反应性 | H |
产品包括 | 容量(计数) | 溶液颜色 | |||
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FastScan™ ELISA Microwell Strip Plate, 96 Well 53257 | 1 x 96 次检测 | ||||
4E-BP1 Rabbit Capture mAb | 1 x 1 次 | 绿色(冻干) | |||
Phospho-4E-BP1 (Ser65) Rabbit HRP-linked mAb | 1 x 1 次 | 红色(冻干) | |||
FastScan™ ELISA Capture Antibody Diluent | 1 x 3 ml | 绿色 | |||
FastScan™ ELISA HRP Antibody Diluent | 1 x 3 ml | ||||
TMB Substrate 7004 | 1 x 11 ml | ||||
STOP Solution 7002 | 1 x 11 ml | ||||
Sealing Tape | 1 x 1 次 | ||||
ELISA Wash Buffer (20X) 9801 | 1 x 25 ml | ||||
FastScan™ ELISA Cell Extraction Buffer (5X) 69905 | 1 x 10 ml | ||||
FastScan™ ELISA Cell Extraction Enhancer Solution (50X) 25243 | 1 x 1 ml | ||||
FastScan™ ELISA Kit #66753 Positive Control Type 1 | 1 x 1 次 |
产品信息
注意:用去离子水/纯净水或等效水配制溶液。
仅配制实验当天所需的足够试剂。
*重要提示:提供的 FastScan™ ELISA 细胞提取增强剂溶液 (50X) 保存在 4°C 下时可能会产生沉淀。要溶解,则在 37°C 下短暂加热并轻轻混合。FastScan™ ELISA 细胞提取增强剂溶液 (50X) 可保存在室温下,以避免沉淀。
注:1X 细胞提取缓冲液含有磷酸酶抑制剂。应在裂解细胞之前立即将蛋白酶抑制剂加入 1X 细胞提取缓冲液中。还可添加其他磷酸酶抑制剂(例如蛋白酶/磷酸酶抑制剂混合物 (100X) #5872,未提供)。
注意:一定数量的 FastScan™ ELISA 试剂盒不包含阳性对照,请参考数据表上的产品内含试剂表,了解所含试剂列表。如果您对如何产生这些试剂盒的阳性对照需要支持,请联系 CST 技术支持 ([电子邮件受保护])。
对于贴壁细胞
对于悬浮细胞
注:在运行检测之前,请将所有材料和已制备的试剂平衡至室温。
*注:某些 FastScan™ ELISA Kit 可能需要在这个步骤额外洗涤。任何额外洗涤的要求都将在试剂盒数据表的产品“说明”中特别注明。
注意:阳性反应的初始颜色为蓝色,一旦添加 STOP 溶液,就变为黄色。
发布时间 2018 年 5 月
修订时间 2019 年 11 月
实验步骤编号:1924
翻译抑制蛋白 4E-BP1(也称为 PHAS-1)可通过结合翻译起始因子 eIF4E 抑制帽子结构依赖性翻译。4E-BP1 的高度磷酸化会扰乱这种相互作用,进而导致帽子结构依赖性翻译被激活 (1)。PI3 激酶/Akt 通路和 FRAP/mTOR 激酶均可调节 4E-BP1 活性 (2,3)。多个 4E-BP1 残基在体内被磷酸化 (4)。一般认为FRAP/mTOR 在 Thr37 和 Thr46 的磷酸化虽然不会阻碍 4E-BP1 与 eIF4E的结合,但会引导4E-BP1 后续在 Ser65 和 Thr70 的磷酸化 (5)。
探索与本品相关的通路。
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