产品货号 | 规格 | 价格 | 库存 |
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29666C | 1 个试剂盒(96 次检测) |
为庆祝中国农历新年,我们的中国办事处关闭。我们将于星期四(2 月 18 日 )开放。
感谢您的耐心等待。
反应性 |
产品包括 | 容量(计数) | 溶液颜色 | |||
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FastScan™ ELISA Microwell Strip Plate, 96 Well 53257 | 1 x 96 次检测 | ||||
Cas9 (S. pyogenes) Rabbit Capture mAb | 1 x 1 次 | 绿色(冻干) | |||
Cas9 Mouse HRP-linked mAb | 1 x 1 次 | 红色(冻干) | |||
FastScan™ ELISA Capture Antibody Diluent | 1 x 3 ml | 绿色 | |||
FastScan™ ELISA HRP Antibody Diluent | 1 x 3 ml | ||||
TMB Substrate 7004 | 1 x 11 ml | ||||
STOP Solution 7002 | 1 x 11 ml | ||||
Sealing Tape | 1 x 1 次 | ||||
ELISA Wash Buffer (20X) 9801 | 1 x 25 ml | ||||
FastScan™ ELISA Cell Extraction Buffer (5X) 69905 | 1 x 10 ml | ||||
FastScan™ ELISA Cell Extraction Enhancer Solution (50X) 25243 | 1 x 1 ml | ||||
FastScan™ ELISA Kit #29666 Positive Control Type 2 | 1 x 1 次 |
产品信息
注意:用去离子水/纯净水或等效水制备溶液。
仅制备实验当天所需的足够试剂。
*重要提示:提供的 FastScan™ ELISA 细胞提取增强剂溶液 (50X) 保存在 4°C 下时可能会产生沉淀。要溶解,则在 37°C 下短暂加热并轻轻混合。FastScan™ ELISA 细胞提取增强剂溶液 (50X) 可保存在室温下,以避免沉淀。
注:1X 细胞提取缓冲液含有磷酸酶抑制剂。应在裂解细胞之前立即将蛋白酶抑制剂加入 1X 细胞提取缓冲液中。还可添加其他磷酸酶抑制剂(例如蛋白酶/磷酸酶抑制剂混合物 (100X) #5872,未提供)。
注意:一定数量的 FastScan™ ELISA 试剂盒不包含阳性对照,请参考数据表上的产品内含试剂表,了解所含试剂列表。如果您对如何产生这些试剂盒的阳性对照需要支持,请联系 CST 技术支持 (support@cellsignal.com)。
对于贴壁细胞
对于悬浮细胞
注:在运行检测之前,请将所有材料和已制备的试剂平衡至室温。
*注:某些 FastScan™ ELISA Kit 可能需要在这个步骤额外洗涤。任何额外洗涤的要求都将在试剂盒数据表的产品“说明”中特别注明。
注意:阳性反应的初始颜色为蓝色,一旦添加 STOP 溶液,就变为黄色。
发布于 2018 年 5 月
修订于 2019 年 11 月
实验步骤编号:1924
The FastScan™ Cas9 (S. pyogenes) ELISA Kit 是一种夹心酶联免疫吸附剂检测 (ELISA) 试剂盒,可检测 Cas9(化脓性链球菌)的内源水平。要进行这种检测,样品用一种偶联专有标签的捕获抗体以及一种连接 HRP 的检测二抗孵育,从而在溶液中与 Cas9(化脓性链球菌)形成一个夹心结构。这整个复合体用一种抗标签抗体固定在平板上。随后洗涤各孔以清除未结合的物质。然后添加 TMB。观察到的信号振幅与Cas9(化脓性链球菌)的数量成比例。该试剂盒中的抗体为该试剂盒所特制。
重要事项:这种 FastScan™ ELISA Kit 需要在实验步骤的第 6 步洗涤 4 次。
FastScan™ Cas9 (S. pyogenes) ELISA Kit 可检测 Cas9(化脓性链球菌)的内源水平,如图 1 所示。经内部测试确定,该试剂盒可检测规定物种中的蛋白,但也可能检测其他物种的同源蛋白。
CRISPR 相关蛋白 9 (Cas9) 是一种 RNA 引导的 DNA 核酸酶,并且是 化脓性链球菌 CRISPR 抗病毒免疫系统的组成部分,该系统提供针对外部染色体遗传物质的适应性免疫 (1)。CRISPR 抗病毒作用机制涉及三个步骤:(i) 通过宿主细菌取得外来 DNA;(ii) CRISPR RNA (crRNA) 的合成和成熟,随后形成 RNA-Cas 核酸酶蛋白质复合体;和 (iii) 通过该复合体识别外来 DNA 以及由 Cas 核酸酶活性的剪切作用进行定向干扰 (2)。II 型 CRISPR/Cas 抗病毒免疫系统可提供强有力的基因组精确编辑工具,并且具有特异性调节基因和治疗性应用的潜力 (3)。在细胞中必须引入或表达 Cas9 蛋白和引导 RNA(包含 crRNA 和反式激活 crRNA (tracrRNA) 之间的融合)。引导 RNA 5' 末端的一个 20 核苷酸序列,可以把 Cas9 引导至特定的 DNA 靶标位点。因此,可“编程” Cas9 以便在体外及在细胞和生物中切割多种 DNA 位点。CRISPR/Cas9 基因组编辑工具已经用于许多生物体中,包括小鼠和人类细胞 (4,5)。研究显示,CRISPR 可以用来在啮齿类和灵长类胚胎干细胞中产生突变等位基因或报告基因 (6-8)。
探索与本品相关的通路 + 蛋白。
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