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7734
HTScan® FGF Receptor 3 Kinase Assay Kit
细胞检测试剂盒
检测试剂盒

HTScan® FGF Receptor 3 Kinase Assay Kit #7734

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HTScan® FGF Receptor 3 Kinase Assay Kit: Image 1

图 3. FGFR-3 激酶活性的剂量依赖性曲线:使用 Phospho-Tyrosine mAb (P-Tyr-100) #9411 检测 FGFR-3 激酶对底物肽 (#1305) 的磷酸化可产生 DELFIA® 数据。在 50 µl 反应体积中,每个反应孔在室温下用数量递增的 FGFR-3 和 1.5 µM 底物肽反应 30 分钟。(DELFIA® 是 PerkinElmer, Inc. 的一个注册商标)。

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图 5. Staurosporine 会抑制 FGFR-3 激酶活性:使用 Phospho-Tyrosine mAb (P-Tyr-100) #9411 检测 FGFR-3 激酶对 FGFR-3 底物肽 (#1305) 的磷酸化可产生 DELFIA® 数据。在 50 µl 反应体积中,每个反应孔在室温下用 50 ng FGFR-3、1.5 µM 底物肽、20 µM ATP 和数量递增的 staurosporine 反应 30 分钟。(DELFIA® 是 PerkinElmer, Inc. 的一个注册商标)。

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图 4. FGFR-3 激酶活性的肽浓度依赖性:使用 Phospho-Tyrosine mAb (P-Tyr-100) #9411 检测 FGFR-3 激酶对底物肽 (#1305) 的磷酸化可产生 DELFIA® 数据。在 50 µl 反应体积中,每个反应孔在室温下用 50 ng FGFR-3 和浓度递增的底物肽反应 30 分钟。(DELFIA® 是 PerkinElmer, Inc. 的一个注册商标)。

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图 2. FGFR-3 激酶活性的时程:使用 Phospho-Tyrosine mAb (P-Tyr-100) #9411 检测 FGFR-3 激酶对 FGFR-3 底物肽 (#1305) 的磷酸化可产生 DELFIA® 数据。在 50 µl 反应体积中,每个反应孔用 50 ng FGFR-3 和 1.5 µM 底物肽。(DELFIA® 是 PerkinElmer, Inc. 的一个注册商标)。

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图 1. 在使用以下反应条件的放射检测中可检测 FGFR-3 激酶活性:60 mM HEPES-NaOH (pH 7.5)、3 mM MgCl2、3 mM MnCl2、3 µM 原钒酸钠、1.2 mM DTT、ATP(可变)、2.5 µg/50 µl PEG20.000,底物:Poly(EY) 0.5 µg/50 µl,重组 FGFR-3:100 ng/50 µl。

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产品说明

该试剂盒提供一种方法来使用重组人 FGFR-3 激酶进行激酶活性检测。它包含活化的 FGFR-3 激酶(以 GST 融合蛋白的形式保存)、生物素化肽底物以及用于检测磷酸化底物肽的磷酸化酪氨酸抗体。

MW (kDa) 肽底物,生物素-FLT3 (Tyr589):1,945 道尔顿。GST-FGFR-3 激酶:82 
分子式

Peptide substrate, Biotin-FLT3 (Tyr589):1945 道尔顿。GST-FGFR-3 激酶:82 kDa。

背景

成纤维细胞生长因子 (FGF) 通过细胞表面受体酪氨酸激酶进行信号转导,从而在靶细胞中生成促有丝分裂和产生血管生成效应。FGF 受体家族有四个成员:FGFR1 (flg)、FGFR2 (bek, KGFR)、FGFR3 和 FGFR4。每个受体均含有一个胞外配体结合域、一个跨膜结构域和一个细胞质激酶结构域 (1)。配体结合与二聚化后,这些受体在特定酪氨酸残基上被磷酸化 (2)。FGFR1 胞质尾区的七个酪氨酸残基在以下位点被磷酸化:Tyr463、583、585、653、654、730 和 766。Tyr653 和 Tyr654 对激活 FGFR 的催化活性非常重要,也是信号转导所必需的 (3)。另一个磷酸化的酪氨酸残基可能会向下游信号转导组分(如 Crk 和 PLCγ) 提供停泊位点 (4,5)。

  1. Powers, C.J. et al. (2000) Endocr Relat Cancer 7, 165-97.
  2. Reilly, J.F. et al. (2000) J Biol Chem 275, 7771-8.
  3. Mohammadi, M. et al. (1996) Mol Cell Biol 16, 977-89.
  4. Mohammadi, M. et al. (1991) Mol Cell Biol 11, 5068-78.
  5. Larsson, H. et al. (1999) J Biol Chem 274, 25726-34.

通路和蛋白

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