反应性 | H Mk |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 300 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人, 猴
牛 , 犬
使用与人类 ATR 中间残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。通过蛋白质 A 和肽亲和色谱纯化抗体。
毛细血管扩张性共济失调突变激酶 (ATM) 和毛细血管扩张性共济失调 Rad3 相关激酶 (ATR) 属于 PI3 激酶相关激酶 (PIKK) 的家族成员,PIKK 可对后接一个谷氨酰胺的丝氨酸或苏氨酸残基上多个底物进行磷酸化,作为对 DNA 损伤或复制受阻的反应 (1-3)。ATR 在细胞周期信号转导和 DNA 修复过程中发挥重要作用,但除此之外,对于其活性我们了解的很少。ATR 一直以来被认为是在细胞持续激活的状态下出现,并且通过募集 ATR 至单链 DNA 和复制应激位点来促使发生由 DNA 损伤诱发的信号转导。Serine 位点的 ATR 磷酸化 428 是对紫外线诱导的 DNA 损伤的反应, 同时也被认为是激活 ATR 的一种方式 (4,5)。最近的研究显示 ATR 在苏氨酸位点出现自磷酸化1989。与 ATM Ser1981 相似, ATR Thr1989 位点发生磷酸化是对 DNA 损伤的反应,这也表明该位点的磷酸化在 ATR 介导的信号转导中有重要作用 (6,7)。
探索与本品相关的通路。
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