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59496
CellSimple™ Cellular Reactive Oxygen Species (ROS) Detection Assay Kit
细胞检测试剂盒
检测试剂盒

CellSimple™ Cellular Reactive Oxygen Species (ROS) Detection Assay Kit #59496

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产品说明

CellSimple™ Cellular Reactive Oxygen Species (ROS) Detection Assay kit 是一种专为使用 CellSimple™ Cell Analyzer 而设计的荧光检测试剂盒。它可检测活细胞的 ROS 总水平。该试剂盒包含非荧光荧光素衍生物 DCFH-DA(一种常见的 ROS 诱导物叔丁基过氧化氢 (TBHP))、Loading Buffer 和 20X PBS wash buffer。DCFH-DA 在预孵育期间扩散到细胞中,并被细胞酯酶去乙酰化后形成 DCFH,DCFH 可被细胞 ROS 快速氧化成强萤光 DCF。绿色通道 (525/45 nm) 中 DCF 荧光的中位荧光强度 (MFI) 可用于量化细胞 ROS 的总水平。

特异性/敏感性

CellSimple™ Cellular Reactive Oxygen Species (ROS) Detection Assay Kit 预计可检测所有物种中活细胞的活性氧簇。在对您的目标细胞进行检测时,建议进行细胞数目滴定。

背景

CellSimple™ Cell Analyzer 是一种台式仪器,它使用一次性薄膜上样板、488 nm 激光组合、两根光电倍增管(525/45 nm 和 561 nm LP 滤光片)、基于库尔特原理的细胞测量以及板载软件,以提供易于运行的应用和数据分析。每次检测大约在 10 秒内进行数据采集。该仪器依赖于一次性上样板来处理样品,从而减少对流动池清洗和流体维护的需要,仪器尺寸小,足以在实验室工作台和通风橱之间轻松移动。应用包括定量评价细胞活力、凋亡、其他偶联抗体标记物以及单次或多重微珠检测,从而进行蛋白和细胞分析。

活性氧簇 (ROS) 包括各种高反应活性氧化剂分子以及源于分子氧的自由基。正常细胞代谢和环境因素(包括空气污染物或香烟烟雾)均会产生 ROS。具有生理意义的主要 ROS 为超氧阴离子 (•O2-)、羟基自由基 (•OH) 和过氧化氢 (H2O2) (1-3)。中低水平的 ROS 会在血管紧张度调控、氧感应、免疫反应、翻译调控和信号转导等正常生理进程中发挥重要作用。高 ROS 浓度会导致碳水化合物、脂类、蛋白和 DNA 等细胞组分发生不良修饰。许多这些修饰与动脉粥样硬化、糖尿病、癌症和神经障碍等疾病有关。因此,还原和氧化(氧化还原反应)状态的调控不仅对细胞健康非常关键,而且还是许多疾病的一个有吸引力的治疗靶标 (1-3)。

2′,7′- 二氯二氢荧光素二乙酸盐 (DCFH-DA) 是一种非荧光荧光素衍生物,可用作一种非离子、非极性、可渗透细胞膜的染料。跨越细胞膜后,DCFH-DA 被胞内酯酶水解,产生非荧光二氯二氢荧光素 (DCFH)。DCFH 相对更具极性,但不能渗透细胞膜,因此会在细胞内聚集。在有细胞 ROS 的情况下,DCFH 被氧化成强荧光二氯荧光素 (DCF)。DCF 的荧光强度与细胞 ROS 总水平成比例 (4,5)。在 CellSimple™ Cell Analyzer 上使用 Open Flow Cytometry 应用可检测这些荧光信号。

  1. Alfadda, A.A. and Sallam, R.M. (2012) J Biomed Biotechnol 2012, 936486.
  2. Birben, E. et al. (2012) World Allergy Organ J 5, 9-19.
  3. Bolisetty, S. and Jaimes, E.A. (2013) Int J Mol Sci 14, 6306-44.
  4. Wang, H. and Joseph, J.A. (1999) Free Radic Biol Med 27, 612-6.
  5. Eruslanov, E. and Kusmartsev, S. (2010) Methods Mol Biol 594, 57-72.
仅供研究使用。不得用于诊断流程。
Cell Signaling Technology 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
CellSimple 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。
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