状态和总蛋白抗体。根据这些抗体在特定应用中的出色表现,将其从 CST 提供的产品中选择出来。

背景

自噬是自噬溶酶体降解蛋白质的一种分解代谢过程,由营养剥夺或神经退行性疾病引起 (1)。Beclin-1 是该过程中的关键蛋白之一,是哺乳动物中与酵母自噬蛋白 Apg6/Vps30 同源的基因 (2)。Beclin-1 可以补充由 Apg6 损失而造成的酵母自噬缺陷,在哺乳动物细胞中过表达时,可刺激细胞自噬 (3)。哺乳动物 Beclin-1 最初是从酵母双杂交筛选 Bcl-2 相互作用蛋白中分离出来,并且已经证明可以与 Bcl-2 和 Bcl-xL 相互作用,而不能与 Bax 或 Bak 相互作用 (4)。虽然 Beclin-1 一般普遍表达,但是研究发现在 40-75% 散发人乳腺癌和卵巢癌症中,其单等位基因缺失(5)。Beclin-1 主要位于胞浆结构中,包括线粒体,Beclin-1 过表达会引起核染色和 CRM1 依赖的出核转运 (6)。研究者发现 Beclin-1-/- 小鼠在胚胎发育早期就会死亡,而 Beclin-1-/+ 小鼠则有较高的自发肿瘤发病率。裸小鼠的干细胞的自噬反应改变,而对细胞凋亡的反应则正常 (7)。研究者还发现在体内病毒感染神经元时,Beclin-1 过表达能针对 Sindbis 病毒诱导的疾病和神经元凋亡产生显著保护作用 (4)。
在氨基酸饥饿、mTORC1 抑制和低氧的情况下,ULK1 会在 Ser30 磷酸化 Beclin-1 来诱导自噬 (8)。
  1. Reggiori, F. and Klionsky, D.J. (2002) Eukaryot Cell 1, 11-21.
  2. Kametaka, S. et al. (1998) J Biol Chem 273, 22284-91.
  3. Liang, X.H. et al. (1999) Nature 402, 672-6.
  4. Liang, X.H. et al. (1998) J Virol 72, 8586-96.
  5. Aita, V.M. et al. (1999) Genomics 59, 59-65.
  6. Liang, X.H. et al. (2001) Cancer Res 61, 3443-9.
  7. Yue, Z. et al. (2003) Proc Natl Acad Sci USA 100, 15077-82.
  8. Park, J.M. et al. (2018) Autophagy 14, 584-597.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

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仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PhosphoPlus 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
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