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8205
PhosphoPlus® Akt (Thr308) Antibody Duet
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PhosphoPlus® Akt (Thr308) Antibody Duet #8205

引用 (7)
PhosphoPlus® Akt (Thr308) Antibody Duet: Image 1
以浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照，使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb（实线）对 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
PhosphoPlus® Akt (Thr308) Antibody Duet: Image 2
使用 Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb（上图）或 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb #4691（下图）对未经处理 (-) 或已经 Human Platelet-Derived Growth Factor AA (hPDGF-AA) #8913（100 ng/ml，5 分钟；+）处理的 NIH/3T3 细胞与未经处理的 (-) LNCaP 和 PC-3 细胞的提取物进行蛋白质印迹分析。
PhosphoPlus® Akt (Thr308) Antibody Duet: Image 3
使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 对重组 Akt1 蛋白、Akt2 蛋白和 Akt3 蛋白及来自不同细胞系的提取物进行蛋白质印迹分析。
PhosphoPlus® Akt (Thr308) Antibody Duet: Image 4
使用 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（泳道 2）或 Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb （泳道 3）对 Jurkat 细胞提取物磷酸 Akt (Thr308) 进行免疫沉淀。泳道 1 是 10% 输入对照。使用 Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb 进行蛋白质印迹分析。
PhosphoPlus® Akt (Thr308) Antibody Duet: Image 5
使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人黑色素瘤进行免疫组织化学分析。
PhosphoPlus® Akt (Thr308) Antibody Duet: Image 6
使用 Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb （绿色）对经胰岛素（100 nM，15 分钟；左图）或 LY294002 #9901（50 μM，2 小时；右图）处理的 C2C12 细胞进行共聚焦免疫荧光分析。使用 DY-554 phalloidin（红色）标记肌动蛋白纤丝。蓝色伪彩 = DRAQ5® #4084（DNA 荧光染料）。
PhosphoPlus® Akt (Thr308) Antibody Duet: Image 7
在对照肽（左）或 Akt (pan) Blocking Peptide #1085（右）存在下，使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 对石蜡包埋的人乳腺癌进行免疫组织化学分析。
PhosphoPlus® Akt (Thr308) Antibody Duet: Image 8
使用浓度匹配的 Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control #3900（虚线）作为对照组，使用 Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb（实线）对未经处理（绿色）或经 LY294002 #9901、Wortmannin #9951 和 U0126 #9903 处理（蓝色）的 Jurkat 细胞进行流式细胞分析。Anti-rabbit IgG (H+L)、F(ab')2 Fragment (Alexa Fluor® 488 Conjugate) #4412 作为二抗。
PhosphoPlus® Akt (Thr308) Antibody Duet: Image 9
在 SignalSlide (TM) Phospho-Akt (Ser473) IHC Controls #8101 （石蜡包埋的 LNCaP 细胞（未处理（左）或 LY294002 处理（右）））上使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 进行免疫组织化学分析。
PhosphoPlus® Akt (Thr308) Antibody Duet: Image 10
使用 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb（绿色）对 C2C12 细胞（LY294002 处理（左）或胰岛素处理（右））进行共聚焦免疫荧光分析。肌动蛋白纤丝用 Alexa Fluor®555 phalloidin（红色）进行标记。蓝色伪彩 = DRAQ5™ （DNA 荧光染料）。
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定制制剂

产品包括 数量 反应性 MW (kDa) 同型
Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb 13038 100 µl H M R Mk 60 兔 IgG
Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb 4691 100 µl H M R Mk Dm 60 兔 IgG

产品说明

Cell Signaling Technology (CST) 的 PhosphoPlus® Duets 为评估蛋白激活状态提供了一种方法。每个 Duet 都包含针对靶标的激活状态和总蛋白抗体。根据这些抗体在特定应用中的出色表现，将其从 CST 提供的产品中选择出来。

背景

Akt 也称作 PKB 或 Rac，在控制存活和凋亡中发挥至关重要作用 (1-3)。这种蛋白激酶由胰岛素和多种生长和存活因子激活，并在涉及 PI3 激酶的 wortmannin 敏感通路中发挥作用 (2,3)。通过磷脂结合过程并由 PDK1 在 Thr308 位点磷酸化激活环 (4) ，以及通过羧基末端内部 Ser473 处的磷酸化激活 Akt。曾经功能难以捉摸的 PDK2 可在 Ser473 处磷酸化 Akt ，它被鉴定为在含 rictor 和 Sin1 的雷帕霉素中的非敏感复合体中哺乳动物雷帕霉素靶标 (mTOR) (5,6)。Akt 通过磷酸化和失活几种靶标（包括 Bad (7)、叉头转录因子 (8)、c-Raf (9) 和 caspase-9）而抑制凋亡，进而促进细胞存活。PTEN 磷酸酶是 PI3K/Akt 信号转导通路的主要负向调节分子 (10)。LY294002 是特异性 PI3 激酶抑制剂 (11)。Akt 的另一个主要功能是通过磷酸化和失活 GSK-3α 和 β 调节糖原合成 (12,13)。Akt 还可以在胰岛素刺激转运葡萄糖中发挥作用 (12)。除其在存活和糖原合成中的作用外，Akt 还通过防止 GSK-3β 介导的磷酸化和周期蛋白 D1 降解 (14) 并通过负向调节周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白 p27 Kip1 (15) 和 p21 Waf1/Cip1 (16) 来参与细胞周期调节。Akt 还通过直接磷酸化含有 raptor 的雷帕霉素敏感性复合体中的 mTOR，在细胞生长中发挥至关重要作用 (17)。更重要的是，Akt 磷酸化并失活结节蛋白 (TSC2)（在 mTOR-raptor 复合体中 mTOR 的抑制分子）(18,19)。

  1. Franke, T.F. et al. (1997) Cell 88, 435-7.
  2. Burgering, B.M. and Coffer, P.J. (1995) Nature 376, 599-602.
  3. Franke, T.F. et al. (1995) Cell 81, 727-36.
  4. Alessi, D.R. et al. (1996) EMBO J 15, 6541-51.
  5. Sarbassov, D.D. et al. (2005) Science 307, 1098-101.
  6. Jacinto, E. et al. (2006) Cell 127, 125-37.
  7. Cardone, M.H. et al. (1998) Science 282, 1318-21.
  8. Brunet, A. et al. (1999) Cell 96, 857-68.
  9. Zimmermann, S. and Moelling, K. (1999) Science 286, 1741-4.
  10. Cantley, L.C. and Neel, B.G. (1999) Proc Natl Acad Sci USA 96, 4240-5.
  11. Vlahos, C.J. et al. (1994) J Biol Chem 269, 5241-8.
  12. Hajduch, E. et al. (2001) FEBS Lett 492, 199-203.
  13. Cross, D.A. et al. (1995) Nature 378, 785-9.
  14. Diehl, J.A. et al. (1998) Genes Dev 12, 3499-511.
  15. Gesbert, F. et al. (2000) J Biol Chem 275, 39223-30.
  16. Zhou, B.P. et al. (2001) Nat Cell Biol 3, 245-52.
  17. Navé, B.T. et al. (1999) Biochem J 344 Pt 2, 427-31.
  18. Inoki, K. et al. (2002) Nat Cell Biol 4, 648-57.
  19. Manning, B.D. et al. (2002) Mol Cell 10, 151-62.

通路

探索与本品相关的通路。

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Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
PhosphoPlus 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
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