反应性 | H M R |
灵敏度 | 内源性 |
MW (kDa) | 65-80 |
来源 | 兔 |
产品信息
应用 | 稀释度 |
---|---|
蛋白质印迹法 | 1:1000 |
为了进行蛋白质印迹,在 4°C 将膜与 5% w/v BSA、1X TBS、0.1% Tween® 20 中稀释的一抗孵育过夜,同时柔和振摇。
注意:请参阅一抗产品网页了解推荐的抗体稀释度。
从样品制备至检测,进行蛋白质印迹所需要的试剂现归于一个便利的试剂盒:#12957 Western Blotting Application Solutions Kit
注:使用反渗透去离子水 (RODI) 或同等级别的水配制溶液。
上样 20 µl 到 SDS-PAGE 凝胶 (10 cm x 10 cm) 上。
注意:建议将预染蛋白分子量标准品(#59329,10 µl/泳道)上样,以验证转膜的效率,生物素化蛋白质标准品(#7727,10 µl/泳道)可以直接在膜上显出条带以确定分子量。
注意:体积适用于 10 cm x 10 cm (100 cm2) 的膜;对于不同尺寸的膜,可相应调整体积。
* 避免反复接触皮肤。
发布时间 2005 年 6 月
修订时间 2020 年 6 月
实验步骤编号:10
人, 小鼠, 大鼠
猴, 非洲爪蟾蜍, 牛 , 犬
使用与人 ABCG2 蛋白 Thr180 周围的残基相对应的合成肽对动物进行免疫接种来产生多克隆抗体,该蛋白存在于 ABCG2 的胞内区里。抗体可通过蛋白质 A 和肽亲和色谱法进行纯化。
ABCG2 (BCRP1/ABCP/MXR) 是 ATP 上样板转运蛋白家族的成员,其可充当 ATP 依赖型转运蛋白的功能用于多种化合物,与肿瘤细胞耐药有关 (1-6)。ABCG2 是高度糖基化的跨膜蛋白,有六个跨膜区,这与它的半转运功能一致。ABC 家族蛋白以全长转运蛋白或半转运蛋白形式存在,并且可通过同源二聚体或异源二聚体生成功能性转运蛋白。ABCG2 在胎盘和对许多化疗药物(包括米托蒽醌、doxorubicin、拓扑替康和黄酮吡醇)耐药的所选细胞系中表达水平高。啮齿动物的肾脏中ABCG2 表达水平最高 (8)。还发现干细胞群中有 ABCG2 表达,尤其是造血干细胞和神经元干细胞,但随着分化程度的增加,其表达水平下调 (9-11)。
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