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4445
Autophagy Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Autophagy Antibody Sampler Kit #4445

引用 (0)
Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 1

使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb #12741 对未处理或用氯喹处理(50 μM,过夜;+)的 HeLa 、NIH/3T3 和 KNRK 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 2

使用 Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb #12994 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 3

使用 Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb #8089 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 4

使用 Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 5

使用 LC3A/B (D3U4C) Rabbit mAb 对未处理(蓝色)或用氯喹处理(50 µM 处理 16 小时;绿色)的 HeLa 细胞进行流式细胞术分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #4414 作为二抗。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 6

使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb (泳道 3),对 PANC-1 细胞提取物免疫沉淀 Atg5。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹。使用 Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb #3678 作为二抗以避免与兔 IgG 的交叉反应性。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 7

使用 Atg12 (D88H11) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 8

使用 Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb(绿色)对 EBSS 饥饿的 PANC-1 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 9

使用 Atg7 (D12B11) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 10

使用 Atg3 Antibody 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 11

一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 12

使用 Beclin-1 (D40C5) XP® Rabbit mAb #3495(上)或 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125(下)对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® Beclin-1 siRNA I #6222 (+) 或 SignalSilence® Beclin-1 siRNA II (+) 转染的 Hela 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。Beclin-1 (D40C5) XP® Rabbit mAb 可确认 Beclin-1 的表达沉默,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用作观察上样量和 Beclin-1 siRNA 的特异性。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 13

使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb (绿色)和 β-Actin (13E5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate) #8046(红色)对 HeLa(上)和 C2C12(下)细胞进行共聚焦免疫荧光分析,两种细胞用氯喹处理(50 μM,过夜;左)、用 EBSS(3 小时,中)营养饥饿处理或未处理(右)。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 14

使用 Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 15

使用 Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 16

使用 Atg7 (D12B11) Rabbit mAb(上图)或 α-Tubulin (11Η10) Rabbit mAb #2125(下图)对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-) 或 SignalSilence® Atg7 siRNA I #6604 (+) 转染的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。Atg7 (D12B11) Rabbit mAb 证实 Atg7 表达沉默,而使用 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 作为内参对照。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 17

使用 Atg3 Antibody 对转染空载或转染小鼠 Atg3 的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 18

使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠前列腺进行免疫组织化学分析。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 19

使用 Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb(上)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下),对野生型 MEF (wt) 或 Atg5 敲除 (Atg5-/-) 的 MEF 提取物进行蛋白质印迹分析。Atg5-/- MEF 由来自Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA 的Ramnik Xavier博士惠赠。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 20

使用 Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或带有 myc 标签的人 Atg16L1β (hAtg16L1β-Myc; +) 表达载体或小鼠 Atg16L1α  (mAtg16L1α; +) 表达载体的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。该 myc 标记的人 Atg16L1β 表达载体由University of California Berkeley Qing Zhong 博士友情提供。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 21

使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的对照(左)或用氯喹处理(右)的 NIH/3T3 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 22

在添加对照肽(左图)或抗原特异性肽(右图)的情况下,使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人鳞状细胞肺癌细胞进行免疫组织化学分析。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 23

使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对未处理 (-) 或用 Torin 1 处理(250 nM 处理 4 小时;+)的 RD 细胞进行蛋白质印迹分析。

Autophagy Antibody Sampler Kit: 图像 24

使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对未处理 (-) 或用氯喹处理(50 μM,过夜;+)的 HeLa 、NIH/3T3 和 KNRK 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。

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4445T
1 个试剂盒(7 x 20 µl)

产品说明

Autophagy Antibody Sampler Kit 提供了一种检测细胞中自噬体分子机制的经济有效方法。试剂盒包括足量的一抗和二抗,可进行 2 次蛋白质印迹实验。

特异性/敏感性

Autophagy Antibody Sampler Kit 中各抗体可检测各自靶标的内源水平。Atg5 和 Atg12 大鼠单克隆抗体均可识别 Atg12-Atg5 接合物。

来源/纯化

使用与人类 LC3B 的 Leu44、人类 Beclin-1 的 Thr72、人类 Atg5 的 Leu265 和人类 Atg12 的 Ser36 周围残基相对应的合成肽,以及人类 Atg7 和 Atg16L1 氨基末端附近相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人类 Atg3 氨基末端附近残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。

背景

自噬是自噬溶酶体降解大部分细胞浆内容物的一种分解代谢过程 (1,2)。通常在营养剥夺条件下激活自噬,但自噬也与一些生理过程有关,如发育、分化、神经变性、感染和癌症 (3)。已在酵母中大量发现自噬的分子机制,被称为 (Atg)。自噬体的形成涉及一个泛素样接合体系,其中,Atg12 共价结合 Atg5,并靶向至自噬小泡 (4-6)。这种偶联反应由泛素 E1 样酶 Atg7 和 E2 样酶 Atg10 介导 (7,8)。

  1. Reggiori, F. and Klionsky, D.J. (2002) Eukaryot. Cell 1, 11-21.
  2. Codogno, P. and Meijer, A.J. (2005) Cell Death Differ. 12 Suppl 2, 1509-18.
  3. Levine, B. and Yuan, J. (2005) J. Clin. Invest. 115, 2679-88.
  4. Mizushima, N. et al. (1998) J Biol Chem 273, 33889-92.
  5. Mizushima, N. et al. (1998) Nature 395, 395-8.
  6. Suzuki, K. et al. (2001) EMBO J 20, 5971-81.
  7. Tanida, I. et al. (1999) Mol Biol Cell 10, 1367-79.
  8. Shintani, T. et al. (1999) EMBO J 18, 5234-41.

通路和蛋白

探索与本品相关的通路 + 蛋白。

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