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4445
Autophagy Antibody Sampler Kit
一抗
抗体小包装组合

Autophagy Antibody Sampler Kit #4445

引用 (75)
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 1

使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb #12741 对 3T3 细胞的裂解物 (0.1 mg/mL) 进行 Simple Western™ 分析。虚拟泳道式图像(左图)显示一抗稀释比例为 1:10 和 1:50 时的靶标条带(如图所示)。对应的电泳图(右图)为一抗稀释比例在 1:10(蓝线)和 1:50(绿线)时沿毛细血管内分子量的化学发光结果。在还原条件下,使用 2-40 kDa 分离模块在 ProteinSimple(BioTechne 品牌)的 Jess™ Simple Western 仪器上进行该实验。

Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 2
对 Jurkat 细胞提取物的 Atg16L1 进行免疫沉淀。泳道 1 为 10% 输入,泳道 2 用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900 进行沉淀,泳道 3 为 Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb #8089。使用 Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹法。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 3
使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对未处理 (-) 或用 Torin 1 处理(250 nM 处理 4 小时;+)的 RD 细胞进行蛋白质印迹分析。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 4
使用 Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 5
使用 Atg3 Antibody 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 6
使用 Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 7
使用 Atg12 (D88H11) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 8
一抗与靶标蛋白结合之后,与偶联 HRP 的二抗形成复合体。添加 LumiGLO®,在酶催化分解期间发光。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 9
使用 Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 10
使用 Atg7 (D12B11) Rabbit mAb 对不同细胞系提取物进行蛋白质印迹分析。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 11
使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对未处理 (-) 或用氯喹处理(50 μM,过夜;+)的 HeLa 、NIH/3T3 和 KNRK 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 12
使用 Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb(上)或 β-Actin (D6A8) Rabbit mAb #8457(下),对野生型 MEF (wt) 或 Atg5 敲除 (Atg5-/-) 的 MEF 提取物进行蛋白质印迹分析。Atg5-/- MEF 由来自Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA 的Ramnik Xavier博士惠赠。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 13
使用 Atg3 Antibody 对转染空载或转染小鼠 Atg3 的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 14
使用 Beclin-1 (D40C5) XP® Rabbit mAb #3495(上)或 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb #2125(下)对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-)、SignalSilence® Beclin-1 siRNA I #6222 (+) 或 SignalSilence® Beclin-1 siRNA II (+) 转染的 Hela 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。Beclin-1 (D40C5) XP® Rabbit mAb 可确认 Beclin-1 的表达沉默,而 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 则用作观察上样量和 Beclin-1 siRNA 的特异性。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 15
使用 Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb 对转染空载 (-) 或带有 myc 标签的人 Atg16L1β (hAtg16L1β-Myc; +) 表达载体或小鼠 Atg16L1α  (mAtg16L1α; +) 表达载体的 293T 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。该 myc 标记的人 Atg16L1β 表达载体由University of California Berkeley Qing Zhong 博士友情提供。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 16
使用 Atg7 (D12B11) Rabbit mAb(上图)或 α-Tubulin (11Η10) Rabbit mAb #2125(下图)对经 100 nM SignalSilence® Control siRNA (Unconjugated) #6568 (-) 或 SignalSilence® Atg7 siRNA I #6604 (+) 转染的 HeLa 细胞提取物进行蛋白质印迹分析。Atg7 (D12B11) Rabbit mAb 证实 Atg7 表达沉默,而使用 α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb 作为内参对照。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 17
使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的小鼠前列腺组织进行免疫组织化学分析。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 18
使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900(泳道 2)或 Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb (泳道 3),对 PANC-1 细胞提取物免疫沉淀 Atg5。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb 进行蛋白质印迹。使用 Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb #3678 作为二抗以避免与兔 IgG 的交叉反应性。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 19
使用 Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb(绿色)对 EBSS 饥饿的 PANC-1 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 20
使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的对照(左图)或用氯喹处理(右图)的 NIH/3T3 细胞沉淀物进行免疫组织化学分析。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 21
在存在对照肽(左图)或抗原特异性肽(右图)的情况下,使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 对石蜡包埋的人鳞状细胞肺癌细胞进行免疫组织化学分析。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 22
使用 LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb (绿色)和 β-Actin (13E5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate) #8046(红色)对 HeLa(上)和 C2C12(下)细胞进行共聚焦免疫荧光分析,两种细胞用氯喹处理(50 μM,过夜;左)、用 EBSS(3 小时,中)营养饥饿处理或未处理(右)。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084(DNA 荧光染料)。
Autophagy Antibody Sampler Kit: Image 23
使用 LC3A/B (D3U4C) Rabbit mAb 对未处理(蓝色)或用氯喹处理(50 µM 处理 16 小时;绿色)的 HeLa 细胞进行流式细胞术分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 647 Conjugate) #4414 作为二抗。
To Purchase # 4445T
目录# 规格 价格 库存
4445T
1 个试剂盒(7 x 20 微升)

产品包括 数量 应用 反应性 MW (kDa) 同型
Beclin-1 (D40C5) Rabbit mAb 3495 20 µl
  • WB
  • IP
Rab M R Mk 60 兔 IgG
LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb 12741 20 µl
  • WB
  • IHC
  • IF
  • F
Rab M R 14, 16 兔 IgG
Atg5 (D5F5U) Rabbit mAb 12994 20 µl
  • WB
  • IP
Rab M R 55 兔 IgG
Atg12 (D88H11) Rabbit mAb 4180 20 µl
  • WB
  • IP
Rab M R Mk 16, 55 兔 IgG
Atg16L1 (D6D5) Rabbit mAb 8089 20 µl
  • WB
  • IP
  • IF
Rab M R 66, 68 兔 IgG
Atg7 (D12B11) Rabbit mAb 8558 20 µl
  • WB
  • IP
Rab M R 78 兔 IgG
Atg3 Antibody 3415 20 µl
  • WB
Rab M R Mk 40 兔 
Anti-rabbit IgG, HRP-linked Antibody 7074 100 µl
  • WB
Rab 山羊 

产品说明

Autophagy Antibody Sampler Kit 提供了一种检测细胞中自噬体分子机制的经济有效方法。试剂盒包括足量的一抗和二抗,可进行 2 次蛋白质印迹实验。

特异性/灵敏度

Autophagy Antibody Sampler Kit 中各抗体可检测各自靶标的内源水平。Atg5 和 Atg12 大鼠单克隆抗体均可识别 Atg12-Atg5 接合物。

来源/纯化

使用与人类 LC3B 的 Leu44、人类 Beclin-1 的 Thr72、人类 Atg5 的 Leu265 和人类 Atg12 的 Ser36 周围残基相对应的合成肽,以及人类 Atg7 和 Atg16L1 氨基末端附近相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。使用与人类 Atg3 氨基末端附近残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对多克隆抗体进行纯化。

背景

自噬是自噬溶酶体降解大部分细胞浆内容物的一种分解代谢过程 (1,2)。通常在营养剥夺条件下激活自噬,但自噬也与一些生理过程有关,如发育、分化、神经变性、感染和癌症 (3)。已在酵母中大量发现自噬的分子机制,被称为 (Atg)。自噬体的形成涉及一个泛素样接合体系,其中,Atg12 共价结合 Atg5,并靶向至自噬小泡 (4-6)。这种偶联反应由泛素 E1 样酶 Atg7 和 E2 样酶 Atg10 介导 (7,8)。

通路

探索与本品相关的通路。

有限使用

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