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Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit #32345

引用 (1)
Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit: 图像 1

使用 Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb #12994 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit: 图像 2

使用 Atg12 (D88H11) Rabbit mAb #4180 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit: 图像 3

使用 Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb #8089 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit: 图像 4

使用 Atg7 (D12B11) Rabbit mAb #8558 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit: 图像 5

使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb (泳道 3),对 PANC-1 细胞提取物免疫沉淀 Atg5。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹。使用 Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb #3678 作为二抗以避免与兔 IgG 的交叉反应性。

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit: 图像 6

使用 Atg12 (D88H11) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit: 图像 7

使用 Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb(绿色)对 EBSS 饥饿的 PANC-1 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit: 图像 8

使用 Atg7 (D12B11) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit: 图像 9

一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit: 图像 10

使用 Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit: 图像 11

使用 Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit: 图像 12

使用 Atg7 (D12B11) Rabbit mAb(上图)或 α-Tubulin (11Η10) Rabbit mAb #2125(下图)对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-) 或 SignalSilence® Atg7 siRNA I #6604 (+) 转染的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。Atg7 (D12B11) Rabbit mAb 证实 Atg7 表达沉默,而使用 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 作为内参对照。

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit: 图像 13

使用 Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb(上)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下),对野生型 MEF (wt) 或 Atg5 敲除 (Atg5-/-) 的 MEF 提取物进行蛋白质印迹分析。Atg5-/- MEF 由来自Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA 的Ramnik Xavier博士惠赠。

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit: 图像 14

使用 Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或带有 myc 标签的人 Atg16L1β (hAtg16L1β-Myc; +) 表达载体或小鼠 Atg16L1α  (mAtg16L1α; +) 表达载体的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。该 myc 标记的人 Atg16L1β 表达载体由University of California Berkeley Qing Zhong 博士友情提供。

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产品说明

Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit 提供一种经济有效的方法来检测与自噬囊泡延伸通路相关的蛋白。该试剂盒包含足量的抗体,每种一抗可进行两次蛋白质印迹实验。

特异性/敏感性

Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb 可检测 Atg5 总蛋白的内源水平。这种抗体能够检测与 Atg12 接合的 Atg5。Atg12 (D88H11) Rabbit mAb 可检测游离的以及与 Atg5 结合的 Atg12 总蛋白的内源水平。Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb 可检测 Atg16L1 总蛋白的内源水平。在一些细胞系中可检测到 40 kDa 背景条带。Atg7 (D12B11) Rabbit mAb 可检测 Atg7 总蛋白的内源水平。

来源/纯化

使用与人 Atg5 蛋白 Leu265 周围残基相对应的合成肽、与人 Atg12 蛋白 Ser36 周围残基相对应的合成肽、与人 Atg16L1 蛋白氨基端周围残基相对应的合成肽,以及与人 Atg7 蛋白氨基端周围残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。

背景

自噬是自噬溶酶体降解大部分细胞浆内容物的一种分解代谢过程 (1,2)。通常在营养剥夺条件下激活自噬,但自噬也与一些生理过程有关,如发育、分化、神经变性、感染和癌症 (3)。已在酵母中大量发现自噬的分子机制,被称为‭自‭噬‭基‭‬因‭ (Atg)。自噬体的形成涉及一个泛素样接合体系,其中,Atg12 共价结合 Atg5,并靶向至自噬小泡 (4-6)。这种偶联反应由泛素 E1 样酶 Atg7 和 E2 样酶 Atg10 介导 (7,8)。Atg16L1 结合 Atg12-Atg5 连接物的 Atg5,形成一种 800 kDa多聚复合体 (9)。Atg12-Atg-5-Atg16L1 复合体位于前自噬体膜,可在其中确定 LC3 脂化的位点并催化成熟自噬体形成所需的反应 (9,10)。

  1. Reggiori, F. and Klionsky, D.J. (2002) Eukaryot Cell 1, 11-21.
  2. Codogno, P. and Meijer, A.J. (2005) Cell Death Differ 12 Suppl 2, 1509-18.
  3. Levine, B. and Yuan, J. (2005) J. Clin. Invest. 115, 2679-88.
  4. Mizushima, N. et al. (1998) J Biol Chem 273, 33889-92.
  5. Mizushima, N. et al. (1998) Nature 395, 395-8.
  6. Suzuki, K. et al. (2001) EMBO J 20, 5971-81.
  7. Tanida, I. et al. (1999) Mol Biol Cell 10, 1367-79.
  8. Shintani, T. et al. (1999) EMBO J 18, 5234-41.
  9. Mizushima, N. et al. (2003) J Cell Sci 116, 1679-88.
  10. Fujita, N. et al. (2008) Mol Biol Cell 19, 2092-100.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

限制使用

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KARPAS 细胞系来源:剑桥大学 Abraham Karpas 博士。
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