反应性 | H |
产品包括 | 体积 | 溶液颜色 | |||
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Atg14 Rabbit mAb Coated Microwells | 96 次测试 | ||||
Phospho-Atg14 (Ser29) Rabbit Detection mAb | 1 个 | 红色(冻干) | |||
HRP Diluent | 5.5 ml | 红色 | |||
TMB Substrate 7004 | 11 ml | ||||
STOP Solution 7002 | 11 ml | ||||
Sealing Tape | 2 ea | ||||
ELISA Wash Buffer (20X) 9801 | 25 ml | ||||
Cell Lysis Buffer (10X) 9803 | 15 ml |
产品信息
快速实验步骤 (RP) 的 PathScan® RP Phospho-Atg14 (Ser29) Sandwich ELISA Kit 是一种固相夹心酶联免疫吸附检测 (ELISA) 试剂盒,可在缩短的 1.5 小时测定时间内检测在 Ser29 位点被磷酸化的 Atg14 蛋白的内源水平。在包被微孔板上孵育细胞裂解物和检测抗体,只需一步即可与在 Ser29 位点磷酸化的 Atg14 蛋白形成夹心结构。随后深度洗涤平板,并添加 TMB 试剂来产生信号。该显色的吸光度值与在 Ser29 位点被磷酸化的 Atg14 蛋白的数量成比例。点击此处,以详细了解您的所有 ELISA 试剂盒选项。
*试剂盒中的抗体为专属该试剂盒的定制制剂。
注:此实验步骤用于使用直接与检测用抗体偶联的 HRP 的 PathScan® 试剂盒(快速实验步骤),而不用于依次添加检测用抗体和 HRP 二抗的两步法。
注意:用去离子水/纯净水或等效水制备溶液。
对于贴壁细胞
对于悬浮细胞
注:在运行检测之前,请将所有材料和已制备的试剂平衡至室温。
注意:阳性反应的初始颜色为蓝色,一旦添加 STOP 溶液,就变为黄色。
创建于 2020 年 7 月
实验步骤编号:2144
自噬是自噬溶酶体降解大部分细胞浆内容物的一种分解代谢过程 (1,2)。一般在营养匮乏的条件下激活自噬,但自噬也与许多生理过程相关,包括发育、分化、神经退行性疾病、感染和癌症 (3)。已在酵母中大量发现自噬的分子机制,该机制还受大量自噬相关 (Atg) 基因的调节。这些蛋白参与自噬体的形成,自噬体是被转运到溶酶体中进行降解的胞质液泡。III 型磷酸肌醇 3-激酶 (PI3K) Vps34 可调节液泡转运和自噬 (4,5)。Vsp34 可结合许多蛋白,包括 p105/Vps15、Beclin-1, UVRAG、Atg14 和 Rubicon,从而确定 Vsp34 的功能 (6-12)。Atg14 和 Rubicon 根据其结合 Beclin-1 的能力进行鉴定,并在独特复合体中发挥抑制作用 (9-12)。位于内体和溶酶体的 Rubicon 会抑制 Vps34 脂质激酶活性;敲除 Rubicon 会增强自噬和内吞转运 (11,12)。相比之下,Atg14 位于自噬体、隔离膜和内质网,并可增强 Vps34 活性。敲除 Atg14 会抑制饥饿诱导的自噬 (11,12)。
丝氨酸/苏氨酸激酶 ULK1 在 Ser29 位点磷酸化 Atg14,进而促进自噬体形成 (13)。
探索与本品相关的通路。
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