产品说明
Autophagy Vesicle Nucleation Antibody Sampler Kit,提供一种经济的方法来检测自噬体形成和成熟过程中的靶标蛋白。该试剂盒包含足量的抗体,每种一抗可进行两次蛋白质印迹实验。
特异性/灵敏度
Autophagy Vesicle Nucleation Antibody Sampler Kit 中的每种抗体均可检测其各自靶标的内源水平。Rubicon (D9F7) Rabbit mAb 可检测在 55 kDa 处的来源不明的条带。
来源/纯化
使用与人 PI3 激酶 III 类蛋白 Lys630 周围的残基、人 Beclin-1 蛋白 Thr72 周围的残基、人 UVRAG 蛋白 Gly502 周围的残基、人 Rubicon 蛋白 Leu210 周围的残基或人 Atg9A 蛋白 Gly780 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
使用与人 PIK3R4 蛋白 Gly825 周围的残基、人 Atg14 蛋白 Val215 周围的残基或人 Bif-1 蛋白 Gly129 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。
背景
自噬是自噬溶酶体降解大部分细胞浆内容物的一种分解代谢过程 (1,2)。自噬一般在营养匮乏的条件下被激活,但也与许多生理过程有关,包括发育、分化、神经退行性疾病、感染和癌症 (3)。已在酵母中大量发现自噬的分子机制,该机制还受大量自噬相关 (Atg) 基因的调节。这些蛋白参与自噬体的形成,自噬体是被转运到溶酶体中进行降解的胞质液泡。PIK3R4/PI3K III 类复合体与 Beclin-1 相互作用,在自噬的几个阶段发挥作用。Atg14 与 PIK3R4、PI3K III 类和 Beclin-1 组成复合体,将刺激自噬的形成。UVRAG 蛋白与 Atg14 竞争结合蛋白Beclin-1,与 PIK3R4、PI3K III 类和 Beclin-1 组成调节自噬体成熟的互斥复合体。在 Beclin-1 结合蛋白 Rubicon (4,5) 存在的情况下,自噬体成熟受损。要通过 Beclin-1/UVRAG 和营养水平 (6) 来激活和调节 PI3K III 类,PIK3R4 共表达是必要的。Bif-1 直接与 UVRAG 结合,然后与 Beclin-1 形成复合体,从而使自噬体成熟所需要的 PI3 激酶类 III 类/Vps34 的活性增加(7)。正如在营养不足的情况下所见,抑制 GSK-3β 会引起 Bif-1 表达增加,促使自噬性细胞死亡 (8)。Atg9A 是自噬体启动和扩大所需的整合型膜蛋白 (9,10)。募集 Atg9A 至自噬体膜是动态和短暂的,因为 Atg9A 还在称作 ω 的自噬相关结构、反面高尔基体网络 (TGN) 和内体之间循环,并且从未变成自噬体膜的稳定组分 (9,11)。未充分阐明 Atg9A 转运的精确调节,然而提出它涉及 p38 丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 结合蛋白 p38IP 和 Beclin-1-结合蛋白 Bif-1 (12,13)。
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通路与蛋白质
探索与本产品相关的通路 + 蛋白质。
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KARPAS 细胞系来源:剑桥大学 Abraham Karpas 博士。
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