反应性 | H |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 80 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人
使用与人 AP4B1 蛋白中 Ile708 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。通过蛋白质 A 和肽亲和色谱纯化抗体。
AP(接头蛋白)复合体可调控沿内吞和分泌通路的胞内膜转运 (1)。以作用于不同胞内区室的异四聚体复合体的形式存在的 AP 复合体 (AP1-5) 有五种。AP4 复合体包括 AP4E1、AP4B1、AP4M1 和 AP4S1,作用于反面高尔基体网络 (TGN) (2-4)。AP-4 与 Atg9A 相关,而 Atg9A 对自噬体生物发生至关重要 (5)。AP-4 缺乏会导致 Atg9A 在反面高尔基体网络中滞留,以及轴突上的自噬体生成缺陷 (5)。AP-4 缺乏与一组称为遗传性痉挛性截瘫的神经退行性疾病相关。AP4B1 基因突变被确定为神经系统疾病“47 型遗传性痉挛性截瘫 (SPG47)”的一个原因 (6,7)。
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