反应性 | H Mk |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 47, 51 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人, 猴
使用与人膜联蛋白 A7 羧基末端附近残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体。使用蛋白 A 和肽亲和力色谱对抗体进行纯化。
膜联蛋白 A7/ANXA7 是钙/磷脂结合蛋白膜联蛋白家族的一员,与膜融合与胞外分泌过程有关 (1)。膜联蛋白 A7 是一种 GTP 酶,GTP 结合与 PKC 活性均对调节蛋白功能非常重要 (2,3)。膜联蛋白 A7 与膜的结合以一种钙依赖性方式进行 (4)。选择性剪切会产生两种同工型。经证明膜联蛋白 A7 的亚细胞定位存在于细胞浆、囊泡结构、膜和肾上腺嗜铬颗粒 (5,6)。研究表明,胞核定位存在于发育性小鼠中枢神经系统和成年小鼠脑中 (7)。膜联蛋白 A7 缺陷型小鼠的研究表明,此蛋白在胰岛素分泌、钙离子信号转导 (8) 以及心脏细胞内钙稳态电稳定性 (9) 方面发挥作用。膜联蛋白 A7 基因可能是一种抑癌基因 (10),据报道膜联蛋白 A7 基因在前列腺癌中的拷贝数会发生改变 (11)。膜联蛋白 A7 表达还与人恶性胶质瘤患者的存活率有关 (12),小鼠单倍型不足会导致基因不稳定,从而诱导肿瘤发生 (13)。
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