反应性 | H |
敏感性 | 内源性 |
MW (kDa) | 213 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
保存在 10mM sodium HEPES(pH 为 7.5)、150 mM NaCl、100 µg/ml BSA 和 50% 甘油中。存储温度为 -20℃。请不要分装抗体。
蛋白质印迹法就是将膜与 5% w/v 脱脂奶粉、1X TBS 以及 0.1% Tween® 20 中的稀释的一抗在 4°C 下进行夜间孵育,同时轻轻晃动。
注意:请参阅一抗产品网页了解建议使用的抗体稀释度。
注意:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水制备溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#13953,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布于 2005 年 6 月
修订于 2020 年 6 月
实验步骤编号:263
Atg2A Antibody 可检测 Atg2A 总蛋白的内源水平。
人
使用与人类 Atg2A 蛋白 Glu750 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白质 A 和肽亲和色谱对抗体进行纯化。
自噬是导致自噬体和溶酶体内部大量胞质内容物降解的分解代谢过程。自噬的对照涉及一组最初具有酵母表征的自噬相关基因 (Atg) 编码的蛋白质 (1)。酵母中的探索研究表明,Atg2 对于通过与 Atg18 相互作用而自噬和逆向转运 Atg9 是必需的 (2-6)。两种人类 Atg2 同源物(Atg2A、Atg2B)对自噬体形成至关重要,因为二者的沉默会导致未闭合的自噬性结构堆积 (7)。饥饿诱导的自噬过程会将 Atg2A 靶定至自噬体生物生成的起始部位,其中它会与 DFCP1、WIPI-1 和其他自噬相关蛋白结合 (8)。
Atg2 蛋白还在脂质小滴代谢中发挥作用,因为 Atg2A 和 AtgB 的损耗会导致脂质小滴的大小、数目和分布的改变 (7,8)。在 Atg5缺失的细胞中未观察到脂质小滴的这些形态变化,这表明该功能与 Atg2 在自噬中的作用无关 (7)。饥饿诱导的自噬过程将 Atg2A(连同 Atg14L 一起)定位至富含 PI3P 的早期自噬体膜,同时将 Atg2A 和 Atg14L 的另一个亚群定位至与自噬状态无关脂质小滴 (8)。根据依托泊苷和多柔比星诱导的凋亡期间 Atg2A 表达的增加表明,Atg2A 可充当拓扑异构酶 II 抑制剂介导的凋亡的有用的指标(9)。相应 Atg2B 基因中的突变与微卫星不稳性高的胃癌和结直肠癌相关 (10)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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